• 제목, 요약, 키워드: ATP

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효소법에 의한 ATP의 Bovine $\beta$-Casein에의 고정화 (Immobilization of ATP on Bovine $\beta$- Caseins by Using Transglutaminase)

  • 윤세억;박선영김명곤
    • KSBB Journal
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    • v.5 no.3
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    • pp.241-246
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    • 1990
  • Transgluaminase반응을 이용하여 ATP analog들$(C^8-ATP와 N^6-ATP)$을 casein에 고정화하였다. 고정화 ATP는 hexokinase에 의해 탈인산화되어 약55%가 ATP형으로 전환되었으며, 이는 acetate kinase에 의해 역으로 인산화되어 약80%가 ATP형으로 전환 되었다. $\beta$-Casein은 $$\alpha$_s_1-casein$에 비하여 glutamine 잔기의 수가 많으며,$N^6-ATP$의 경우 이의 alkyl carbamyl기와 casein의 carboxamide기 간의 정전기적 반발에 원인이 있는 것으로 보인다. ATP는 고정화하므로써 안정성이 증대되었으며, 고정화 ATP의 km치는 유리상의 ATP및 ATP analog의 그것과 비슷하였으나, 최대속도는 감소되었다. 고정하 ATP는 반응액에서 calcium의 첨가로 쉽게 침전되어 용액으로부터 거의 완전히 회수 되므로써, 반응액으로부터의 회수분리가 가능한 이점을 가졌다.

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북동적도 태평양 KODOS 97-2 해역 심해저 퇴적물 내의 ATP 분포양상 (Distribution of ATP in the Deep-Sea Sediment in the KODOS 97-2 Area, Northeast Equatorial Pacific Ocean)

  • 현정호;김경홍;지상범;문재운
    • 한국해양학회지:바다
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    • v.3 no.3
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    • pp.142-148
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    • 1998
  • 심해저 망간단괴 채광에 따른 저층생태환경의 변화를 평가하기 위한 기초환경연구의 일환으로 북동적도 태평양 심해저 퇴적물 내의 총 ATP(T-ATP), 용존 ATP(D-ATP) 그리고 입자성 ATP(P-ATP)의 농도 및 수직분포양상을 연구하였다. T-ATP는 퇴적물 6 cm 깊이 내에서 4.4~40.6, D-ATP는 0.6~16.1, 그리고 P-ATP는 3.0~29.2 ng/g dry sediment의 범위로 변했다. T-ATP의 약 84%, D-ATP의 약 81% 그리고 P-ATP의 약 74%가 표층 퇴적물 2 cm 이내에 분포하는 것으로 나타났으며, 분포양상이 퇴적물 내의 함수율과 높은 상관관계를 나타냈다. 이러한 결과는 심해저 퇴적물 내의 미생물(P-ATP) 분포가 수층으로부터 전달되는 유기탄소에 의해 결정됨을 의미한다. 다중주상 시료채집기를 사용해 획득한 퇴적물에서 P-ATP 최대층이 0~0.5 cm 깊이 내에 존재하는 것으로 나타나, 표층이 교란되는 상자형 퇴적물 채집기보다는 다중주상 시료채집기가 심해저 퇴적물내 ATP의 미세수직구조의 연구를 위해서 더욱 효과적인 것으로 판명되었다. 결론적으로 ATP 농도가 퇴적물 깊이 6cm 이내에서 뚜렷한 수직분포양상을 보이는 것으로 미루어, ATP 분포양상이 향후 심해저 광업에 따른 미생물 생체량 변화를 평가하기 위한 유용한 환경기초자료로 사용될 수 있는 것으로 나타났다.

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ATP and Purinergic Receptor Agonists Stimulate the Mitogen-Activated Protein Kinase Pathway and DNA Synthesis in Mouse Mammary Epithelial Cells

  • Yuh In-Sub
    • Reproductive and Developmental Biology
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    • v.28 no.4
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    • pp.211-219
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    • 2004
  • The effects of adenosine 5'-triphosphate (ATP) and ATP analogs, P/sub 2y/ purinoceptor agonists, on growth of normal mouse mammary epithelial cells (NMuMG) were examined. Cells were plated onto 24 well plates in DMEM supplemented with 10 % fetal calf serum. After serum starvation for 24 hours, ATP, P/sub 2y/ purinoceptor agonists (AdoPP[NH]P, ATP-α-S, ATP-γ-S, β, γ-me-ATP and 2me-S-ATP), P/sub 2u/ purinoceptor agonist (UTP) and P/sub 2y/ purinoceptor antagonists (Reactive Blue 2, more selective to P/sub 2y/ receptor than PPADS; PPADS) were added. DNA synthesis was estimated as incorporation of 3H-thymidine into DNA (1 hour pulse with 1 μ Ci/ml, 18~19 hours after treatment). ATP, Adopp[NH]P, ATP-α-S or ATP-γ-S, significantly increased DNA synthesis at 1, 10 and 100 μM concentrations with dose-dependency (P<0.05), and the maximum responses of ATP and ATP analogs were shown at 100 μM concentration (P<0.05). The potency order of DNA synthesis was ATP≥ATP- γ -S>Adopp [NH]P>ATP-α-S. β, γ -me-ATP, 2me-S-ATP and UTP did not increase DNA synthesis. In autoradiographic analysis of percentage of S-phase cells, similar results were observed to those of DNA synthesis. Addition of 1, 10 or 100 μM Reactive Blue 2 or PPADS significantly decreased ATP (100 μM)-induced DNA synthesis, however, PPADS was less effective than Reactive Blue 2. In Elvax 40P implant experiment, ATP directly stimulated mammary endbud growth in situ suggesting the physiological regulator of ATP in mammary growth. ATP 100 μM rapidly increased MAPK activity, reaching a maximum at 5 min and then gradually decreasing to the base level in 30 min. ATP analogs, Adopp[NH]P and ATP-γ-S also increased MAPK activity, however, β, γ-me-ATP and 2me-S-ATP did not. The inhibitor of the upstream MAPK kinase (MEK), PD 98059 (25 μM), effectively reduced ATP (100 μM) or EGF(10 ng/ml, as positive control)-induced MAPK activity and DNA synthesis (P<0.05). These results indicate that ATP-induced DNA synthesis was prevented from the direct inhibition of MAPK kinase pathway. Overall results support the hypothesis that the stimulatory effects of normal mouse mammary epithelial growth by addition of ATP or ATP analogs are mediated through mammary tissue specific P/sub 2y/ purinoceptor subtype, and MAPK activation is necessary for the ATP-induced cell growth.

무선통신기반 열차제어시스템 ATP 열차간격제어알고리즘 시뮬레이터 개발 (Development of ATP Train Separation Control Simulator for Radio-based Train Control System)

  • 윤용기;오세찬;최준영;박재영;양해원
    • 한국철도학회논문집
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    • v.15 no.1
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    • pp.29-36
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    • 2012
  • 본 연구는 무선통신기반 열차제어시스템의 ATP 기능을 차상장치와 지상장치에 배치하고 이를 검증하기 위한 ATP시뮬레이터 개발과 ATP알고리즘 검증을 포함한다. 무선통신기술을 열차제어에 적용하면 열차제어 시스템을 단순화하고 실시간 열차위치정보를 활용하여 열차운행의 안전성을 높이는 특징이 있다. 특히 ATP 지상장치와 차상장치에서 vital기능을 처리할 수 있다. 이 같은 vital기능을 어디에 배치하는 가에 따라서 인터페이스내용이 상이한 서로 다른 시스템이 구현된다. 따라서 지상과 차상에 vital 기능을 배치하는 것에 따른 특징을 도출하고, 이것에 의해서 영향을 받는 인터페이스 내용을 확인하는 것이 필요하다. 본 논문에서는 ATP 지상장치에 열차이동권한과 열차속도제한 등의 기능을 배치하였고, 전동기를 직접 구동하여 실시간 열차위치정보를 생성하는 ATP시뮬레이터를 개발하였고, 본 시뮬레이터를 사용하여 ATP 알고리즘을 검증하였다. ATP 알고리즘을 검증하기 위한 적절한 모의환경을 확인하였고, ATP 기능에 영향을 주는 주요 인자를 확인하였다.

Intragenic DNA Methylation Concomitant with Repression of ATP4B and ATP4A Gene Expression in Gastric Cancer is a Potential Serum Biomarker

  • Raja, Uthandaraman Mahalinga;Gopal, Gopisetty;Rajkumar, Thangarajan
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • v.13 no.11
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    • pp.5563-5568
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    • 2012
  • Based on our previous report on gastric cancer which documented ATP4A and ATP4B mRNA down-regulation in gastric tumors relative to normal gastric tissues, we hypothesized that epigenetic mechanisms could be responsible. ATP4A and ATP4B mRNA expression in gastric cancer cell lines AGS, SNU638 and NUGC-3 was examined using reverse transcriptase PCR (RT-PCR). AGS cells were treated with TSA or 5'-AzaDC and methylation specific PCR (MSP) and bisulfite sequencing PCR (BSP) analysis were performed. MSP analysis was on DNA from paraffin embedded tissues sections and plasma. Expression analysis revealed downregulation of ATP4A and ATP4B genes in gastric cancer cell lines relative to normal gastric tissue, while treatment with 5'-AzaDC re-activated expression of both. Search for CpG islands in their putative promoter regions did not indicate CpG islands (CGI) but only further downstream in the bodies of the genes. Methylation specific PCR (MSP) in the exon1 of the ATP4B gene and exon7 in ATP4A indicated methylation in all the gastric cancer cell lines tested. MSP analysis in tumor tissue samples revealed methylation in the majority of tumor samples, 15/19, for ATP4B and 8/8 for ATP4A. There was concordance between ATP4B and ATP4A down-regulation and methylation status in the tumour samples tested. ATP4B methylation was detectable in cell free DNA from gastric cancer patient's plasma samples. Thus ATP4A and ATP4B down-regulation involves DNA methylation and methylated ATP4B DNA in plasma is a potential biomarker for gastric cancer.

활성화된 사람 중성 백혈구에서 ATP와 Adenosine 처리에 따른 생화학적 반응의 변경 (Alteration of Biochemical Responses in Activated Human Neutrophils by ATP and Adenosine)

  • 박성수;이정수
    • 대한약리학회지
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    • v.26 no.1
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    • pp.55-66
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    • 1990
  • 안정 상태 및 활성화된 중성 백혈구에서 ATP는 superoxide 라디칼 생성을 자극하였으나 adenosine은 약간 억제하였다. ATP에 대한 활성화된 중성 백혈구의 반응이 안정상태의 중성 백혈구에서보다 크게 나타났다. 칼슘이 제거된 반응액에서 superoxide 라디칼 생성에 대한 adenosine의 억제효과가 관찰되었으나 ATP는 영향을 주지않았다. Superoxide 라디칼 생성에 대한 ATP의 자극 효과는 adenosine에 의하여 용량에 따라 억제되었다. ATP와 adenosine은 NADPH oxidase 활성도에 영향을 주지 않았다. ATP 또는 adenosine에 의한 superoxide 라디칼 생성의 변경은 다른 triphosphate nucleotide나 nucleoside에 의한 것보다 현저하였다. 활성화된 중성 백혈구에서 ATP와 ADP는 칼슘이온의 흡수를 더 자극하였고 세포질 유리 칼슘농도를 증가시켰으나, adenosine은 칼슘이온의 이동을 억제하였다. APT에 의한 세포질 유리 칼슘이온 농도의 증가는 verapamil에 의하여 효과적으로, tetrodotoxin에 의하여 약간 억제되었다. ATP에 노출된 활성화된 중성 백혈구에서의 superoxide 라디칼 생성에 대한 verapamil 과 tetrodotoxin의 억제 효과는 ATP의 영향이 없는 활성화된 중성 백혈구에서보다 크게 나타났다. Tetraethylammonium chloride는 superoxide 생성에 뚜렷한 영향을 미치지 못했다. CCCP, 2,4-dinitrophenol, diphenylhydantoin과 procaine은 활성화된 중성 백혈구에서 superoxide 라디칼의 생성을 억제하였다. 이들 가운데 CCCP만이 ATP의 자극 효과를 억제하였다. ATP는 활성화된 중성 백혈구에서의 sulfhydryl기의 손실을 더 자극하였으나 adenosin의 영향은 관찰되지 않았다. 이상의 결과로부터 중성 백혈구의 기능적 반응은 부분적으로 purine에 의하여 조절될 것으로 시사되었다. ATP와 adenosine은 칼슘 흡수와 그리고 아마도 세포막 인산화 반응 및 용해성 sulfhydryl기의 산화에 대한 영향을 통하여 활성화된 중성 백혈구의 반응을 더 변경 시킬 수 있을 것으로 추정된다.

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DEP를 이용한 세포 외부 ATP 제거 전처리 미세 유로의 개발 (Development of Microfluidic Channel for Pretreatment of Extracellular ATP using DEP Force)

  • 임희택;정효일
    • 대한기계학회:학술대회논문집
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    • pp.1687-1689
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    • 2008
  • In the detection of pathogenic microorganisms ATP-bioluminescence reaction is a fascinating method. ATP(adenosine triphosphate) is an energy source of all kinds of living organism and ATP-bioluminescence reaction uses this ATP. However, ATP exists not only in the cells but also outside the cells. Therefore ATP-bioluminescence reaction only with intracellular ATP is very important in pathogenic microorganism detection. Because of that reason we developed a microfluidic channel containing Dielectrophoretic zone which capture microorganisms and eliminating and washing extracellular ATP with ATP-degarading enzymes, adenosine phosphate deaminase and apyrase. Microorganisms are captured by pDEP force at the DEP electrode zone and only extracellular ATPs are washed and eliminated outside the zone.

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SCM환경에서 CRM을 이용한 ATP 모델 연구 (ATP Model Related CRM in SCM Environment)

  • 박주식;김원식;남호기;박상민
    • 대한안전경영과학회지
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    • v.3 no.1
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    • pp.45-56
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    • 2001
  • In the supply chain, The ATP function doesn't only give customers to confirmation of delivery. It can be used by the core function with ATP rule that can reconcile supplies and demands on the supply chain. Therefore We can acquire the conformation about accuracy on the due date of supplier by using the ATP function of management about real and concurrent access on the supply chain, also can decide the affect about product availability due to forecasting or customer's orders through the ATP. This study analyze the data concerned with ATP and define the necessity on a SCM solution. Under the these environments, after defining the ATP rule that can improve the customer value and data flow related the CRM, we propose the advanced ATP model that proposes the method and classification system that can flexibly aggregate the ATP data with ATP rule on the supply chain.

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Synthesis and Photoaffinity Labeling of 3'(2')-O-(p-azidobenzoyl) ATP

  • Shin, Seung-Jin;Lee, Woo-Kyoung;Park, Jong-Sang
    • BMB Reports
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    • v.30 no.3
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    • pp.211-215
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    • 1997
  • A photoactive analog of ATP, 3'(2')-O-(p-azidobenzoyl)-adenosine 5-triphosphate (AB-ATP) was synthesized by chemically coupling N-hydroxysuccinimidyl-4-azidobenzoate (NHS-AB) and ATP. The utility of AB-ATP as an effective active-site-directed photoprobe was demonstrated using catalytic subunit of protein kinase A as a model enzyme. Photoincorporation of AB-ATP was saturated with apparent dissociation constant of $30{\mu}m$ and protected completely by $100{\mu}m$ of ATP. When the enzyme was covalently modified by photolysis in the presence of saturating amounts of photoprobe, about 60% inhibition of enzyme activity was observed. These results demonstrate that AB-ATP has potential application as a probe to characterize ATP-binding proteins including protein kinases.

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흰쥐 부신 크로마핀 세포 칼슘통로 조절에 미치는 ATP의 효과 (Effect of ATP on Calcium Channel Modulation in Rat Adrenal Chromaffin Cells)

  • 김경아;구용숙
    • 한국의학물리학회지:의학물리
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    • v.25 no.3
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    • pp.157-166
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    • 2014
  • 뉴론에서 ATP는 분비 과립내에 신경전달물질과 함께 다량 저장되어 있다가 신경전달물질과 함께 분비되는 것으로 알려져 있으므로 신경전달물질의 자극-분비(stimulus-secretion) coupling 과정에 있어 중요한 조절작용을 할 것으로 기대된다. 그러므로 본 연구에서는 뉴론과 그 발생학적 기원이 동일한 부신수질 세포(adrenal chromaffin cell)를 대상으로 하여 세포막 칼슘통로를 통한 세포막 전류에 미치는 ATP의 영향을 측정함으로써 신경전달물질이 자극-분비 coupling 과정에 작용하는 ATP의 조절 작용을 알아보고자 하였다. 부신수질 세포의 칼슘통로를 통한 세포막 전류는 패치클램프 테크닉으로 기록하였다. 10 mM $Ba^{2+}$을 포함한 세포 외 용액에서, $Ba^{2+}$ current는 0.1 mM ATP를 세포외부에 처치했을 때, 평균 $36{\pm}6%$ (n=6) 감소되어 나타났고 ATP를 씻어준 후 전류는 다시 회복되는 가역적 반응을 보였다. ATP의 전류 억제 기전을 알아보고자 칼슘통로에서 관찰되는 현상 중의 하나인 소통(facilitation)현상을 기록하였다. +80 mV의 큰 prepulse를 준 후 바로 테스트 펄스를 주며 측정한 전류는 큰 prepulse에 의해 억제효과가 풀리는(disinhibition) 현상을 나타내었다. ATP 처치 후 큰 자극을 주어 $37{\pm}5%$ (n=11)의 $Ba^{2+}$ 전류 증가가 있었고 이는 ATP가 없는 상태에서 순수하게 큰 자극에 의해 소통되는 $25{\pm}3%$ (n=12)과 유의한 차이를 보였다(p<0.05). ATP의 억제 기전이 G-protein을 매개로 한 것인지를 알아보고자 가수분해 되지 않는 GTP 유도체인 $GTP{\gamma}S$를 세포 내에 준 후 $Ba^{2+}$ 전류를 기록하였다. $GTP{\gamma}S$에 의해 55%의 전류 크기의 감소가 있었고 이 환경에서 큰 prepulse를 인가하였을 때 $34{\pm}4%$ (n=19)의 소통현상을 보였다. 이는 $GTP{\gamma}S$가 없는 환경에서의 $25{\pm}3%$ (n=12)의 소통현상을 보인 것과 유의한 차이를 보였다(p<0.05). $Ba^{2+}$ current trace의 활성화 과정(activation)을 curve-fitting한 결과, control은 single exponential curve로 fitting된 반면, ATP 또는 $GTP{\gamma}S$를 처치한 경우, 그리고 ATP와 $GTP{\gamma}S$ 모두 처치한 경우에서는 double-exponential curve로 가장 잘 fitting이 되었다. 즉, ATP나 $GTP{\gamma}S$를 처치했을 때 모두 전류가 더 느리게 활성화되는 모양을 나타내었고, 이상의 결과로 미루어 ATP와 $GTP{\gamma}S$는 같은 방식으로 칼슘통로를 억제하고, 이러한 억제효과는 세포막에 아주 큰 전압을 걸어주면 칼슘 통로에 결합했던 G-protein이 막전압 의존적으로 떨어짐으로써 소실(disinhibition)된다고 해석된다. 본 연구에서 확인한 ATP의 칼슘통로 억제효과는 자체 크로마핀 세포 또는 주변 세포에서 아드레날린이 적게 분비되게 하는 autocrine 또는 paracrine inhibition 과정의 중요한 기전으로 작용할 것이다.