한국생물공학회:학술대회논문집

The Korean Society for Biotechnology and Bioengineering (한국생물공학회)
권호 표지

BIACORE 바이오센서를 이용한 B형 간염 표면항원 정량분석의 기초연구

  • 유창훈 (한양대학교 화학공학과 생물공정연구실) ;
  • 류강 (한양대학교 화학공학과 생물공정연구실) ;
  • 전준영 (디아이바이오텍(주)) ;
  • 이현익 (디아이바이오텍(주)) ;
  • 최성철 ((주)녹십자백신 GE팀) ;
  • 이은규 (한양대학교 화학공학과 생물공정연구실)
  • Published : 2001.11.07
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Abstract

We performed a basic experiment for rapid. on-line, real-time measurement of HBsAg by using a BIACORE biosensor, a chip-based sensor utilizing surface plasmon resonance technology to quantify the recognition and interaction of biomolecules. We immobilized an a -HBsAg antibody on a CM5 chip surface which was activated by N-hydroxysuccinimide for amine coupling with HBsAg, and measured the mass increase from the coupling. This study showed the potential of this biosensor-based method as a rapid, multi-sample, on-line assay. Once properly validated, it can serve as a more powerful method for HBsAg quantification.

Biacore 바이오센서를 이용하여 재조합 HBsAg 를 정량분석하기 위해 CM5 칩 위에 anti-HBsAg polyclonal antibody를 저밀도 (2,304.2 RU)와 고밀도(17635.9 RU)로 고정화한 후 다양한 농도의 HBsAg를 흘려주어 각 농도별 sensorgram을 얻었다. 각 sensorgram으로부터 결합된 HBsAg의 질량을 구하여 액체 시료 내의 HBsAg의 농도 대 칩에 결합된 HBsAg의 질량 사이의 상관관계를 구한 결과 Langmuir 단일층 흡착 등온선과 매우 유사한 형태의 calibration curve를 얻었다. 약 40 ${\mu}g/m{\ell}$ 까지 선형 관계가 유지되었다. 이 calibration curve를 double-reciprocal plotting 하여 $RU_{max}$ 값을 각각 구한 뒤, 단위 질량의 고정화된 항체 당 결합된 HBsAg의 질량을 구한 결과 저밀도 칩에서 0.024, 고밀도 칩에서 0.023 으로 매우 유사한 결과를 나타내었다.

Keywords