유전자 재조합 E. coli를 이용한 levofloxacin의 광학선택적 생산

  • 민병혁 (인하대학교 생물공학과 세포배양공학실험실) ;
  • 이상윤 (인하대학교 생물공학과 세포배양공학실험실) ;
  • 조종문 (인하대학교 생물공학과 세포배양공학실험실) ;
  • 오선영 ((주)보령제약 중앙연구소) ;
  • 장성재 ((주)보령제약 중앙연구소) ;
  • 임상민 ((주)보령제약 중앙연구소) ;
  • 김동일 (인하대학교 생물공학과 세포배양공학실험실)
  • Published : 2001.11.07

Abstract

Levofloxacin is L-form stereoisomer of ofloxacin. It has better antibacterial activity than D-oflxacin. In this study, levofloxacin was produced enantioselectively by using high density culture of recombinant E. coli containing a foreign esterase gene. Final cell concentration was 89 g/L at the end of fed-batch culture and the cells were used for levofloxacin production after IPTG induction at the optimized condition. For the immobilization of recombinant E. coli. 1.5% sodium alginate showed the best result to maintain enzyme activity and enantioselectivity.

Levofloxacin은 ofloxacin의 L형의 광학이성질체로 D형의 ofloxacin보다 뛰어난 향균활성을 갖는다. 본 연구에서는 광학선택성을 지닌 외래 효소를 재조합균주에서 발현시키고 고농도배양과 세포고정화를 통해 levofloxacin을 생산하였다. E. coli 고농도 배양을 수행하여 89 g/L의 세포농도를 얻었으며 IPTG 1 mM로 단백질 발현을 유도하여 levofloxacin 생산 반응에 사용할 때 최적 첨가시기를 결정하였다. 세포고정화를 위해서는 sodium alginate를 사용하였으며 1.5% 첨가시 가장 우수한 효소활성을 나타내었고 재사용시에도 효소활성과 광학선택성이 유지됨올 확인하였다.

Keywords