Abstract
Throughout the studies the following experimental results were obtained and summarized. 1. Treatment of MVE virus with acetone, Tween-ether and Tween-ether-protamine sulphate caused an eight to 16 fold increase in HA activity. 2. Treatment with acetone and Tween-ether resulted in a four fold increase in CF activity. Treatment with Tween-ether-protamine sulphate decreased the activity. 3. The crude virus showed a complete loss of infectivity after treatment with Tween-ether, but three log unit was, decreased with acetone treatment. 4. The HA activity of treated and crude virus was disappeared after heating at $37^{\circ}C$ for 60 minutes but CF activity was increased. 5. Tween-ether or acetone treatment equally applicable to the preparation of haemagglutinin for HI test. 6. Zonal centrifugation of crude virus in a linear ten to 60 percent sucrose gradient showed two peaks of CF activity, and one of high buoy ant density part accompanied by HA activity and infectivity and the other of lower density part. Acetone treatment brought a decrease of the high density CF activity but not affected the second peak of low density found with crude virus, and resulted in increased HA activity and decreased infectivity. The peaks of HA, CF and infectivity after acetone treatment were not clearly separated. Tween-ether treatment caused a loss of the peak of CF activity found in the area of high density with crude virus, but the peak in the area of low density was not affected. This peak of CF activity was separated from noninfectious HA activity. The HA and CF activities were considered to be contributed by different parts of the varion.
이 실험(實驗)은 뇌염(腦炎)바이러스(MVE virus)들 acetone, Tween-ether 그리고 Tween-ether-protamine-sulphate 로 처리한 후 그 바이러스가 지니고 있는 적혈구응집력가(赤血球凝集力價), 보체결합력가(補體結合力價) 그리고 감염력가(感染力價)의 변화 여부를 관찰함과 아울러 초원심분리법(超遠心分離法)에 의하여 이 바이러스가 지니고 있는 위의 세 가지 활성물질(活性物質)의 분획(分劃) 가능성(可能性)을 검토한 결과 다음과 같은 결과를 얻었다. 1) Acetone, Tween-ether 그리고 Tween-ether protamine-sulphate 처리에 의하여 MVE virus가 지니는 적혈구응집력가(赤血球凝集力價)는 8~16 배(倍)로 증가 하였다. 2) Acetone 및 Tween-ether 처리로 보체결합력가(補體結合力價)는 4 배(倍)로 증가 되었으나 Tween-ether protamine-sulphate 처리로는 저하되는 경향이 있었다. 3) Tween-ether로 처리하면 감염력가(感染力價)는 완전히 상실 되나 acetone으로 처리하면 $TCID50/log_{10}$ 3이 감퇴 되었다. 4) 위의 화학제의 처리와 관계없이 바이러스의 적혈구응집력가(赤血球凝集力價)는 $37^{\circ}C$ 에서 10 분간 가열(加熱)됨으로써 완전 소실 되었으나 보체결합력가(補體結合力價)는 상승 하였으며 이 활성도(活性度)는 $65^{\circ}C$ 에서 20 분간 까지도 계속 유지되었다. 5) 처리되지 않은 바이러스와 acetone 처리된 바이러스의 보체결합력가(補體結合力價)나 적혈구응집력가(赤血球凝集力價)는 Tween-ether 나 Tween-ether-protamine-sulphate 로 처리한 바이러스의 그것보다 열(熱)에 대해서 더 안정(安定)하였다. 6) 적혈구응집억제반응용(赤血球凝集抑制反應用) 항원제조(抗原製造)에 있어서 Tween-ether 로 처리하거나 acetone 으로 처리하여 만든 두가지 항원(抗原)은 모두 동일(同一)한 역가(力價)를 보였다. 7) 10~60%의 sucrose gradient centrifugation 에서 처리되지 않은 바이러스는 두개의 보체결합(補體結合)피크가 저농도(低濃渡)와 고농도(高濃渡)에서 각각 나타났으며 저농도(低濃渡)에서 얻은 재료는 적혈구응집력(赤血球凝集力)과 감염력(感染力)을 동반하고 있었다. 8) Acetone 으로 처리된 바이러스의 초원심분리(超遠心分離)에서는 위에 말한 두 보체결합(補體結合)피크 중 고농도부(高濃渡部)의 것은 감소 되었으나 다른 하나는 영향을 받지 않았다. 그리고 적혈구응집력가(赤血球凝集力價)가 증가된 반면 감염최고력가(感染最高力價)는 감퇴 되었으며 이 세 가지 활성(活性)은 acetone 처리 후에는 명확히 분획(分劃)되지 않았다. Tween-ether 로 처리된 바이러스는 초원심분리(超遠心分離)에 의하여 고농도부(高濃渡部)에 있는 보체결합(補體結合)피크는 완전 소실된 반면 저농도부(低濃渡部)에 있는 보체결합최고력가(補體結合最高力價)는 영향을 받지 아니 하였으며 이 피크는 감염력(感染力)을 동반하지 않는 적혈구응집소(赤血球凝集素)와 분획(分劃)이 가능 하였다.