Microbial Production of Yeast Cell Wall Lytic Enzymes

효모세포벽(酵母細胞壁) 용해효소(溶解酵素)의 미생물 생산(生産)

1) In order to obtain a microbial strain having a strong yeast cell wall lytic activity, about 156 isolates capable of forming clear zones on baker's yeast-peptone-bouillon agar plate were obtained from soil, mud and water samples and a strain K-42 with the highest lytic activity was identified as Bacillus circulans. 2) Effect of carbon sources on the lytic enzyme production by the K-42 strain was in the decreasing order of maltose>glucan>xylose>control in 2-day culture and of lactose>galactose>glucan>control in 3-day culture. Effect of inorganic nitrogen sources was in the decreasing order of ammonium acetate>sodium nitrate>control in 2-day culture and of ammonium chloride>ammonium oxalate>control in 3-day culture, whereas organic nitrogen sources except milk casein showed an increase in 2-day culture and a decrease in 3-day culture. Synergistic effect of carbon sources and nitrogen sources was not observed. 3) The enzyme production by the K-42 strain was greatly affected by pH change of the culture medium, thus a high lytic activity could be maintained by keeping the pH range of $7{\sim}8$ and adding carbon or nitrogen sources. 4) Optimum conditions for the lytic activity of the K-42 strain were obtained at $pH\;7{\sim}8$ and $60^{\circ}C$ and the extent of hydrolysis toward heated yeast cell wall was 65%.

1) 효모세포벽(酵母細胞壁) 용해활성(溶解活性)이 큰 미생물을 얻기 위하여 baker's yeast-peptone-bouillon agar 평판(平板)배지에서 투명하게 용해된 부위를 형성하는 균주(菌株)를 서울 및 경기지방의 토양 및 하수(下水)시료에서 156개 분리하였고 이들중 활성(活性)이 가장 큰 균주(菌株)로 K-42를 선발하여 Bacillus circulans로 동정(同定)하였다. 2) 균주(菌株) K-42에 의한 효모세포벽 용해효소의 생산을 보면 당류 첨가의 경우 배양 2일째에는 maltose>glucan>xylose>control의 순으로, 3일째에는 lactose>galactose>glucan>control의 순으로 나타났다. 무기 질소원의 경우는 배양2일째 ammonium acetat>sodium nitrate>control의 순으로, 3일째는 ammonium chloride>ammonium oxalate>control의 순으로 나타났으며 milk casein을 제외한 거의 모든 유기질소원은 배양 2일째 활성(活性)의 증가를 보였으나 3일째는 모두 감소하였다. 당류와 질소원의 배합첨가는 상승효과가 없었다. 3) 효소생산에 미치는 당류와 질소원의 첨가 효과는 배양기간 중 pH의 변화와 깊은 관계가 있었는 바 배양중 $pH\;7{\sim}8$을 계속 유지시켜 주면서 당류 또는 질소원을 첨가하면 높은 활성(活性)을 상당기간 계속 유지할 수 있었다. 4) K-42균주(菌株)가 분비(分泌)하는 세포벽(細胞壁) 용해효소의 작용최적(作用最適) 조건은 $pH\;7{\sim}8$, $60^{\circ}C$이었고 열처리(熱處理) 효모세포벽의 용해율은 65%이었다.