Similarities of Scaritoxin to Ciguatoxin on the Chromatographic Behaviours

Scaritoxin과 Ciguatoxin의 크로마토그라피상에서의 몇가지 유사성

In studying the structural work on ciguatoxin, parrot fish collected were identified as Scarus sordidus, S. frenatus, S. scaber and S. pectarlis, in which only S. sordidus contained toxic materials. Crude toxins obtained by silicic acid column chromatography, could be separated on a DEAE-cellulose column into two fractions, ST-1(less polar) and ST-2(polar) eluted with chloroform and chloroform-methanol(1:1). Furthermore ST-1 could be changed into ST-2 by repeated chromatography on DEAE-cellulose. Rf values of ST-1 and ST-2 were 0.60-0.75 and 0.30-0.54 on TLC coated with silica gel 60F-254 developed by chloroform-methanol-water-acetic acid (90:9.5:0.2:0.3) mixture. The peaks of ST-1 and ST-2 were not observed on each HPLC chromatogram at low sensitivity(2X), but by bioassay they were detected in the fraction of 24-27ml(less polar toxin, 120ng) and 22-27 ml (polar toxin, 150 ng). Less polar ciguatoxin from morey eel viscera also showed its peak in the same elution volume(25ml). Being subjected to chromatography on basic aluminum oxide (activity grade I) or to alkaline treatment, followed by basic aluminum oxide (activity grade I) chromatography ST-1 toxin was remarkably converted into the polar toxic component supposed to be polar ciguatoxin in both cases. In the latter case, approximately 74% of the residual toxicity was changed into the polar component, accompanied by about 50% loss of the initial toxicity. More than 26% of ST-2 toxicity was transformed into the less polar toxic component supposed to be less polar ciguatoxin on a deactivated aluminum oxide (activity grade V) column.

Ciguatoxin 구조 연구의 일환으로 파랑비늘돔 중에 서 독성분을 추출하였는데 Scarus sordidus만 근육과 내장에 독이 있었으나, S.frenatus, S.scaber and S.pectorlis에는 모두 독이 없었다. 실리스산컬럼에서 얻은 조독을 DEAE-셀루로즈 컬럼상에서 콜로로포름, 클로로포름-메타놀 (1 : 1) 및 메타놀로 전개하였더니 클로로포름 유출액(ST-1) 과 클로로포름-메타놀(1 : 1) 유출액에서 독성분이 발견되었고, 메타놀 유출액에서는 독성분이 검출되지 않았다. ST-1과 ST-2을 silica gel 60F-254에 spot하여 클로로포름-메타놀-물-식초산 (90 : 9.5 : 0.2 : 0.3)으로 전개하였더니, 그Rf값이 각각 0.60-0.75, 0.30-0.54였다. DEAE-셀루로즈 컬럼에서 얻은 ST-1을 재재크로마토그라피 하여도 역시 ST-1과 ST-2로 나누어졌다. 이렇게 얻은 ST-1과 ST-2는 세파텍스 LH-20에 흡착시켜, 클로로포름-메타놀(1 : 1) 용매로 전개할 때, 머무름시간이 모두 같았고, 역상 LiChrosorb RP-18를 이용한 HPLC상에서도 머무름시간이 동일하였다. 또 순수한 $ST-1\;(1.10\;{\mu}g)$ 그리고 이것을 1 N NaOH로 처리한 것 $(1.13\;{\mu}g)$을 활성도V인 알루미나 컬럼에 흡착시켜 클로로포름-메타놀 혼합액으로 전개하였더니 알카리처리를 하지 않는 경우는 $0.35\;{\mu}g)$가 클로로포름-메타놀의 9 : 1, 1 : 1 유출액에서, $(0.55\;{\mu}g)$가 메타놀-물 (1 : 1) 유출액에서 검출되었으나, 알카리처리를 한 경우는 처음 독성의 50%가 소실되어, 클로로포름-메타놀 (9 : 1) 유출액에서 $(0.21\;{\mu}g)$, 메타놀-물 (1 : 1) 유출액에서 $(0.80\;{\mu}g)$ 검출되었다. 하면 morey eel내장에서 얻은 독물질도 DEAE-셀루로즈에서 ST-1 과 ST-2로 나누어지며, 이 ST-1의 TLC, HPLC 및 알루미나 컬럼상의 거동이 파랑비늘돔에서 얻은 ST-1의 그것과 같으므로 scaritoxin으로 보고한 ST-1은 ciguatoxin의 형태인 less polar cigutoxin (LPCTX) 으로 생각된다.