Determination of Intracellular ATP of bacteria on the surface of Chicken

Bioluminescence방법에 의한 계육표면에 존재하는 세균수 측정

Determination of bacterial adenosine triphosphate (ATP) based on luciferin-luciferase bioluminescene reaction was applied to the measurement of bacteria on the surface of chicken as an alternative rapid method. The light yield was proportional to the concentration of ATP giving a straight line within a range of $10^{-10}\;to\;10^{-6}M$. The bacteria isolated from the surface of chicken were identified as Escherichia coli, Hafnia alvei, Pseudomonas putida and Aeromonas hydrophila. When the ATP contents of each bacteria were determined by bioluminescence reaction and compared, there was no significant difference (r = 0.95). The Patterns of growth curves for E. coli look very similar, when the bacterial growth was monitored by ATP content and viable cell count. When bacterial ATP of each samples collected every 2 days during storage for 14 days at $4^{\circ}C$was determined and compared with viable cell count, it gave a good correlation (r = 0.95, n = 32).

Bioluminescence방법에 의하여 세균내에 존재하고 있는 ATP를 추출하여 그양을 정량분석하므로서 제육표면에 생존하고 있는 세균수를 신속하게 측정하는데 응용될 수 있는 가능성을 조사하기 위하여 본 실험을 실시하였으며, 그 결과는 1. Luciferin-luciferase에 작용하는 ATP농도가 $10^{-10}M$부터 $10^{-6}M$까지 증가함에 따라 발생된 빛의 양도 비례적으로 증가했다. 2 . 계육에서 분리동정된 부패균인 E. coli, H, alvei, P. putida, A. hydrophila에서 추출된 ATP 농도와 세균수와의 관계는 거의 일직선으로 나타난다. 3. E. coli에 있는 ATP양은 생존중 거의 변화하지 않는 것으로 나타났다. 4 계육의 저장기간동안 증식된 세균수에 따라 ATP 농도도 비례 적으로 증가되며 이때 상판계수(r)는 0.95로 나타났다. 5. 계육에 오염된 세균수와 ATP 농도와의 관계에서 볼 때 ATP농도가 $10^{-7}M$부근에서부터 부패가 시작된다고 사료된다. 6. 개발된 방법에 의하여 계육표면에 존재하는 세균의 ATP 농도를 측정하여 세균수를 간접적으로 신속히 ( 1시간내) 조사할 수 있다.