Amplification of Chlamydia trachomatis in Animal Cell Host

동물세포내에서의 유체성 세균의 증식

Abundant amount of Chiamydia trachomatis could be amplified in mammalian McCoy cells and purified using descontinuous Uroarafin gradient centrifugation. As a chemical means io increase the Chlamydia trachomatis inclusions in McCoy cells IUdR treatment was found to be more effective than the cycloheximide treatment and was recommendanble for the proliferation of Chlamydia trachomatis. Centrifugation promoted Chlamydia trachomatis adhesion to McCoy cell surface, and maximal percentage of infected cells was obtained at about 3000g. The purified Chlamydia trachomatis could be kept in SPG solution for 48 hours at +4$^{\circ}C$ but for longer storage freezing to -7$0^{\circ}C$ was necessary.

Chlamydia trachomatis는 인간에게 각종 질병을 일으키는 병원균이며 최근 그 중요성 이 크게 증가하였다. Chlamydia trachomatis감염에 대한 재래식 진단방법은 낮은 정밀도와 낮은 특이성을 갖고 있으며 방법의 수행 자체도 어렵다는 문제점을 지니고 있다. 이들 재래식 진단방법들이 안고 있는 문제점들을 해결하기 위하여 항-병원균 모노클로날 항체를 생산하는 하이브리도마 세포주를 만들 최종목표를 갖고 우선 생쥐에 면역시킬 항원으로 사용할 Chlamydia trachomatis를 동물 숙주 세포내에서 증식시키는데 끼치는 각종 인자들에 대한 영향을 조사연구하였다. 동물 세포 유래의 McCoy 세포내에서 충분한 양의 Chlamydia tracthomatis를 증식시킨 후 불연속 Urografin 구배 원심분리에 의해 정제하였다. Mc-Coy 세포 내에서의 Chlamydia trachomatis의 생성 개체수를 늘리기 위하여 화학제제를 사용했던 바 IUdR 처리가 cycloheximide 처리보다 더 효과적이었으며 Chlamydia trachomatis 증식을 위해 쓸 수 있는 방법이었다. 원심력의 증가가 Chlamydia tracho chomatis의 McCoy 세포 표면에의 흡착을 증진시켰으며 약 3000g 근처에서 최대 감염율을 보였다. 분리 정제한 Chlamydia trachomatis는 SPG 용액 내에서 4$^{\circ}C$에서 48시간 동안 저장될 수 있었으며 더욱 오래 동안 저장시키기 위해서는 -7$0^{\circ}C$까지 냉동시키는 것이 필요하였다.