이상계내에서 고정화리파제에 의한 트리글리세리드의 가수분해

Hydrolysis of Triglyceride in Two Phase System Using Immobilized Lipase

Candida rugosa와 Rhizopus arrhizus 리파제를 photocrosslinkable resin prepolymer에 고정화시켜서 이소옥탄을 유기용매로 사용한 이상계를 이용해서 유지분해 및 에스테르교환 반응을 보고자했다. Dioctylsulfosuccinate가 가장 좋은 surfactant였다. 소수성 젤인 ENTP-3000에 고정된 리파제가 좋은 활성을 나타냈고 친수성 젤인 ENT-4000에 고정된 리파제가 유기용매에 대해 안정했다. 고정화 matrix의 소수성이 증가될수록Vm(app)는 증가되었으나 Km(app)는 거의 일정했다. 리파제의 최적 pH는 소수성 젤인 ENTP-3000에 고정된 경우 C. rugosa와 R. arrhizus 리파제에 대해서 각각 6.0과 6.5였으나, 친수성 젤에 고정된 리파제는 짧은 시간 반응에는 pH에 크게 영향을 받지 않았으나 긴 시간 동안 반응시킬 때는 역시 pH6.0과 6.5에서 각각 C. rugosa와 R. arrhizus 리파제가 높은 양의 지방산을 분해시켰다. 리파제를 entrapment 시키면 열안정성이 증가됨을 알 수 있었다.

Lipases from Candida rogosa and Rhizopus arrhizus were immobilized by entrapment with photo-crosslinkable resin prepolymer for the study of fat splitting and interesterification in isooctane-two phase system. Dioctylsulfosuccinate was selected as the most suitable surfactant during the immobilization. Lipase entrapped with hydrophobic photo-crosslinkable resin prepolymer(ENTP-3000) exhibited the highest activity, whereas lipase entrapped with hydrophilic gel(ENT-4000) was more stable in organic solvent. As the degree of hydrophobicity of the immobilization matrix was increased, Vm(app) of the lipase entrapped was increased, but Km(app) was approximately constant. While the optimum pH of the lipases entrapped on hydrophilic gel (ENT-4000) were around pH 7.0 for Candida lipase and Rhizopus lipase, the reaction rate of the lipases entrapped on hydrophobic gel were less dependent on pH variations for short reaction time. However, for longer reaction time, the lipnses from C. rugosa and R. arrhizus entrapped on hydrophobic gel yielded maximum rate at pH 6.0 and 6.5, respectively, Entrapment method endowed the lipase with thermal stability.