Molecular Cloning of the Gene in Schizosaccharomyces pombe Related to the CDC3 Gene in Saccharomyces cerevisiae

Saccharomyces cerevisiae의 CDC3 유전자와 유사한 Schizosaccharomyces pombe 유전자의 클로닝

The budding yeast S. cerevisiae contains 10-nm filament ring that lies just inside the plasma memhrane in the region of the mother-bud neck. It is possihle that CDC3. CDCIO, CDCII. CDCI2 genes encode the filaments. Recently it has been shown that the CDC3 and CDCI2 gene products arc localized to [he vicinity of the neck lilaments by immunolluorescence. However. the role of the lilament ring is not clear. In order to find out the role of filament ring. I have tried to clone the similar gene in S. pomhe to the CDC3 in S. cerevisiae. Genomic library was constructed by use of $\lambda$gtll expression vector and screened with CDC3 antibodies. From sequencing data, there were more than two introns in the newly cloned gene. There was 62% homology between the part of the predicted amino acid sequence of cloned gene and CDC3 amino acid sequence.

출아법으로 분열하는 S. cerevisiae 는 mother cell 과 bud cell 과의 연결부위근처의 원형질막 내부에 10-nm filament ring 이 존재한다. CDC3, CDC10, CDC11, CDC12 유전자가 이 filament 를 암호화할 가능성이 많은 것으로 알려져 있으며, 근래에 CDC3 와 CDC12 유전자의 생성물들이 filament ring 에 존재한다는 것이 형광현미경을 이용하여 밝혀졌으나 그 기능은 밝혀지지 않았다. 이에 본인은 10-nm filament ring 의 지능을 알아보기 위하여 ring을 이루고 있는 S. cerevisiae 의 CDC3유전자와 유사한 S. pombe 유전자의 clone 을 시도하였다. 이를 위하여 .lambda. gt11 expression vector 에 S. pombe genomic library 를 만들고 CDC3 항채를 이용하여 screen 하였다. Screen 된 유전자를 sequencing 하여 본 결과, 2개 이상의 intron 이 존재하는 것이 밝혀졌으나, 일부 부위의 아미노산 서열과 CDC3 아미노산 서열을 비교하여 본 결과, 약 62%의 유사성이 존재하였다.