Preparation of Antiserum against Hemolysin from Vibrio vulnificus using Hemolysin-bound Liposomes

Liposome을 이용한 Vibrio vulnificus가 생산하는 용혈독소의 항혈청 제조법

To investigate hemolysin from Vibrio vulnificus in terms of protein chemistry and immunochemistvy, the simple method to produce antiserum was developed as follows ; Crude hemolysin from Vibrio vulnificus was mixed with cholesterol-phosphatidylcholine-liposome. Only hemolysin with molecular weight of 50kD was selertively bound to the liposome. Thus, without purification of crude hemolysin, liposome bound hemolysin was used as antigen to produce antiserum by injecting into back muscle of a rabbit. Resultant antiserum reacted only with hemolysin. Hemouysin of Vibrio vulnificus from patients and environment was formed single band in gel diffusion precipitation reaction with antiserum.

Vibrio vulnificus가 생산하는 용혈독소의 단백화학적, 면역화학적 연구에 이용할 목적으로 이 균의 용혈독소에 대한 항혈청을 간편하게 만드는 방법을 실험한 결과는 다음과 같다. Vibrio vulnificus가 생산하는 조용혈독소를 인위적으로 만든 liposome (cholesterol-phos-phatidyl-liposome)에 혼합하여 반응시킨 결과 분자량 50kD의 단백질인 용혈독소만 선택적으로 liposome에 결합되었다. 그러므로 liposome에 결합시킨 조용혈독소를 면역원으로 하고 이 면역원을 토끼의 등근육에 주사하여 항혈청을 간편하게 만들 수 있었으며 이 항혈청은 용혈독소에 대한 특이성이 높았다. 환자와 환경에서 분리된 Vibrio vulnificus의 용혈독소와 liposome를 이용하여 제조한 항혈청을 gel 내 침강반응으로 확인한 결과 단일 침강선을 형성하였다.