초록
D. melanogaster를 대상으로 두 종류의 P element construct, 즉 Pc[(ry+)B]와 p[(ry+)$\Delta$SX9]을 사용한 형질전환 실험을 통하여 자율적 및 비자율적인 P element construct간의 vector로써의 효율성을 분석했다. 자율적인 P element 내에 rosy 유전자를 포함하고 있는 Pc[(ry+)B] construct를 진정 M 계통형인 ry506 돌연변이 계통에 주입시켰다. 또한 비자율적인 P element 내에 rosy 유전자를 포함하고 있는 p[(ry+)$\Delta$SX9] construct와 전이효소의 공급원으로써 p-$\Delta$2-3hs$\pi$ helper plasmid를 역시 같은 계통의 ry506 돌연변이 계통에 주입시켰다. Dechorination 방법에 의해 총 1143 embryo를 대상으로 microinjection 한 결과, 모두 35 계통의 형질전환된 정상형의 눈을 가진 계통을 얻었다. P element construct를 주입시킨 전체 1143 embryo 중에서 약 20% 정도가 성체로 부화되었으며, 부화된 개체 가운데 약 40% 정도가 눈 색깔이 거의 정상형과 같은 G0 transformant 로 나타났다. 그러나 생식력을 가진 G0 transformant의 약 40% 만이 G1 transformant로 나타남으로써 모두 35 계통의 transformant를 얻었다. 따라서 G0 단계에서 나타난 형질전환 현상에는 반드시 rosy transformant의 염색체 삽입에 의해서 만이 아니라 세포질내에서도 construct내의 rosy 유전자의 발현이 가능한 것으로 분석되었다. 또한 형질전환율에 있어서는 Pc[(ry+)B]와p[(ry+)$\Delta$SX9] construct 간에 유의한 차가 없는 것으로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때, 실험 목적에 따라 자율적인 P element 또는 helper DNA를 이용한 비자율적인 P element를 효과적인 vector 로 선택 이용함으로써 특정 유전자를 곤충집단내로 침투 및 고정시킬 수 있다고 판단된다.
We have used two kinds of P element constructs, Pc[(ry+)B] and p[(ry+)$\Delta$SX9], for genetic transformation by microinjection of D. melanogaster. Pc[(ry+)B] construct carrying the rosy gene within an autonomous P element was injected into a true M strain caring the ry506. mutation. The source of transposase for microinjection and transformation was provided by a P element helper plasmid designated p-$\Delta$2-3hs$\pi$, which was co-injected with nonautonomous P[(ry+)$\Delta$SX9] construct into same ry506 M strains. A dechorination method was adopted and 35 independent transformed lines were obtained froin 1143 G0 Injected (35/1143). About 20% of the injected embryos eclosed as adults. Among G0 eclosed flies, approximately 40% exhibited eye color that was similar to wild-type (ry+), but about 60% of fertile G0 transformed lines appeared to have no G1 transformants. Therefore it is unlikely that G0 expression requires integration of the rosy transposon into chromosomes. Pc[(ry+)B] and P[(ry+)$\Delta$SX9] constructs were found to be nearly same in the frequency of element-mediated transformation. On the basis of these results, nonautonomous P elements constructs could he used as same effective vectors in P element-mediated transformation for introducing and fixing genes in insect populations.
