Studies on the Electrofusion between Lactobacillus acidiophilus 88 and Lactobacillus bulgaricus IFO 13953

Lactobacillus acidophilus 88과 Lactobacillus bulgaricus IFO 13953간의 Electrofusion에 관한 연구

  • 조영배 (부산대학교 미생물학과) ;
  • 김혜정 (부산대학교 미생물학과) ;
  • 김성구 (부산수산대학교 생물공학과) ;
  • 백형석 (부산대학교 미생물학과) ;
  • 전홍기 (부산대학교 미생물학과)
  • Published : 1996.02.01

Abstract

균주개량 방법의 일환으로 electrofusion 법을 이용하여 protease 화성, lipase 활성, 내열성, 내산성 등이 우수한 L. bulgaricus와 bacteriocin을 생산하는 L. acidophilus 간의 융합조건을 검토하였다. Electrofusion에 의해 생성된 융합주는 식별하기 위해 streptomycin(2mg/ml)과 lincomycin(5$\mu\textrm{g}$/ml)에 내성을 나타내는 L. bulgaricus 변이주이와 kanamucin (600$\mu\textrm{g}$/ml)에 내성을 나타내는 L. acidophilus 88 변이주를 분리하였다. Electrofusion을 500V/cm, 100mses(49phms, 2300 capacotance)에서 수행했을 때 가장 융합이 잘 일어났으며 전기장의 세시와 시간이 증가할수록 융합요율이 현저히 감소하였다. 2가 양이온은 대체적으로 융합효율을 감속시키는 경향을 나타내었으나 1mM MgCl$_2$에서 융합 효율이 약간 증가하였다. PEG 400을 elec-trogusion buffer에 30%되도록 첨가했을 때, 가장 양호한 융합효율을 나타내었으며 그 이상에서는 오히려 융합 효율이 감소하였다. Electrofusion법과 PEG 매개에 의한 융합법의 융합 효율을 비교한 결과, 거의 비슷한 융합 효율을 나타내었으나 electrofusion 법과 PEG매개에 의한 융합법을 혼합하였을 때 가장 양호한 융합 효율을 나타내었다.

Keywords

References

  1. Enz. Microbiol. Technol. v.2 Protoplast fusion-a tool for genetic manipulation and breeding in industrial microorganism Peberdy, J. F.
  2. Planta v.115 A method for high frequency intergeneric fusion of plant protoplasts Kao, K. N.;Michayluk, M. R.
  3. Proc. Natl. Acad. Sci. v.73 Fusion of protoplast of Bacillus megaterium Fodor, K.;Alfoldi, L.
  4. Appl. Environ. Microbiol. v.52 Protoplast fusion of Lactobacillus fermentum Iwata, M.;Mada, M.;Ishiwa, H.
  5. Kor. J. Appl. Microbiol. Bioeng. v.14 Studies on the protoplast fusion of Lactobacillus casei Baek, Y. J.;Yoo, M.;Kim, Y. K.;Bae, H. S.;Kim, H. U.
  6. Agric. Biol. Chem. v.47 Fusion of protoplast of Streptococcus lactis Okamoto, T.;Fujita, Y.;Irie, R.
  7. Biochimie v.72 Genetic transformation of Lactobacillus casei by electroporation Natori, Y.;Kano, Y.;Imamoto, F.
  8. J. Gen. Appl. Microbiol. v.33 Protoplast fusion of Lactobacillus acidophillus and Streptococcus lactis via electric field or chemical induction Reed, W. M.
  9. Appl. Environ. Microbiol. v.55 Genetic transformation of intact Lactococcus lactis subsp. lactis by high-voltage electroporation McIntyre, D. A.;Harlander, S. K.
  10. Biochimie v.70 Strategies for the development of bacterial trasnformation systems Mercenier, A.;Chassy, B. M.
  11. Appl. Environ. Microbiol. v.45 Detection and activity of lactacin B, a bacteriocin produced by Lactobacillus acidophillus Barefoot, S. F.;Klaenhammer, T. R.
  12. 식품과학 v.21 김치발효와 보존성 최신양
  13. 인하대학교 기초과학연구소 논문집 v.11 김치 부패시 Brettanomyces custersii와 Klebsiella oxytoca의 편리공생 한홍의;임종락;박현근;문상식;박영선;주홍택
  14. Bulletin of the Scientific Research Institute v.5 Studies on the effects of polygalacturonase and film-forming microbes on the soft-deterioration of the pickled vegetables Ha, S. S
  15. Appl. Environ. Microbiol. v.53 Conjugal transfer of plasmid-encoded determinants for bacteriocin production and immunity in Lactobacillus acidophilus 88 Muriana, P. M.;Klaenhammer, T. R.
  16. J. Appl. Bacteriol. v.23 A medium for the cultivation of Lactobacillus De Man J. C.;Rogosa, M.;Sharpe, M. E.
  17. Agric. Biol. Chem. v.54 Transformation of Lactobacillus helveticus subsp. jugurti with plasmid pLHR by electroporation Hashiba, H.;Takiguchi, R.;Ishii, S.;Aoyama, K.
  18. Kor. J. Appl. Microbiol. Biotechnol. v.22 Stuides on the protoplast formation and regeneration of Lactobacillus acidophillus 88 Jun, H. K.;Heo, K.;Jo. Y. B.;Bail, H. S.
  19. Mol. Gen. Genet. v.162 Bacterial protoplast fusion : Recombination in fused protoplasts of Streptomyces coelicolor Hopwood, D. A.;Wright, H. M.
  20. Kor. J. Appl. Microbiol. Biotechnol. v.21 Studies on the protoplast fusion between Lactobacillus bulgaricus and Lactobacillus helveticus Park, H. J.;Baik, H. S.;Song, J. C.;Jun, H. K.
  21. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. v.73 Fusion of protoplast of Bacillus megaterium Fodor, K.;Alfoldi, L.
  22. Agric. Biol. Chem. v.51 Protoplast fusion of Lactobacillus casei Kang, Y.;Kim, J. H.;Ryu, D. Y.
  23. Agric Biol. Chem. v.47 Fusion of protoplast of Streptococcus lactis Okomoto, T.;Fujita, Y.;Irie, R.
  24. FEMS Microbiol. Lett. v.35 Intergeneric protoplast fusion in lactic acid bacteria Cocconcelli, P. S.;Morrelli, L.;Vescovo, M.;Bottazzi, V.
  25. J. Gen. Microbiol. v.126 Protoplast fusion in Streptomyces : Fusions involving ultravioletirrediated protoplast Hopwood, D. A.;Wright, H. M.