Immunoblot patterns of clonorchiasis

면역이적법에 의한 간흡충 항원분획과 감염자의 항체반응 양상

  • 홍성태 (서울대학교 의과대학 기생충학교실 및 감염병연구소) ;
  • 고원규 (서울대학교 의과대학 기생충학교실 및 감염병연구소, 인제대학교 의과대학 기생충학교실, 국립보건원 의동물과)
  • Published : 1997.06.01

Abstract

Clonorchis sinearis is a liver fluke which is the most prevalent helminth of humans in Korea. The better diagnostic measure of clonorchiasis is required for its nationwide control program. The present study observed antigenic bands of C. sinensis and reacting immunoglobulins in serum of infected residents. Adult C. sinensis were recovered from experimentally infected rabbits and soluble crude extract of the worms was used as the antigen after supplementation of E-64, a cysteine proteinase inhibitor. SDS- PAGE of the crude antigen resolved more than 20 protein bands between 200 and 14 kDa. The sera of infected humans collected at an endemic village showed specific IgG and IgE antibodies but little IgM and IgA antibodies. The protein bands of 94, 80, 72, 68, 52, 47, 43, 37, 34, and 28-25 kDa strongly reacted with serum Ig(GMA) or IgG antibody and 64, 62, 52, 47,44, 34,28, and 26 kDa bands reacted with serum IgE antibody. However, the 94, 80, 72, 68, 64, 62, 52, 47, and 40 kDa bands of C. sinensis antigen were found non specific. The protein bands of 43, 34, and 28-25 kDa of C. sinensis are primary target molecules of further analysis.

우리 나라에서 가장 감염자가 많은 기생충인 간흡충의 현 감염에 특이한 항원 분획을 찾고자 면역이적법을 이용하여 감염자의 혈청을 검색하였다. 실험적으로 토끼에서 얻은 간흡충 성충의 조항원에 시스테인계 단백질분해효소 억제제인 I-64를 첨가하였을 때 큰 분자량의 분획을 가장 잘 보존하여 200-14 kDa의 범위에 20개 이상의 분획을 관찰하였다. 이 조항원을 이용하여 경북 상주군 주민의 혈청을 면역이적법으로 검사하였다 대변검사, 피내반응검사, 효소면역법검사(ELISA)를 이 용하여 검사한 73명 중 충란양성자 49명의 혈청 내에 특이 IgG와 IgE 항체가 생성되었고, IgM과 IgA 항체는 특이하게 반응하지 않았다. 여러 항원 분획 중에서 43, 34, 28-25 kDa 항원이 현 감 염에 특이한 분획이고. 항체와 반응한 94, 80, 72, 68, 64, 62, 52, 47, and 40 kDa 분획은 특이하지 않은 분획임을 확인하였다. 추후에 각 항원과 이에 대한 혈청반응에 대하여 특성을 더 연구 할 필요가 있으며, 특히 치료후 추적검사를 통하여 혈청내 항체의 소실을 구명하여야 할 것이다.

Keywords