Abstract
Preparative HPLC (High-Performance Liquid Chromatography) is mainly used for separating useful component from biological samples. By reversed-phase HPLC packed with preparative packings ($15{\mu}m$), the adsorption characteristics with sample size were investigated. Sample was 5'-GMP, a flavor enhancer, and the composition of mobile phase was 20mM $KH_2PO_4$ solution:methanol (97:3 vol.%). From the experimental results, the effect of sample size on retention factor was negligible, but the peak was asymmetrical above $1{\mu}g$ of sample. In addition, the increase in sample size deteriorated the number of theoretical plates, and at small concentration, the number of theoretical plates was less because of large peak width. In the experimental condition, the adsorption isotherm of 5'-GMP was relatively well represented by Freundlich equation.
제조용 액체 크로마토그래피는 주로 생화학물질에서 유용성분을 분리하는 데 사용된다. 본 연구에서는 제조용 충전물($15{\mu}m$)이 채워진 역상 액체 크로마토그래피를 이용하여 sample size에 따른 흡착특성을 고찰하였다. 시료는 향미제인 5'-GMP이고 이동상은 $KH_2PO_4$ 수용액 20mM과 메탄올을 97:3 (vol.%)으로 혼합하여 사용하였다. 실험결과에 의하면 sample size가 증가해도 체류인자는 거의 일정하였지만 $1{\mu}g$ 이상에서는 peak의 모양이 비대칭성이 되었다. 또한 sample size가 증가함에 따라서 이론단수는 감소하였고 농도가 작은 경우 peak width가 크기 때문에 이론단수는 더 작았다. 본 실험조건에서 5'-GMP는 Freundlich 비선형흡착식에 비교적 잘 일치하였다.
