Investigation of in vitro Antigenotoxic Effect of Korean Mistletoe(Viscum album coloratum) Using Comet Assay

Comet assay에 의한 한국산 겨우살이(Viscum album coloratum)의 항유전독성 규명

To investigate the antigenotoxicity of Korean mistletoe using Comet assay, the crude extract was divided into 4 fractions, i.e. fraction I (MW range over 14,000), fraction II $(8,000{\sim}14,000)$, fraction III $(3,500{\sim}8,000)$, and fraction IV (below 3,500) by molecular weight fractionation. In the non-tumoral 3T3 cells, fraction IV could reduce DNA damage induced by MNNG in a dose dependent pattern while fraction I and III which were known to contain lectins and viscotoxins, respectively, did not show the activity. By heat treatment, the antigenotoxic activity of faction IV, though was gradually diminished according to heating time, was found to be maintained significantly. From the Sephadex G-25 gel filtration chromatography, a more purified fraction responsible for the activity of faction IV was obtained from the latter part of total elute. Therefore, it was concluded that the antigenotoxic components of Korean mistletoe were water soluble substances of MW below 1,000 and there is a possibility of utilization as a material of functional foods for chemoprevention.

본 연구에서는 Comet assay를 이용해서 차 및 전통 약재로 사용하고 있는 한국산 겨우살이의 항유전독성을 측정하고자 하였다. 겨우살이 조추출물을 분자량에 따라 14,000 이상 분획(I), $8,000{\sim}14,000$의 분획(II), $3,500{\sim}8,000$ 분획(III) 그리고 3,500 이하 분획(IV)으로 분리하였다. 이중 분획 IV만이 비종양성 3T3 세포에서 농도에 따른 MNNG에 의한 DNA 손상을 감소시켰으며 겨우살이 lectin과 viscotoxin이 포함된 분획 I, III은 활성을 전혀 나타내지 않았다. 열처리에 의해서도 분획 IV는 시간이 지남에 따라서 활성이 약간 감소됨을 나타내었으나 여전히 유의적인 효과를 지니고 있었다. 겨우살이 분획 IV로부터 얻어진 유기용매 분획의 항유전독성 평가결과, 분획 IV의 항유전독성은 주로 수용성 물질에 의해 나타나는 것임을 알 수 있었다. Sephadex G-25 gel filtration chromatography에서, 겨우살이 분획 IV의 항유전독성에 기여하는 성분은 분자량 1,000 미만의 수용성 물질이었으며 이 저분자량 물질을 분리해내어 암 예방을 위한 기능성 식품소재로써 이용할 수 있는 가능성을 확인할 수 있었다.