Journal of fish pathology (한국어병학회지)

The Korean Society of Fish Pathology (한국어병학회)
권호 표지

A Simple Method for the Concentration of Fish Pathogenic Virus in Sea Water

한외여과막을 이용한 해수내 어류 병원바이러스 농축법

  • Oh, Myung-Joo (Department of Fish Pathology, Yosu National University) ;
  • Kim, Suk-Ryul (Department of Fish Pathology, Yosu National University) ;
  • Jung, Sung-Ju (Department of Fish Pathology, Yosu National University) ;
  • Kim, Hyeung-Rak (Department of Food Science & Biotechnology, Pukyong National University) ;
  • Kim, Heung-Yun (Department of Fish Pathology, Yosu National University) ;
  • Yeo, In-Kyu (Department of Marine Biotechnology, Cheju National University)
  • Published : 2000.05.30
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Abstract

A method was developed for concentrating fish pathogenic virus from sea water using membrane ultrafiltration system and centricon. The method consists of passing large volumes (Ca. 20 liter) of sea water through ultrafiltration (PAN) filter followed by cross-flow filtration method and centrifugation use the centricon (Plus-20). This procedure permitted the processing of 20 liter of sea water which resulted in a 20,000-fold reduction in the volume of water and greater than 90% recovery of the seeded MABV.

해수중에 소수로 분포하는 어류 병원 바이러스의 검출을 목적으로 해산어류 병원바이러스의 일종인 marine birnavirus (MABV)를 대상으로하여 한외 여과막과 centricon을 이용한 농축효과를 바이러스의 주화세포내 감염에 의해 형성되어지는 CPE (cytopathic effect) 출현에 근거한 바이러스 감염가 측정법인 $TCID_{50}$ 계수법 및 주화세포상의 바이러스 감염에 의해 형성되어지는 plaque 계수법을 통해 검토하였다. 바이러스 희석액 시료 20 L를 1차 중공사한외여과막으로 3 시간 가동하면 200배로 농축되어지고, centricon으로 2차 농축하여 최초 시료 대비 20,000배 (최종량: 1 ml)로 농축가능하였다. 바이러스 회수율은 농축 전 바이러스 감염가와 비교하여 $TCID_{50}$치로서는 94.4%, plaque 계수법으로는 88.7%를 나타내었다. 중공사 한외여과막과 centricon을 이용한 본 농축법은 해수내 바이러스의 검출을 위한 효과적인 농축방법으로 수계 바이러스 연구에 이용되어질 수 있을 것으로 판단되어졌다.

Keywords