흰쥐 태아 구개융합부위 상피세포의 아포프토시스에 관한 연구

A STUDY ABOUT THE APOPTOSIS OF EPITHELIAL CELLS IN THE FUSING FETAL RAT PALATE

악안면 부위에서 가장 빈번히 발생하는 선천적 기형의 하나인 구개열은 그 원인요소가 명확히 밝혀져 있지는 않지만 구개발생 과정 중 어느 한 단계에서의 이상으로 발생하며 양측 구개판의 융합 후 융합상피의 제거가 이루어지지 않는 것도 그 원인의 하나로 알려져 있다. 본 연구는 구개발생시 구개판 융합상피의 제거가 아포프토시스에 의한 것임을 확인하고 아포프토시스가 일어나는 시기와 위치를 규명하기 위해 시행되었다. 체중 200gm내외의 암컷흰쥐 12마리를 체중 250gm내외의 수컷흰쥐와 교배시켜 16.0일, 16.5일, 16.75일, 17.0일 태아를 얻었으며 각 태아에서 두부만을 파라핀 포매하여 전두절단 하였다. 조직절편에서 형태학적 소견을 관찰하기 위한 H-E 염색과 아포프토시스를 인지하기 위한 TdT염색을 시행한 후 광학현미경을 통해 관찰하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 16.0일과 16.5일 된 태아의 표본에서 접촉전의 양측 구개판의 내측단 상피에서는 아포프토시스를 관찰할 수 없었으며, 구개판의 접촉 직후 상피세포간의 융합이 이루어지는 부위에서는 극히 소수의 아포프토시스 세포들만이 관찰되었다. 2. 16.75일 된 태아의 표본에서 연속성을 거의 잃지 않은 정중 상피융합에서는 아포프토시스를 거의 관찰할 수 없었으나, 비강측과 구강측의 상피삼각 그리고 비중격과 구개판이 접촉하는 부위, 특히 비중격의 외측연과 접촉하는 부위에서는 다수의 아포프토시스 세포들이 관찰되었다. 3. 16.75일 된 태아의 표본에서 정중 상피융합이 연속성을 잃고 상피섬들로 나뉘어지는 시기 에서는 상피섬과 상피삼각부위에서 증가된 아포프토시스 세포들을 관찰할 수 있었으며 근접한 구강, 비강상피에서도 다수의 아포프토시스세포들이 관찰되었다. 4. 17.0일 된 태아의 표본에서 상피섬이 많이 소실되어 간엽조직에 의한 융합이 이루어지고 있는 부위에서는 아포프토시스 세포들이 거의 관찰되지 않았으나 상피삼각부위와 구강, 비강상피에서는 아직도 다수의 아포프토시스 세포들이 관찰되었다. 이상의 결과로 흰쥐 태아의 구개발생시 구개융합부위의 상피세포가 아포프토시스에 의해 제거된다는 사실을 알 수 있었으며 이러한 아포프토시스에 의한 융합상피세포의 제거는 주로 구개융합의 후반기에 상피섬과 상피삼각 부위에서 일어난다는 사실을 알 수 있었다.

The purpose of this study was to Prove that the medial edge epithelial cells covering the secondary palatal shelves were removed by apoptosis during palatal fusion. 12 mature female rats (Suprague-Dawley) were mated overnight with male rats and sacrificed on days 15.0, 16.5, 16.75, 17.0 of pregnancy. The embryos were removed from the uterus and the heads were embedded in paraffin. The paraffin blocks were sectioned and the sections were undergone H-E staining for general histologic feature and TdT staining for detection of apoptotic cells. The obtained results were as follows. k. In the section of 16.0 and 16.5 day embryos, the palatal shelves were prior to contact and no apoptotic cells wereobserved in the medial edge epithelium. At the initial contact of Palatal shelves, there was a few apoptotic cells in the fusing epithelium. 2. In the 16.75 day embryos, the samples that epithelial seams did not lost there continuity, apoptotic cells were rarely seen at the midline epithelial seam. In contrast, a lot of apoptotic cells were observed at epithelial triangles and the junction between palatal shelves and nasal septum. 3. In the 16,75 day embryos, the samples that epithelial seams lost their continuity and disrupted to epithelial islands, large number, of apoptotic cells were observed at epithelial islands and epithelial triangles. Some apoptotic cells were also observed at the oral, nasal epithelium near the midline. 4. In the 17.0 day embryos, most of epithelial islands were disappeared and mesenchymal confluence was achieved. Apoptotic cells were rarely observed in the mesenchymal tissue which replaced epithelial islands, but there were some apoptotic cells at the epithelial triangles, oral and nasal epithelium. From the results of the study, it was revealed that medial edge epithelial cells of fusing palate were removed by apoptosis. Apoptotic cells were found mainly in the disappearing midline epithelial seam and the oral and nasal epithelial triangles at some late stages of palatal fusion.