Somatic embryogenesis and plant regeneration of Hovenia dulcis Thunb

헛개나무의 체세포배발생 및 식물체 재분화

  • Eom, Seung-Hee (College of Agriculture & Life Science, Kangwon National University) ;
  • Shin, Dong-Yong (College of Agriculture & Life Science, Kangwon National University) ;
  • Lee, Hyeon-Yong (College of Agriculture & Life Science, Kangwon National University) ;
  • Kim, Myong-Jo (College of Agriculture & Life Science, Kangwon National University) ;
  • Kim, Jong-Dai (College of Agriculture & Life Science, Kangwon National University) ;
  • Choi, Won-Cheol (Kwanghyeowon Medical Foundation Cancer Center) ;
  • Heo, Kwon (College of Agriculture & Life Science, Kangwon National University) ;
  • Yu, Chang-Yeon (College of Agriculture & Life Science, Kangwon National University)
  • 엄승희 (강원대학교 농업생명과학대학) ;
  • 신동용 (강원대학교 농업생명과학대학) ;
  • 이현용 (강원대학교 농업생명과학대학) ;
  • 김명조 (강원대학교 농업생명과학대학) ;
  • 김종대 (강원대학교 농업생명과학대학) ;
  • 최원철 (광혜원한방병원) ;
  • 허권 (강원대학교 농업생명과학대학) ;
  • 유창연 (강원대학교 농업생명과학대학)
  • Published : 2002.03.31

Abstract

An efficient and reproducible procedure for the large scale propagation of Hovenia dulcis Thunb. is described. Shoot primodia emerging from the leaf surface was induced from MS medium supplemented with NAA. Stem cuttings were suitable explants for multiple shoot proliferation. They produced axillary shoots which branched repeatedly, yielding an average of 7 shoots per explants after 4 weeks in culture, when cultured on a woody plant medium (WPM) containing 0.1mg/l BA and 0.1mg/l NAA. Stem, leaf and root segments from axenic seedlings were used as explant source to induce somatic embryogenesis. A high frequency of somatic embryos were induced directly from leaf in MS medium with NAA, 2,4-D and in medium containing NAA, 2,4-D with BA. Somatic embryos were germinated in MS medium supplemented with 1mg/ l $GA_3$. Somatic embryos proliferated secondary somatic embryos rapidly after transfer to MS medium supplemented with 1mg/ l kinetin, 1mg/ l $GA_3$ and 2% dextrose.

본 연구에서는 헛개나무 조직 배양에서 체세포배 유도 및 식물체 재분화를 위한 적절한 배지, 생장조절물질, 탄소원 그리고 배양 환경을 조사하였으며 대량 번식 시스템을 위해 체세포 배로부터 식물체로 재분화 하기 전 세포 동조화와 건실한 유묘 생산에 최적인 배양 조건을 조사하였다. 강원도 양양 헛개나무 자생지에서 채취한 종자를 배배양하여 기내 발아시킴으로 기내 식물체를 얻었으며 이를 본 실험에 이용하였다. 기내 발아 후 7-14일 된 식물체의 자엽과 잎 절편을 NAA를 처리한 배지에 배양했을 때 callus 상태를 거치지 않고 직접 shoot가 유기되었는데 NAA 0.5mg/l에서 43.6%로 형성율이 가장 높았으며 절편체 당 shoot 의 수도 2.8개였다. NAA와 BA 조합처리하였을 때 BA 0.1mg/l+ NAA 1mg/l에서 38.1%의 형성율을 보였으며 절편체 당 shoot의 수는 4개 이상으로 유기되었다. 체세포배는 NAA와 2,4-D의 단독처리 또는 BA와의 조합처리에서 발생하였으며 직접 체세포배 또는 배발생캘러스가 형성하였다. BA 0.1mg/l+ 2,4-D 1mg/l 또는 BA 0.1mg/l+ NAA 1mg/l에서 발생한 배발생 캘러스의 생장과 성숙 및 발아에 최적 배양 조건을 조사하였을 때 $GA_3$ 1mg/l을 처리하여 배 발아를 촉진시켰으며 자엽은 발달하지 못하고 하배축이 신장하여 유근이 발생한 형태의 유묘를 생산하였다.

Keywords

References

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