Abstract
The purpose of this work was to investigate the relationships between acrylamide degradation by Pseudomonas sp. JK-7 and several relevant physicochemical environment parameters. In initial experiments, the bacterial culture, strain JK-7 isolated from paddy soil sample was developed to grow aerobically with acrylamide as the sole source of carbon and nitrogen. The bacterium was identified as genus Pseudomonas in the basis of use BIOLOG test, and designated as Pseudomunas sp. JK-7. Strain JK-7 could degrade 50 mM acrylamide completely within 72 hours of incubation. Major intermediates resulting from acrylamide degradation were not detected with the HPLC methodology except acrylic acid which appeared to accumulate transiently in the growth medium. The pH increased from 7.0 to 8.7 with complete degradation of the initial 50 mM acrylamide within 72 hours of incubation. pH control in the range of 5 to 9 influenced the growth of JK-7 and acrylamide degradation, whereas it was not examined the growth and degradation at pH 3 or pH 11, respectively. The effect of supplemented carbons (e.g., glucose, fructose, citrate, succinate) on the acrylamide degradation by the test culture of JK-7 was evaluated. The results indicated that the addition of carbons accelerated the bacterial growth and acrylamide degradation compared to those in the absence of supplemented carbons. The effect of supplemented nitrogens on the degradation was monitored. Increasing concentrations of yeast extract resulted in higher growth yield, based on the turbidity measurement, and complete degradation of acrylamide. However, acrylamide degradation was essentially uninfluenced by the addition of $(NH_{4})_{2}SO_{4}$, $NH_4Cl$ or urea. Addition of $AgNO_3$, $CuSO_4$ or $HgCl_2$ except $ZnSO_4$ in the test culture inhibited the degradation of acrylamide and growth of JK-7.
논 토양에서 acrylamide의 분해능이 탁월한 세균 Pseudomonas JK-7를 분리하여 acrylamide의 생분해에 영향을 미치는 물리화학적 요인을 조사하였다. 초기 실험에서 acrylamide를 유일 탄소원과 질소원으로 하여 호기적 조건에서 생장할 수 있는 세균 JK-7을 논의 토양표본에서 분리하였다. BIOLOG system을 이용한 생리학적 분석으로 Pseudomonas속(genus)임을 확인하였고, 이 세균을 Pseudomonas sp. JK-7로 명명하였다. 분리 균주 JK-7은 50 mM acrylamide를 배양 72시간 이내에 완전히 분해하였다. 배양기간 중에 acrylamide 분해 중간대사 물질로서 acrylic acid가 나타나는 것을 HPLC를 통해 확인하였으며, 배양초기에 배양액에 존재하지 않았던 ammonia가 배양기간 중에 관찰되었다. 배양초기 pH는 7.0이었으나 acrylamide가 완전히 분해된 후 배양액의 최종 pH는 8.7이었다. Acrylamide 분해와 JK-7의 생장에 대한 pH의 영향을 조사한 결과, PH 5, pH 7 그리고 pH 9에서 생장과 분해가 이루어졌으나, pH3과 pH11에서는 거의 관찰되지 않았다. 부가 탄소원의 존재하에서 JK-7에 의한 acrylamide분해에서 glucose, fructose, citrate 또는 succinate를 각각 첨가하여 조사한 결과, 부가 탄소원이 없을 때보다 acrylamide분해와 JK-7의 생장은 가속화되었다. 또한 부가질소원 첨가에 따른 영향조사 실험에서, yeast extract는 acrylamide분해와 JK-7의 생장을 촉진시켰다. 그러나 다른 질소원인 $(NH_{4})_{2}SO_{4}$, $NH_4Cl$ 그리고urea는 생장과 분해에 본질적으로 큰 영향을 미치지 않았다. 금속이온에 대한 영향으로 배지내에 $ZnSO_{4}$를 첨가하였을 때 분해와 생장이 진행되었으나, $AgNO_{3}$, $CuSO_{4}$ 또는 $HgCl_{2}$를 첨가하였을 때 acrylamide분해와 JK-7의 생장이 이루어지지 않았다.