A bacterium degrading soy protein was isolated from Korean traditional fermented foods. The isolated strain was identified as Bacillus subtilis, and named as B. subtilis EB464. The optimum pH and temperature of the protease produced by 5. subtilis EB464 were pH 9.0 and $50^{\circ}C$, respectively. The protease was stable in the range of pH 6~10 and below $40^{\circ}C$. The content of water-soluble protein and free amino acid of the medium were increased from 4.2% to 20.6% and ken 1.9% to 22.0%, respectively, by solid-state fermentation of soybean meal with B. subtilis EB464 for 72 h.
This study was conducted to establish optimized ${\beta}-glucan$ extraction method through enzymatic hydrolysis from Phellinus baumii and investigate ${\beta}-glucan$ contents and physicochemical properties. The optimal condition was obtained with the enzyme concentration of 0.66% (v/v), reaction time of 6.08 h ($R^2=0.9245$) and the ${\beta}-glucan$ contents from the Phellinus baumii extracts under the optimized condition was 1.9594 g/100 g. ${\beta}-Glucan$ yield (0.76-16.40%) of enzyme beta-glucan extract (EBE) was three fold higher than that of non-enzyme beta-glucan extract (NEBE). ${\beta}-Glucan$ purity (11.15-59.05%) of non-enzyme beta-glucan (NEB) and that of enzyme beta-glucan (EB) were higher than that of NEBE and that of EBE. ${\beta}-Glucan$ purity of EB (59.05%) and ${\beta}-glucan$ contents of EB (3.38 g/100 g) showed higher than those of others. Total sugar contents (0.61-1.17 mg/mL) showed that NEB and EB were higher than that of NEBE and EBE, EB had the highest total sugar content as 1.17 mg/mL, respectively. Protein contents (0.44-11.73 mg/mL) of NEBE and that of EBE were higher than that of NEB, that of EB. In FT-IR spectrum, the band at $890cm^{-1}$ of microcapsule was attributed to a ${\beta}-1,3-glucan$. The toxicities of ${\beta}-glucan$ from Phellinus baumii in both melanoma cell lines was determined using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoli um bromide assay and ${\beta}-glucan$ from Phellinus baumii has no toxicity until $30{\mu}g/mL$. The effects of ${\beta}-glucan$ from Phellinus baumii on inhibition of cancer cell proliferation were detected by using a wound healing assay. The effect of NEB and EB were higher than NEBE and EBE, especially $30{\mu}g/mL$ of EB had the highest in both melanoma cell lines.
Eight triterpenoids, six lanostanes 1-6, one lupenane 7, and one oleanane 8, were isolated by bioactivity-guided fractionation of the ethylacetate extract from roots of Glycine max (L.) Merr. All isolated compounds were examined for their inhibitory activities against human ACAT-1 (hACAT-1) and human ACAT-2 (hACAT-2). Among them, three triterpenoids showed potent hACAT inhibitory activities, (24R)-ethylcholest-5-ene-3,7-diol (1) and 3b -hydroxylup-20(29)-en-28-oic acid (7) exhibited more potent inhibitory activity against hACAT-1 (1: IC50 = 25.0 1.2 and 7: IC50 = 11.5 0.4 m M) than hACAT-2 (1: IC50 = 102.0 5.4 and 7: IC50 = 33.9 3.7 m M), respectively. Interestingly, 5a ,8a -epidioxy-24(R)-methylcholesta-6,22-diene-3b -ol (4) has proven to be a specific inhibitor against hACAT-1 (IC50 = 38.7 0.8 m M) compared to hACAT-2 (IC50 >200). In conclusion, this is the first study to demonstrate that triterpenoids of G. max have potent inhibitory activities against hACAT-1 and hACAT-2.
Dyes are released into the environment as industrial wasterwater. Dyes are considered to be a pollution problem because of the wide spread into environment with a variety of colors. Continuous biodegradation of reactive dyes such as Rifacion Red H-3EB, Rifazol Blue BT, Rifacion Yellow P4G and Rifacion Brown RT were demonstrated using multistage rotating disc contactor immobilized by Aspergillus sojae B-10. Aspergillus sojae B-10 was cultivated the optimal medium containing 2.0% glucose, 0.08% $NaNO_3$, 0.1% $KH_2PO_4$ and 0.5% $MgSO_4\cdot 7H_2O$, pH 5 at 32$\circ$C. Mycelium of Aspergillus sojae B-10 were guck to the rotating disc for 10 days until steady state. For continuous biodegradation of reactive dyes by using rotating disc contactor, it was most effective biodegradation in the medium containing 1,000 ppm each dyes at the medium feeding rate of 20 ml per hour. Under the conditions biodegradation of each dyes on 2, 4 and 6 days were 20~50%, 75% and 96%, respectively. Therefore, practical application of reactive dyes were carried out at the feeding rate of 20 ml/h as synthetic wasterwater containing 500 ppm of mixture reactive dyes. It was found the highest levels of 94% biodegradation during 20 days.
Purpose: We accessed epidemioloy of 908 acute burns (7 years) in the military, of injuries and propose proper educational programs to suit community. Methods: We surveyed burn demographics, circumstances of injuries, size, result of treatment. Results: The mean age was 20.6 years. The flame burns (FB) (325, 35.8%) were most common, followed scald (SB) (305, 33.6%), contact (CB) (219, 24.1%), electric (EB) (45, 5.0%) and chemical burns (ChB) (14, 1.5%). The more occurred during winter (29.7%). SB had mean 3.9% total body surface area (TBSA). The 251 (82.3%) had superficial burns by spillage of hot water/food on lower limbs (45.6%), feet (33.8%) in summer (34.8%), treated with simple dressing (92.8%). Morbidity rate was 5.6%; post traumatic stress disease (PTSD) (0.7%). FB had large wound (9.3% TBSA). The 209 (64.3%) had superficial burns by ignition to flammable oils (31.7%) and bomb powders (29.2%) on head/neck (60.3%), hands (58.6%) in summer (31.7%), autumn (30.2%). They underwent simple dressing (83.4%) and skin graft (16.0%). Morbidity rate was 18.8%; PTSD (10.5%), inhalation injuries (4.0%), corneal injury (3.7%), amputations (0.9%), and mortality rate (1.2%). CB had small (1.1% TBSA), deep burns (78.5%) by hotpack (80.4%) on lower limbs (80.4%). The more (59.8%) underwent skin graft. EB had 6.8% TBSA. The 29 (64.4%) had superficial burns by touching to high tension cable (71.1%) on hand (71.1%), upper limbs (24.4%) in autumn (46.8%). They underwent simple dressing (71.1%) and skin graft (24.4%). They showed high morbidity rate (40.0%); loss of consciousness (13.3%), nerve injuries (11.1%), neuropathy (8.9%), amputations (2.2%), and mortality rate (2.2%). Conclusions: The cook should wear apron over the boots during work. The lighter or smoking should be strictly prohibited during work with flammable liquids or bomb powders. Don't directly apply hotpack to skin for a long time. Use insulating glove during electric work. Keep to the basic can prevent severe injury and proper education is important.
Objective: This study aimed to compare the mechanical and thermal properties in the anterior and posterior segments of new and retrieved specimens of a commercially available multizone superelastic nickel-titanium (NiTi) archwire. Methods: The following groups of 0.016 × 0.022-inch Bioforce NiTi archwires were compared: a) anterior and b) posterior segments of new specimens and c) anterior and d) posterior segments of retrieved specimens. Six specimens were evaluated in each group, by three-point bending and bend and free recovery tests. Bending moduli (Eb) were calculated. Furthermore, the new specimens were evaluated with scanning electron microscopy/energy-dispersive X-ray spectrometry. A multiple linear regression model with a random intercept at the wire level was applied for data analysis. Results: The forces in the posterior segments or new specimens were higher than those recorded in the anterior segments or retrieved specimens, respectively. Accordingly, Eb also varied. Higher austenite start and austenite finish (Af) temperatures were recorded in the anterior segments. No statistically significant differences were found for these temperatures between retrieved and new wires. The mean elemental composition was (weight percentage): Ni, 52.6 ± 0.5; Ti, 47.4 ± 0.5. Conclusions: The existence of multiple force zones was confirmed in new and retrieved Bioforce archwires. The retrieved archwires demonstrated lower forces during the initial stages of deactivation in three-point bending tests, compared with new specimens. The Af temperature of these archwires may lie higher than the regular intraoral temperature. Even at 2 mm deflections, the forces recorded from these archwires may lie beyond biologically safe limits.
It were reported that antifungal mechanism of Enterobacter cloacae is a volatile ammonia that produced by the strain in soil, and the production of ammonia is related to the bacterial urease activity. A powerful bacterium SH14 against soil-borne pathogen Fusarium solani, which cause root rot of many important crops, was selected from a ginseng pathogen suppressive soil. The strain SH14 was identified as Bacillus subtilis by cultural, biochemical, morphological method, and $API^{circledR}$ test. From several in vitro tests, the antifungal substance that is produced from B. subtilis SH14 was revealed as heat-stable and low-molecular weight antibiotic substance. In order to construct the multifunctional biocontrol agent, the urease gene of Bacillus pasteurii which can produce pathogenes-suppressive ammonia transferred into antifungal bacterium. First, a partial BamH I digestion fragment of plasmid pBU11 containing the alkalophilic B. pasteurii l1859 urease gene was inserted into the BamH I site of pEB203 and expressed in Escherichia coli JM109. The recombinant plasmid was designated as pGU366. The plasmid pGU366 containing urease gene was introduced into the B. subtilis SH14 with PEG-induced protoplast transformation (PIP) method. The urease gene was very stably expressed in the transformant of B. subtilis SH14. Also, the optimal conditions for transformation were established and the highest transformation frequency was obtained by treatment of lysozyme for 90 min, and then addition of 1.5 ${mu}g$/ml DNA and 40% PEG4000. From the in vitro antifungal test against F. solani, antifungal activity of B. subtilis SH14(pGu366) containing urease gene was much higher than that of the host strain. Genetical development of B. subtilis SH14 by transfer of urease gene can be responsible for enhanced biocontrol efficacy with its antibiotic action.
This study was designed to examine the factors affecting in fertilization and development of embryos in vitro, and to examine whether zone drilling by laser irradiation can improve the hatching rate of IVF embryos from DNA marker-proved Hanwoo. DNA markers related to marbling score were identified using DNA fingerprinting with Ml3 probe and restriction enzyme Hae III. Oocytes were aspirated from immature ovarian follicles using a combined method of rectal ovarian-palpation and transvaginal ultrasound-guidance(6.5MHz) under local anesthesia. The aspirated oocytes were washed twice with fresh D-PBS containing 5% FBS and were rewashed 4 to 5 times with TCM-199 containing 5% FBS. A morphological grade of I to IV was assigned to each oocyte. Data were analyzed using the GLM procedure of SAS. Sperm separation methods did not have any significant effect on cleavage or developmental abilities of IVF embryos. Significantly(P<0.05) higher cleavage rate was observed in embryos from GI(60.0%, 3/5), GII(69.2%, 18/26) and GIII(62.1%, 59/95) compared to embryos from GIV oocytes(36.2%, 25/69). And the developmental rate to blastocyst stage was higher(P<0.05) in embryos from GI(33.3%, 1/3) and GII oocytes(38.9%, 7/18) than those from GIII(16.9%,10/59) and GIV oocytes(4.0%, 1/25). There was no significant difference in development of IVF embryos to blastocyst by media for in vitro culture. Proportion of hatched blastocyst was significantly(P<0.05) higher in embryos received zona drilling by laser than those of non-drilled.
Objective: This study was to examine in vitro neural cell differentiation pattern of the genetically modified human embryonic stem cells expressing tyrosine hydroxylase (TH). Materials and Methods: Human embryonic stem (hES, MB03) cell was transfected with cDNAs cording for TH. Successful transfection was confirmed by western immunoblotting. Newly transfected cell line (TH#2/MB03) was induced to differentiate by two neurogenic factors retinoic acid (RA) and b-FGF. Exp. I) Upon differentiation using RA, embryoid bodies (EB, for 4 days) derived from TH#2/MB03 cells were exposed to RA ($10^{-6}M$)/AA ($5{\times}10^{-2}mM$) for 4 days, and were allowed to differentiate in N2 medium for 7, 14 or 21 days. Exp. II) When b-FGF was used, neuronal precursor cells were expanded at the presence of b-FGF (10 ng/ml) for 6 days followed by a final differentiation in N2 medium for 7, 14 or 21 days. Neuron differentiation was examined by indirect immunocytochemistry using neuron markers (NF160 & NF200). Results: After 7 days in N2 medium, approximately 80% and 20% of the RA or b-FGF induced Th#2/MB03 cells were immunoreactive to anti-NF160 and anti-NF200 antibodies, respectively. As differentiation continued, NF200 in RA treated cells significantly increased to 73.0% on 14 days compared to that in b-FGF treated cells (53.0%, p<0.05), while the proportion of cells expressing NF160 was similarly decreased between two groups. However, throughout the differentiation, expression of TH was maintained ($\sim$90%). HPLC analyses indicated the increased levels of L-DOPA in RA treated genetically modified hES cells with longer differentiation time. Conclusion: These results suggested that a genetically modified hES cells (TH#2/MB03) could be efficiently differentiated in vitro into mature neurons by RA induction method.
Respiratory viruses are one of the most infectious agent in human. Six different respiratory tract viruses were detected from Busan while working on the preventive surveillance in 1997-2000. The isolation rate from suspected specimens were 8.4%. Influenza virus A, B type, parainfluenza virus, adenovirus, mumps virus, and measles virus were examined from throat swabs, serum, and secretions of patients. Influenza A/Sydney/05/97(H3N2)-like, A/Johanesburg/33/94(H3N2)-like, A/Beijing/262/95(H1N1)-like and Influenza B/Beijing/262/95-like, B/Harbin/07/94-like, B/Guangdong/08/93-like were found. Adenovirus serotype 1, 2, 3 and 5 were detected, antibody of mumps both IgM and IgG were shown and outbreaks of measles were confirmed. Different antigenic types of influenza virus were detected every year, one outbreak of parainfluenza in 1999, mumps outbreak in 1999 and 2000, and incidence of measles in 2000 were noticeable. Monthly outbreaks were November through following March with influenza virus, January through June with adenovirus, February through May and December with mumps, April through August and November, December with measles, respectively. The size of isolated viruses were 130 nm with influenza virus B type, non-enveloped, icosahedron with 70 nm with adenovirus, 170 nm with mumps virus and 180 nm with parainfluenza virus in diameter, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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