5,10-Methenyltetrahydrofolate synthetase from chicken liver was purified through 30-70% ammonium sulfate fractionation, Q Sepharose Fast Flow anion exchange and Source 15Phe hydrophobic interaction chromatography. Specific activities of cell extract, ammonium sulfate, Q Sepharose Fast Flow and Source 15Phe were 0.0085, 0.031, 0.80 and 1.27 U/mg, respectively. Purification fold activities of cell extract, ammonium sulfate, Q Sepharose Fast Flow and Source 15Phe were 1, 3.7, 94.1 and 149.4, respectively. HPLC gel permeation chromatography and SDS-polyacrylamide electrophoresis experiments indicated that the enzyme is a monomeric protein with a molecular weight of 22.8 kDa. Km for 5-methyl THF and Mg-ATP were $7.1\;{\mu}M$ and $63\;{\mu}M$, respectively. Optimum temperature and pH were $30^{\circ}C$ and 6.0, respectively. The data for metal ion specificity and stoichiometry showed that the maximum activity was obtained with a 1:l. ratio of $Mg^{2+}$. The ATP and Km values increased in the order of MgATP, MgCTP, MgUTP and MgGTP, and the maximum activities also decreased in the same order, indicating MgATP as the most efficient substrate. The enzyme was chemically modified only by tetranitrometane and 1-ethyl-3-(3-dimethyl aminopropyl)-carbodiimide, indicating that tyrosine and carboxylate are present in the active site.
Pregnant Sprague-Dawley rats were administered with Q-35 at the dose levels of 0, 30, 100 and 300 mg/kg/day by oral gavage from gestation day 17 to lactation period. Effects of the test chemical on general findings, reproductive performance of dams and development of Fl generation were examined. There were no treatment related changes in physical signs, body weight, necropsy findings, organ weights, delivery and nursing behavior. In 100 and 300 mg/fg/day treated groups, the food consumption of dams was decreased significantly during gestational day 19~21. The gestation length of 300 mg/tg/day treated group was increased significantly compared to the control group (22.3 $\pm$0.48 vs 22.0$\pm$0.39). Although the gestational length of all groups were in normal range of the rat, potential effect of the drug could not be ruled out. External anomaly of Fl fetus induced by Q-35 was not detected in any groups. There were no treaoent related changes in physical development, reflex functions, sensory functions, locomotor activity and motor coordinating activity. Estrus cycle, fertility and reproductive performance of Fl were not changed in all treated groups. There was no external abnormality related to the drug administration on the examination of F2. These results suggest that Q-35 has no adverse effect on the peri- and postnatal period in rats except the reduction of food consumption at the beginning of drug administration and the potential effect on the elongation of gestation length.
Background: The microsporidian parasite Nosema ceranae is a global problem in honeybee populations and is known to cause winter mortality. A sensitive and rapid tool for stable quantitative detection is necessary to establish further research related to the diagnosis, prevention, and treatment of this pathogen. Objectives: The present study aimed to develop a quantitative method that incorporates ultra-rapid real-time quantitative polymerase chain reaction (UR-qPCR) for the rapid enumeration of N. ceranae in infected bees. Methods: A procedure for UR-qPCR detection of N. ceranae was developed, and the advantages of molecular detection were evaluated in comparison with microscopic enumeration. Results: UR-qPCR was more sensitive than microscopic enumeration for detecting two copies of N. ceranae DNA and 24 spores per bee. Meanwhile, the limit of detection by microscopy was 2.40 × 104 spores/bee, and the stable detection level was ≥ 2.40 × 105 spores/bee. The results of N. ceranae calculations from the infected honeybees and purified spores by UR-qPCR showed that the DNA copy number was approximately 8-fold higher than the spore count. Additionally, honeybees infected with N. ceranae with 2.74 × 104 copies of N. ceranae DNA were incapable of detection by microscopy. The results of quantitative analysis using UR-qPCR were accomplished within 20 min. Conclusions: UR-qPCR is expected to be the most rapid molecular method for Nosema detection and has been developed for diagnosing nosemosis at low levels of infection.
Im, Min Hye;Kim, Jong Won;Kim, Whan Sik;Kim, Jie-Hyun;Youn, Young Hoon;Park, Hyojin;Choi, Seung Ho
Journal of Gastric Cancer
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v.14
no.1
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pp.15-22
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2014
Purpose: To evaluate the prevalence of esophageal reflux-induced symptoms after gastrectomy owing to gastric cancer and assess the relationship between esophageal reflux-induced symptoms and quality of life. Materials and Methods: From January 2012 to May 2012, 332 patients were enrolled in this cross-sectional study. The patients had a history of curative resection for gastric cancer at least 6 months previously without recurrence, other malignancy, or ongoing chemotherapy. Esophageal reflux-induced symptoms were evaluated with the GerdQ questionnaire. The quality of life was evaluated with the European Organization for Research and Treatment QLQ-C30 and STO22 questionnaires. Results: Of the 332 patients, 275 had undergone subtotal gastrectomy and 57 had undergone total gastrectomy. The number of GerdQ(+) patients was 58 (21.1%) after subtotal gastrectomy, and 7 (12.3%) after total gastrectomy (P=0.127). GerdQ(+) patients showed significantly worse scores compared to those for GerdQ(-) patients in nearly all functional and symptom QLQ-C30 scales, with the difference in the mean score of global health status/quality of life and diarrhea symptoms being higher than in the minimal important difference. Additionally, in the QLQ STO22, GerdQ(+) patients had significantly worse scores in every symptom scale. The GerdQ score was negatively correlated with the global quality of life score (r=-0.170, P=0.002). Conclusions: Esophageal reflux-induced symptoms may develop at a similar rate or more frequently after subtotal gastrectomy compared to that after total gastrectomy, and decrease quality of life in gastric cancer patients. To improve quality of life after gastrectomy, new strategies are required to prevent or reduce esophageal reflux.
Goud, Tadakal Mallana;Al Salmani, Kamla Khalfan;Al Harasi, Salma Mohammed;Al Musalhi, Muhanna;Wasifuddin, Shah Mohammed;Rajab, Anna
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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v.16
no.16
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pp.7343-7350
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2015
Genetic changes associated with acute lymphoblastic leukemia (ALL) provide very important diagnostic and prognostic information with a direct impact on patient management. Detection of chromosome abnormalities by conventional cytogenetics combined with fluorescence in situ hybridization (FISH) play a very significant role in assessing risk stratification. Identification of specific chromosome abnormalities has led to the recognition of genetic subgroups based on reciprocal translocations, deletions and modal number in B or T-cell ALL. In the last twelve years 102 newly diagnosed childhood/adult ALL bone marrow samples were analysed for chromosomal abnormalities with conventional G-banding, and FISH (selected cases) using specific probes in our hospital. G-banded karyotype analysis found clonal numerical and/or structural chromosomal aberrations in 74.2% of cases. Patients with pseudodiploidy represented the most frequent group (38.7%) followed by high hyperdiploidy group (12.9%), low hyperdiploidy group (9.7%), hypodiploidy (<46) group (9.7%) and high hypertriploidy group (3.2%). The highest observed numerical chromosomal alteration was high hyperdiploidy (12.9%) with abnormal karyotypes while abnormal 12p (7.5%) was the highest observed structural abnormality followed by t(12;21)(p13.3;q22) resulting in ETV6/RUNX1 fusion (5.4%) and t(9;22)(q34.1;q11.2) resulting in BCR/ABL1 fusion (4.3%). Interestingly, we identified 16 cases with rare and complex structural aberrations. Application of the FISH technique produced major improvements in the sensitivity and accuracy of cytogenetic analysis with ALL patients. In conclusion it confirmed heterogeneity of ALL by identifying various recurrent chromosomal aberrations along with non-specific rearrangements and their association with specific immunophenotypes. This study pool is representative of paediatric/adult ALL patients in Oman.
In this study, a 40 GHz band pass filter(BPF) employing a hair-pin structure has been designed, fabricated, and characterized for millimeter-wave wireless communication applications. Using the 3 dimensional(3-D) electromagnetic(EM) tool and design equations of the hairpin BPF, the BPF was desgned on the 5 mil-thick Duroid substrate(RT5880) with a relative dielectric constant (${\varepsilon}_r$) of 2.2. The tapping point (t) of the U-shape resonator in the input and output port has been determined using extracted an external Q-factor ($Q_e$). The coupling coefficients between the other resonators are calculated by adjusting the physical dimensions for the desired response of the BPF. The fabricated BPF was characterized using probing method on a probe station. Its measured center frequency(fc) and fractional BW are 41.6 GHz and 7.43 %, respectively. The measured return loss is below -10 dB at the pass band and the insertion loss is 3.87 dB. The fabricated BPF is as small as $9.1{\times}2.8mm^2$.
Journal of the Korean Institute of Landscape Architecture
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v.22
no.1
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pp.85-100
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1994
This study was to analyze the relationship between the community or species and environmental variables of the vegetation landscape in Naejangsan National Park. The analysis was performed by the ordination of DCA and CCA. The study was to compare and analyze the species composition status by the layer and the growth characterisics of the following vegetations ; Torreya nucifera community, Quercus variabilis - Acer palmatum community, Q. variabilis community, Q. variabilis - Sasa purpurascens community and Daphniphyllam macropodum community. The results are as follows; 1. The result of the study on the relationshkp between the stand scores of DCA ordination and environmental variables showed that the soil pH, the ammount of AV-P2O5 and the ammount of C.E.C. tend to increase while Pinus densiflora community changes to Q. variabilis - Q. serrata community and finally Carpinus laxiflora species community siginigicantly. The relation between the stand scores of CCA ordination and several enviromental variables suggested that the species of C. laxiflora and C. tschonoskii the species of Q. cariabilis and Q. serrata the species of C. pisifera, P. densiflora and Q. aliana in sequence grows in more fertile soil. 2. As the result of the analysis of the T. nucifera community showed, reproduction did not increase, and the characteristic of growth was not affected. The result is shown in the growth curve that was damaged by the climate and the human interference. 3. The A. palmatum was found to be as minor species in the middle layer and the crown areas did not have sufficient crown. 4. The result of the analysis of the relationship between Q. variabilis community and Q. variabilis - S. purpurascens community showed a decreasing tendency in the growth and number of species. 5. D. macropodum which constituted the dominance species in the middle layer had a nomal growth curve, and then the successional trend of D. macropodum species seems to be located in the climax species.
Background: We performed this study to identify the tumor suppressor genes located in the long arm of chromosome 21 in non-small cell lung cancer. Material and Method: The genes of USP25 in 21q11.2, NCAM2, ADAMTS1 in 21q21.2, and Claudin-8 (CLDN8), Claudin-17 (CLDN17) and TIAM1 in 21q22.1 were investigated for their gene expressions, genetic alterations and promoter methylation. Result: The expressions of CLDN8 and CLDN17 were significantly decreased in 7 (L132, H157, H358, H522, H1299, H1703 and HCC2108) of 13 cell lines, and the expression of ADAMTS1 was also significantly reduced in 6 cell lines (A549, SW900, H1299, H1373, H1703 and H1793). There were no genetic alterations by PCR-SSCP and cDNA cloning in the cell lines with a decreased gene. In the cell lines with a decreased gene expression, the mRNA expression was increased significantly with treatment of 5-Aza-CdR. Conclusion: These results suggest that the ADMTS1, CLDN8 and CLDN17 may act as tumor suppressor genes.
Among solute carrier proteins, the organic anion transporters (OATs) play an important role for the elimination or reabsorption of endogenous and exogenous negatively charged anionic compounds. Among OATs, SLC22A9 (hOAT7) transports estrone sulfate with high affinity. The net decrease of estrogen, especially in post-menopausal women induces rapid bone loss. The present study was performed to search the SNP within exon regions of SLC22A9 in Korean females with osteoporosis. Fifty healthy controls and 50 osteoporosis patients were screened for the genetic polymorphism in the coding region of SLC22A9 using GC-clamped PCR and denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE). Six SNPs were found on the SLC22A9 gene from Korean women with/without osteoporosis. The SNPs were located as follows: two SNPs in the osteoporosis group (A645G and T1277C), three SNPs in the control group (G1449T, C1467T and C1487T) and one SNP in both the osteoporosis and control groups (G767A). The G767A, T1277C and C1487T SNPs result in an amino acid substitution, from synonymous vs nonsynonymous substitution arginine to glutamine (R256Q), phenylalanine to serine (F426S) and proline to leucine (P496L), respectively. The Km values and Vmax of the wild type, R256Q, P496L and F426S were 8.84, 8.87, 9.83 and $12.74{\mu}M$, and 1.97, 1.96, 2.06 and 1.55 pmol/oocyte/h, respectively. The present study demonstrates that the SLC22A9 variant F426S is causing inter-individual variation that is leading to the differences in transport of the steroid sulfate conjugate (estrone sulfate) and, therefore this could be used as a marker for certain disease including osteoporosis.
Purpose: This study was conducted to identify subjective attitudes towards terminal patients in nursing students who had clinical practice. The types of subjective attitude were classified by applying Q methodology. According to those types, basic reference data for the development of educational programs were provided. Methods: Thirty-four final Q samples were selected, and Q classification with a nine-point scale was performed with P samples of 43 nursing students. A key factor analysis was conducted with the collected data using the PC QUANAL program. Results: Nursing students' attitudes towards terminal patients were grouped into three types. The total variable was 49.96%. Students with Type 1 ("wish for life-sustaining medical treatment") thought that terminal patients accurately understood their medical condition and wanted to prolong their lives. Others with Type 2 ("need for service and support") believed that a multidisciplinary nursing system needs to be established to help terminal patients prepare for death. Students with Type 3 ("awareness and acceptance of death") thought that terminal patients wanted to die with dignity at a hospice unit. Conclusion: This study analyzed various types of attitude towards terminal patients, as perceived by nursing students with clinical training experience. Development of educational programs for each attitude type analyzed in this study could contribute to systematic training programs for nursing students caring for terminal patients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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