International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.3
no.1
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pp.89-92
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2001
The effect of topical application with 5,10 and 15 $\mu$g/ ml androstenedione and methyltesterone to the fifth stadium larvae of the si1kworm,B. mori on fat body glycogen, protein, tota1 lipids, phospholipids, neutral lipids and haemolymph trehalose and protein has been studied. The fat body glycogen increased significantly in all the treated groups except in the 15$\mu$g/ml androstenedione treated group. However the fat body glyco- gen increased significantly in 10 ${\mu}g$/ml methyltesterone treated group. The androstenedione treated groups showed increased haemolymph trehalose but the increase was not significant. However the haemolymph trehalose increased significantly in all the methyltestosterone treated groups. The fat body protein decreased in all the androstenedione and methyltesterone treated groups except 15 ${\mu}g$/ml methyltesterone where the decrease in fat body protein was significant. Whereas that of haemolymph protein significantly decreased in all the groups except in the group treated with 5 ${\mu}g$/ml androstenedione where the decrease was not significant. The total lipids, phospholipids and neutral lipids of the fat body decreased significantly in all the groups treated with androstenedione and methyltestosterone when compared with those of carrier control.
As an alternative to radioimmunoassay a simple and highly sensitive enzyme immunoassay (EIA) was developed and validated for androstenedione quantification in plasma of Karan Fries bulls using second antibody coating technique. The wells of the microtitreplate were coated with affinity-purified goat immunoglobulin (antirabbit IgG) that binds the hormone specific antibody. The EIA was performed to analyze androstenedione directly in $40{\mu}l$ of bull plasma. The androstenedione standards ranged from 0.20 to 200 pg/$40{\mu}l$/well and the sensitivity of the assay was 5 pg/ml plasma. Serially diluted bull plasma containing high endogenous androstenedione showed good parallelism with bovine androstenedione standard curve. Intra- and inter-assay coefficients of variation (CV) were found to be 8 and 9%, respectively. Peripheral plasma androstenedione concentrations determined in young and adult bull samples ranged between 104-990 pg/ml and 184-2040 pg/ml, respectively.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.2
no.1
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pp.69-74
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2001
The effect of topical application with androstenedione on economic parameters was analyzed following treatment of last larval stadium. The treated larvae showed significantly increased larval weight along with other enhanced larval, cocoon and adult parameters. The larval period was significantly shortened in all the treated groups with increased cocooning percentages cocoon weight and its shell weight in female and filament length, weight and denier in all the treated groups. Hatching percentage increased significantly in dose dependent manner in all the treated groups when compared with the corresponding parameters of the carrier control group. This suggests that androstenedione can be used effectively for commercial silkworm rearing.
It is now common practice to attempt ovarian hyperstimulation in vitro fertilization and embryo transfer (IVF-ET) to promote the development of multiple preovulatory follicles and to maximize the number of mature egg available. There are several drugs for hyperstimulation such as clomiphene citrate only, clomiphene citrate and human menopausal gonadotropin (HMG) and HMG only. Accumlated experience has shown that the hyperstimulation of the ovary in IVF-ET results in high pregnancy rate. But the hyperstimulation of the ovary in IVF-ET may cause the hyperandrogenism, so we must consider the adverse effect on pregnancy rate of the hyperandrogenism. Little is known about the functional significance of androgen for the follicular growth, however, the hyperandrogenism might interfere with oocyte maturation. The aim of the present investigation was to determine the serum profiles of estradiol, androstenedione and testosterone during the hyperstimulated menstrual cycles in IVF. The results were summarized as follows: 1. There was a gradual increase in the mean levels of serum estradiol, androstenedione, and testosterone approaching follicular maturation. 2. The mean serum estradiol levels in the hyperstimulated groups were significantly higher than that in the control group in late follicular phase and ovum retrieval (ovulation) day (p<0.01). 3. The mean serum androstenedione levels in the clomiphene citrate groups were significantly higher than that in the control group in late follicular phase (p<0.01). There was no statistically significant different in the mean serum androstenedione levels between the control group and the HMG group (p>0.05). 4. There was no statistically significant difference in the mean levels of testosterone among each group (p>0.05). 5. There was no statistically significant different in the mean levels of estradiol, androstenedione and testosterone between the fertilized patients and non-fertilized patients in clomiphene citrate and HMG group (p>0.05).
난모세포성숙기 (peripheral germinal vesicle stage)의 무지개송어(Oncorhynchus mykiss)를 대상으로 방사성 표지 전구체(3H-pregnenolone, 3H-l7$\alpha$-hydroxyprogesterone 그리고 3H-androstenedione)를 이용하여 유 nitro에서 관찰한 협막세포층의 스테로이드 주 대사 경로는 다음과 같으며, pregnenolone -) 17a-hydroxypregnenolone$\longrightarrow$ 17u-hydroxyprogesterone $\longrightarrow$ androstenedione $\longrightarrow$ testosterone 이는 $\Delta$5-스테로이드 경로의 존재가능성을 지적하고 있다.
Kim, Ki-Hwa;Lee, Chang Woo;Dangi, Bikash;Park, Sun-Ha;Park, Hyun;Oh, Tae-Jin;Lee, Jun Hyuck
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.27
no.8
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pp.1472-1482
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2017
Bacterial cytochrome P450 (CYP) steroid hydroxylases are effectively useful in the pharmaceutical industry for introducing hydroxyl groups to a wide range of steroids. We found a putative CYP steroid hydroxylase (BaCYP106A2) from the bacterium Bacillus sp. PAMC 23377 isolated from Kara Sea of the Arctic Ocean, showing 94% sequence similarity with BmCYP106A2 (Bacillus megaterium ATCC 13368). In this study, soluble BaCYP106A2 was overexpressed to evaluate its substrate-binding activity. The substrate affinity ($K_d$ value) to 4-androstenedione was $387{\pm}37{\mu}M$. Moreover, the crystal structure of BaCYP106A2 was determined at $2.7{\AA}$ resolution. Structural analysis suggested that the ${\alpha}8-{\alpha}9$ loop region of BaCYP106A2 is intrinsically mobile and might be important for initial ligand binding. The hydroxyl activity of BaCYP106A2 was identified using in vitro enzyme assays. Its activity was confirmed with two kinds of steroid substrates, 4-androstenedione and nandrolone, using chromatography and mass spectrometry methods. The main products were mono-hydroxylated compounds with high conversion yields. This is the second study on the structure of CYP106A steroid hydroxylases, and should contribute new insight into the interactions of bacterial CYP106A with steroid substrates, providing baseline data for studying the CYP106A steroid hydroxylase from the structural and enzymatic perspectives.
$\beta$-Sitosterol, campesterol and stigmasterol have been known to the phytosterols the most frequently found in plants. Metabolism of phytosterols was investigated using rat feces and liver microsomes. Feces were collected after phytosterols (a well characterized mixture of $\beta$-sitosterol 40%, campesterol 30% and dihydrobrasicasterol) were administered orally (0.5 ${g/kg$) to rats. Metabolites of phytosterols were identified using GC/MS. Three peaks were eluted at 12.47, 12.65, 12.87 min and had characteristic molecular ions m/z 428, 430, 432, respectively. Three fecal metabolites were identified as androstadienedione, androstenedione, and androstanedione. No metabolites could be detected in the rat liver microsomal reaction mixture. The results suggest that the metabolites of phytosterols in rat feces are formed by oxidation at 3- position, saturation at 5- and 6- position, and 17- side chain cleavage in the rat large intestine.
여성호르몬으로 잘 알려진 estrogen은 난소의 granulosa 세포와 정소의 Sertoli 세포에서 주로 생성되는 것으로 알려져 있으며 최근엔 사람의 지방, 근육, 뇌, 뼈세포 등에서의 합성 가능성과 각 조직에서 생성되는 estrogen 의 생리학적인 기능에 관해 많은 관심이 모여져 왔다. 다른 steroid처럼 지방친화적인 (lipophilic) estrogen은 세포막과 핵막을 쉽게 통과하여 목표세포 (target cell)의 핵에 존재하는 estrogen receptor (ER)에 결합하여 특정 유전자를 발현에 관여하는 것으로 알려져 있다. Cytochrome P450 Aromatase (간략히, aromatase)는 steroid hormone을 합성하는 마지막 단계에서 androgens을 estrogens으로 전환시키는데 관여하는 효소이다. Aromatase의 substrate (기질)로 사용되는 androgen에는 androstenedione과 testosterone 등이 있으며, 최종 산물로써 estrone(E1)이나 17$\beta$-estradiol(E2) 등의 estrogen이 생성된다. Aromatase는 steroidogenic tissues의 세포내 골지체에 존재하는 것으로 알려져 있으며, NADPH-cytochrome P450 reductase와 함께 복합체로써 존재한다. NADPH-cytochrome P450 reductase는 다른 steroid hormone에 관여하는 효소들과도 복합체를 형성하여 다른 steroid hormone을 합성할 수 있으므로, 어떤 조직에서 여성호르몬이 만들어질 수 있느냐 하는 것은 그 조직에서 aromatase 단백질이 만들어지느냐에 따라서 결정된다.
Objectives: This study was designed to investigate the effects of Yongdamsagantang on the polycystic ovary(PCO) induced by estradiol valerate(EV) in rats. Methods: After administrating Yongdamsagan-tang to PCO induced rats, we measured the weight of body, ovaries, adrenal glands, and uterus of rats. The observation through naked eye and histopathological observation of ovaries were evaluated. Also, the number of follicle and corpora lutea and content of androstenedione(ADD) and total estrogen were evaluated. The expressions of nerve growth factor(NGF) and corticotropin releasing factor(CRF) were analyzed by immunohistochemistry. The breeding rate and number of implantation with normal male rats were evaluated. Results: - The weight(mg) of ovaries in YST treated group($73.8{\pm}7.6$) was significantly increased(p<0.001) compared with control group($54.3{\pm}4.5$). - The number of mature follicles in YST treated group($7.3{\pm}2.4$) was significantly increased(p<0.01) compared with control group($3.5{\pm}1.2$). - The number of atretic follicles in YST treated group($9.0{\pm}1.5$) was significantly decreased(p<0.01) compared with control group($13.4{\pm}3.8$). - The number of cystic follicles in YST treated group($3.1{\pm}1.1$) was significantly decreased(p<0.01) compared with control group($6.0{\pm}2.0$). - The number of corpora lutea in YST treated group($3.8{\pm}2.1$) was significantly increased(p<0.001) compared with control group($0.3{\pm}0.7$). - The expression of NGF-immunoreactive cells in the ovarian granulosa cells in YST treated group was lesser observed than control group. - The expression of NGF-immunoreactive cells in the adrenal cortex in YST treated group was lesser observed than control group. - The breeding rate in YST treated group(100 %) was significantly increased (p<0.05) compared with control group(50 %). - The number of implantation in YST treated group($6.4{\pm}4.7$) was significantly increased(p<0.05) compared with control group($1.4{\pm}2.6$). Conclusions: We concluded that Yongdamsagan-tang activates the maturation of follicles, normal ovulation, breeding rate and number of implantation. Therefore, this may be effective for the treatment of anovulation, amenorrhea and sterility of PCOS patients.
[ $17\;{\alpha}-hydroxylase/17,20-lyase(P450_{C17})$ ] is the key enzyme mediating the conversion of progesterone to $17\;{\alpha}-hydroxyprogesterone$, ultimately to androstenedione during steroidogenesis. R. dybowskii's ovarian $P450_{C17}$ cDNA was cloned to understand the regulatory mechanism of ovarian steroidogenic pathway at the molecular level in amphibian. A 2.5kb cDNA clone encoding a single open-reading frame with a 519 deduced amino acid was isolated with the screening of ovarian cDNA library. This sequence contained the three highly conserved domains as seen in $P450_{C17}$ of other species. The comparison of amino acid sequence of Rana $P450_{C17}$ with other animal's $P450_{C17}$ showed relatively high identity with 76% in Xenopus, 63% in chicken, 60% in rainbow trout, and 45% in human. Phylogenic analysis also indicated that Rana $P450_{C17}$ gene was evolutionary well conserved among vertebrate. Northern analysis indicated that the two different sizes of $P450_{C17}$ transcripts with approximately 2.5 and 3.6kb were detected in ovary tissue, but not in other tissues. The expression vector of Rana $P450_{C17}$ clearly showed the $17\;{\alpha}-hydroxylase$ activity converting the exogenous progesterone into $17\;{\alpha}-hydroxyprogesterone$ in the nonsteroidogenic COS-1 cells. Therefore, Rana $P450_{C17}$ cDNA is very useful to investigate the molecular mechanism of the ovarian steroidogenesis in amphibian.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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