• 한국미생물·생명공학회지
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• 제27권5호
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• pp.364-369
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• 1999

In order to obtain the suitable plasmids for constructing plasmid vectors of Bacillus species, endogeneous plasmid DNAs were screended from thermo-tolerant soil bacteria. Based on agarose gel electrophoresis patterns of the isolated plasmid DNAs, two strains harboring small-size plasmids were selected. The isolated were identified to belong to the genus Bacillus on the basis of their morphological and biochemical properties, and named Bacillus sp. 3-3 and 77-8, respectively. The restriction endonuclease maps were determined for four plasmids including two plasmids from each Bacillus isolates. It is interesting that Bacillus sp. 3-3 and 77-8 have an identical plasmid according to the restriction maps. The three kinds of hybrid plasmids constructed by introducing each plasmid of two isolates into a Escherichia coli plasmid vector. pUCCm18 containing chloramplenicol resistance gene active in Bacillus strains, could be replicated in B. subtilis and B. licheniformis. These plasmids are very stable in B. subtilis, suggesting that the Bacillus plasmids identified in this work would be useful for development of new cloning vectors for Bacillus strains.

• 한국식품과학회지
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• 제35권4호
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• pp.684-689
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• 2003

속성 발효 및 기능성 멸치액젓의 제조에 사용할 수 있는 미생물 starter의 개발을 목적으로 전보에서 분리한 단백질 분해활성 및 혈전용해활성이 가장 우수했던 B. subtilis JM-3는 저온성 병원성 세균인 Listeria monocytogenes에 대한 항균활성이 가장 강하였으며, linoleic acid의 자동산화를 80%이상 억제하는 항산화활성을 나타내었다. 그리고 N-nitroso compound인 NDMA 및 NMO에 대하여서는 약 50%의 변이억제활성을 나타내었으며, SNU-1(사람의 위암세포)에 대하여 배양 원액 $20\;{\mu}L$를 첨가한 경우 88.9%의 높은 성장 억제율을 나타내어 기능성 멸치액젓 제조용 starter로서의 가능성이 확인되었으며, 앞으로 본 균주의 기능성 멸치액젓 starter로서의 이용을 극대화하기 위하여서는 돌연변이에 의한 호염성 변이주의 유전적 육종이나 형질 전환 방법 등을 응용한 호염성 미생물과의 접목을 통한 내염성 균주의 개발도 필요할 것으로 여겨진다.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제52권3호
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• pp.121-125
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• 2009

고추역병에 대한 길항미생물로 선발된 Bacillus subtilis AH18과 Bacillus licheniformis K11의 토양미생물 생태에 미치는 영향을 조사하기 위하여 이들 미생물을 단독 또는 복합으로 토양에 처리한 후 토양미생물상의 변화를 관찰하였다. 토양미생물 생태의 변화는 토양에서 인지질 지방산을 추출한 후 전체 지방산과 지표 지방산의 상대적 비율로 분석하였다. 전체적 인지질 지방산 구성과 각 지표 지방산 분석에 의해서 B. subtilis AH18 처리구는 무처리 대조구와 완전히 구분되었다. 전체 토양미생물상을 B. subtilis AH18 처리가 바꾸었고 세균 비율을 감소시켰으며, 곰팡이세균 비율을 높였으며, 그램음성균/그램양성균의 비율을 낮추었으며, 혐기성균/호기성균의 비율은 증가시켰다. 또한 불량환경 적응성을 의미하는 cy19:0/18:$1{\omega}7c$ 지방산비율과 단불포화지방산/포화지방산 비율도 B. subtilis AH18 처리구가 증가시켰다. 이에 반하여 B. licheniformis K11 처리나 두 미생물의 동시 처리는 전술한 토양미생물 지표에 큰 영향을 미치지 않았다. 따라서 지방산 분석을 토양미생물상 분석에서 B. subtilis AH18의 단용처리는 미생물을 처리하지 않은 대조구에 비하여 토양미생물상을 뚜렷이 바꾸었지만, B. subtilis AH18가 B. licheniformis K11와 혼용되었을 때는 토양미생물상 변화에 미치는 영향이 적었다. 따라서 이들 두 미생물을 동시에 처리할 경우 고추역병 방제와 토양미생물 생태 보존의 두 목적을 동시에 이룰 수 있을 것으로 기대된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제23권5호
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• pp.580-587
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• 1995

In order to produce the bacteriolytic enzyme, bacterial strains capable of excreting a large amount of the enzyme were screened from the coastal sea water samples in Pusan. The bacterial strain SH-1, which showed the highest activity among 43 bacteriolytic enzyme producing bacteria, was finally selected for further studies. The strain SH-1 was an endospore-forming grampositive rod, and the position of spore was paracentral. These morphological characteristics assigned the isolated strain to the morphological group I classified by Gordon. The fatty acid composition of the bacterial stain was analyzed to be consisted of branched chains of iso-Cn and anteiso-Cn. Based on the percent content of the branched chain (93.85%), the isolates could be identified as a species of Bacillus. According to the experimental results of the API system (API 50CHB & API 20E) the strain was identified as Bacillus subtilis. Numerical texonomy, in which 82 major characters were examined using several species of Bacillus as the standard bacteria, indicated that the strain SH-1 showed 90% similarity to Bacillus subtilis. Thus, the isolated strain SH-1 could be identified as Bacillus subtilis.

• 한국토양비료학회지
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• 제34권6호
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• pp.394-400
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• 2001

가축분 및 음식물 퇴비 132점에서 517균주를 분리하고 CMC와 xylan 및 PGA 배지에서 강한 활성을 가지는 10여개의 균주를 선별하여 배추종자 발아를 이용한 작물 inhibition test와 오이 육묘실험으로 growth test를 거쳐 생육이 가장 양호한 LYH201 균주를 야생균주로 선발하였다. Bergey's manual 방법으로 특성을 조사한 결과 LYH201균주는 Gram 양성균으로 내생포자 형성, oxidase, CMCCase, xylanase, catalase, V-P test, methyl red test, arabinose 등의 탄소원 이용성은 양성이었으며, indole을 생성하고, urease, lecithinase, dihydrolase test는 음성이었고, 전자현미경으로 관찰한 결과 길이가 $2.5{\sim}3.0{\mu}m$, 너비가 $0.5{\sim}0.7{\mu}m$의 간균인 Bacillus subtilis로 확인되었다. Bacillus subtilis LYH201 균주를 MMY를 이용하여 배양한 결과 온도 $50^{\circ}C$, pH 6.0에서 생육이 가장 좋았다.

• 한국식품영양학회지
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• 제19권4호
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• pp.526-531
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• 2006

자몽 종자 추출물의 항균성을 조사하기 위하여 그람 양성균인 Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Listeria monocytogenes와 그람 음성균인 Escherichia coli, Salmonella enteritidis, Serratia marcescem를 대상으로 하여 최소 저해 농도, 생육 저해 활성, 콜로니 형성 저해 활성을 실험하였다. 그람 양성균에 대한 자몽 종자 추출물의 최소 저해 농도는 12.5 ppm정도로 상대적으로 낮았으며, 그람음성균의 최소저해 농도는 50ppm 이상으로 상대적으로 높았다. 균주의 증식에 대한 생육 저해 활성을 조사한 결과 Bacillus cereus는 1ppm 이하, Bacillus subtilis는 6.25 ppm, Listeria monocytogenes는 1ppm 이하, Escherichia coli는 6.25 ppm, Salmonella enteritidis는 25 ppm Serratia marcescem는 25pp부터 생육이 저해되었다. 그람 양성균의 콜로니 형성 저해활성은 Bacillus cereus는 93.9%, Bacillus subtilis는 94.0%, Listeria monocytogenes는 99.9%, 그람 음성균의 콜로니 형성 저해 활성은 Escherichia coli는 4.4%, Salmonella enteritidis는 82.7%, Serratia marcesem는 86.4%로, 그람 양성균에 대해서는 높은 저해 활성을 보였으며, 그람 음성균에 대해서는 비교적 낮은 저해 활성을 보였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제12권2호
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• pp.228-234
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• 2002

Bacillus subtilis CAU131 (KCCM 10257) isolated from a fermented shrimp product produces subtilein, tentatively named as a bacteriocin, which exhibited a bactericidal effect against closely related species such as Bacillus subtilis ATCC 6633, Bacillus cereus ATCC 11778, and several other strains of Bacillus sp. The purification of the subtilein was achieved by applying a mono-Q anion exchange chromatography on FPLC and $C_18$ reverse-phase chromatography on HPLC. After purification, specific activity of subtilein was increased about 3,000-fold compared with culture broth and its molecular mass was about 5,000 Da on SDS-PAGE. The antimicrobial activity of subtilein was well maintained at acidic and neutral pHs between 3 and 8. Subtilein was relatively heat stable, and its antimicrobial activity remained for 2 h at $80^{\circ}C$. However, the activity was reduced after heating at $100^{\circ}C$, and about $80\%$ of the activity was found after 1 h incubation at $100^{\circ}C$. The treatment of Bacillus subtilis ATCC 6633 with subtilein led to morphological changes in stationary-phase cells and most cells appeared to be lysed.

• KSBB Journal
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• 제13권4호
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• pp.383-390
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• 1998

Bacillus subtilis DT134 was resistant to 50-fold higher concentration of cadmium ions (Cd2+) than cadmium-sensitive B. subtilis BD224 in Luria Broth (LB) medium. Minimal inhibition concentration test in LB agar plates also showed similar results. The elevated cadmium resistance of B. subtilis DT134 strongly suggested a possible existence of cadmium resistance gene in it. Southern blot with Staphylococcus aureus cadA gene fragment (757 bp NlaIV-XmnI cadA DNA fragment) as probe was carried out to test the existence and similarity of the gene. In high stringency condition, there was no detectable signal, but in low stringency, a strong signal specific to the cadA probe could be detected. These results strongly suggested that there was some similarity between total DNA of B. subtilis DT134 and S. aureus pl258 in terms of cadmium resistance gene and the resistance mechanism might be an efflux mechanism. The subsequent efflux experiment showed that the cadmium resistance mechanism of B. subtilis DT134 was also due to the efflux of cadmium.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제16권8호
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• pp.5343-5350
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• 2015

본 연구의 목적은 대나무 줄기표면에서 처음 발견 하였으나, 아직까지는 연구가 미흡한 신 균주 Bacillus amyloliquefaciens NBF11-1의 생리활성 효과를 알아보기 위하여 청국장 전통 발효 균주인 Bacillus subtilis NG24를 대조군으로 하여 항산화효과에 대한 비교분석을 실시하였다. 청국장 추출물의 항산화 실험 결과에서 Total Polyphenol 추출물 함량의 측정 결과는 B.subtilis NG24에 비해 B.amyloliquefaciens NBF11-1 시료에서 유의하게 증가하였다(p=0.032). SOD 유사활성과 DPPH radical 소거능 및 NO radical 소거능에서 B.subtilis NG24에 비해 B.amyloliquefaciens NBF11-1을 포함한 시료에서 농도가 증가함에 따라 유의하게 증가하였다(p<.05). 추가적으로, 각 항산화 실험의 $IC_{50}$은 B.subtilis NG24에 비해 B.amyloliquefaciens NBF11-1 시료에서 SOD 유사활성(p=0.045), DPPH radical 소거능(p=0.041), NO radical 소거능(p=0.019)과 같이 유의한 차이로 감소하였다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제31권3호
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• pp.389-393
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• 2002

청국장에서 분리한 Bacillus subtilis CH-1, Bacillus circul문 K-1과 Bacillus subtilis(natto) N-1 모두 biosurfactant를 생성하며 이 중 Bacillus subtilis CH-1가 가장 큰 생성력을 나타냈다. Biosurfactant를 대량 생산하기 위하여 AM, LM, NB과 TSB 배지중 AM을 기본배지로 선정하여 최적 탄소원과 질소원으로 glucose 2%, soy peptone 0.3%와 무기염을 포함하는 합성배지를 완성하였다. Biosurfactant의 생성은 96시간에 최대를 나타냈으며 이때 배지의 표면장력은 초기값의 약 43% 값을 나타냈다. 한편 배양온도 및 pH는 biosurfactant생산에 크게 영향을 주지 않았으며 pH5.0~8.0범위에서 대체적으로 안정한 생성을 유지하였다. 최적조건에서 배양시 crude biosurfactant 수율은 6 g/L를 얻을수 있다.