Kim, Tae-Woon;Park, Ae-Kyung;Kim, Gum-Ran;Lee, Jung-Min;Chung, Dae-Kyun;Kim, Hae-Yeong
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.35
no.5
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pp.924-927
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2003
This study was conducted to investigate the application of bifidobacteria on kimchi. Among several Bifidobacterium species, we selected Bifidobacterium lactis (DSM 10140), which is resistant to oxygen, acid and salt. Bifidobacterium lactis was cultured in a supplemented deMan, Rogosa and Sharpe (SMRS) medium under aerobic conditions. Its acid-tolerance and salt-tolerance were pH 3.0 and 3.5% (NaCl), respectively. The viability of Bifidobacterium lactis added to kimchi was confirmed by PCR, using specific primers on Bifidobacterium lactis. In sensory evaluation, kimchi containing Bifidobacterium lactis showed similar scores in overall acceptability with the control kimchi. Consequently, these results showed that it would be possible to prepare functional kimchi using Bifidobacterium.
${\beta}$-Glucosidase is necessary for the bioconversion of glycosidic phytochemicals in food. Two Bifidobacterium strains (Bifidobacterium animalis subsp. lactis SH5 and B. animalis subsp. lactis RD68) with relatively high ${\beta}$-glucosidase activities were selected among 46 lactic acid bacteria. A ${\beta}$-glucosidase gene (bbg572) from B. lactis was shotgun cloned, fully sequenced, and analyzed for its transcription start site, structural gene, and deduced transcriptional terminator. The structural gene of bbg572 was 1,383 bp. Based on amino sequence similarities, bbg572 was assigned to family 1 of the glycosyl hydrolases. To overexpress bbg572 in Bifidobacterium, several bifidobacteria expression vectors were constructed by combining several promoters and a terminator sequence from different bifidobacteria. The maximum activity of recombinant Bbg572 was achieved when it was expressed under its own promoter and terminator. Its enzyme activity increased 31-fold compared with those of its parental strains. The optimal pH for Bbg572 was pH 6.0. Bbg572 was stable at $37-40^{\circ}C$. It hydrolyzed isoflavones, quercetins, and disaccharides with various ${\beta}$-glucoside linkages. Bbg572 also converted the ginsenosides Rb1 and Rb2. These results suggest that this new ${\beta}$-glucosidase-positive Bifidobacterium transformant can be utilized for the production of specific aglycone products.
Previous studies have confirmed that fermented whey produced by Leuconostoc mesenteroides CJNU 0147 or Lactobacillus casei CJNU 0588 display bifidogenic growth stimulator (BGS) activity. The present study sought to determine if the strain itself can improve the growth of bifidobacteria in co-cultures. In reinforced clostridial medium (RCM), both strains stimulated the growth of a Bifidobacterium lactis strain during the exponential phase and also stimulated the growth during almost all growth phases in whey broth. Fermented whey containing viable Leu. mesenteroides CJNU 0147 and L. casei CJNU 0588 cells maintained viability of the B. lactis strain stored at $10^{\circ}C$ in MRS broth. Viable cell count of the B. lactis strain without the fermented whey was decreased to 5.6 log cfu/mL after 15 days, whereas that of the strain with the fermented whey was slightly increased to 7.1 log cfu/mL as compared with initial viable cell count of 6.9 log cfu/mL.
In order to maximize the growth of Bifidobacterium lactis BL 740 and soy isoflavone agycones production, we investigated the optimization of a culture medium containing soy hypocotyls, which are the byproducts of the soy manufacturing process, and soy proteins. The ingredients of the medium containing soy materials (S-medium) were selected by fractional factorial design (FFD) and central composite design (CCD) within a desirable range. The FFD was applied by six factors: glucose, cellobiose, fructooligosaccharide, soy peptone, soy protein, and soy hypocotyl. Soy protein, soy peptone, and soy hypocotyl were found to be significant factors from the result of FFD for both the growth of B. lactis BL 740 and aglycone production. The CCD was then applied with three variables found from FFD at five levels each and the optimum values were determined for the three variables: soy peptone, soy protein, and soy hypocotyl. In the case of the growth of B. lactics BL740, the proposed optimal media contained 12.73 g/L of soy protein, 29.55 g/L of soy peptone, and 130.67 g/L of soy hypocotyl. To produce isoflavone aglycones, optimized media was composed of 2.06 g/L, soy protein, 1.25 g/L of soy peptone, and 60.02 g/L of soy hypocotyl.
This research improved the growth potential of Bifidobacterium animalis subsp lactis strain JNU306, a commercial medium that is appropriate for large-scale production, in yeast extract, soy peptone, glucose, L-cysteine, and ferrous sulfate. Response surface methodology (RSM) was used to optimize the components of this medium, using a central composite design and subsequent analyses. A second-order polynomial regression model, which was fitted to the data at first, significantly lacked fitness. Thus, through further analyses, the model with linear and quadratic terms plus two-way, three-way, and four-way interactions was selected as the final model. Through this model, the optimized medium composition was found as 2.8791% yeast extract, 2.8030% peptone soy, 0.6196% glucose, 0.2823% L-cysteine, and 0.0055% ferrous sulfate, w/v. This optimized medium ensured that the maximum biomass was no lower than the biomass from the commonly used blood-liver (BL) medium. The application of RSM improved the biomass production of this strain in a more cost-effective way by creating an optimum medium. This result shows that B. animalis subsp lactis JNU306 may be used as a commercial starter culture in manufacturing probiotics, including dairy products.
To differentiate commercial bifidobacteia for Bifidobacterium lactis Bb-12, Bif. longum Bb-536 and Bif. infantis Maeil-K9, we studied the various carbon source, the nitrogen sources and antibiotics. Amygdalin and fructose were good candidates for carbon sources, and tryptone was suitable for nitrogen sources to design a new selective media for three commercial bifidobacteria. In the case of the amygdalin-containing medium as carbon sources, Bif. lactis Bb-12 and Bif. infantis Maeil-K9 showed good growth, and in fructose-containing medium, Bif. longum Bb-536 showed good growth. In antibiotics resistance study, the addition of 1 mg/L doxycyclin was very effective for differentiation of each bifidobacteria. Doxycyclin did not affect the growth of Bif. lactis Bb-12 and Bif. infantis Maeil-K9, but Bif. longum Bb-536 was completely inhibited by doxycyclin. Finally to confirm the selection capability of newly designed selective media, temperature-shocked bifidobacteria were cultured on them. As the results, fructose or doxycyclin containing medium showed for high growth for temperature-shocked bifidobacteria, but amygdalin containing medium showed low growth of temperature-shocked bifidobacteria.
Recent study has demonstrated an increasing prevalence of food allergy in Korean children. Specific probiotic bacteria may promote potentially anti-allergenic processes through induction of Th1-type immunity and enhance the regulatory lymphocyte. This study investigated whether orally administrated probiotics could suppress allergic responses in an ovalbumin (OVA)-induced allergy mouse model. Thus, female C3H/HeJ mice were orally sensitized with OVA and cholera toxin for 4 weeks. Lactobacillus acidophilus AD031, Bifidobacterium lactis AD011, and L. acidophilus AD031 plus B. lactis AD011 were fed to mice from 2 weeks before the sensitization. The OVA-induced mice that were not treated with probiotics had significantly increased serum levels of OVA-specific IgE and IgG1, and OVA-specific IgA in feces. However, the mice treated with probiotics suppressed production of the OVA-specific IgE, IgG1, and IgA. The level of IL-4 was significantly lower, and the levels of INF-$\gamma$ and IL-10 were significantly higher in the mice treated with probiotics than that in the non-treated mice. The groups treated with probiotics had decreased levels of degranulated mast cells, eosinophil granules, and tail scabs. These results indicate that L. acidophilus AD031 and B. lactis AD011 might be useful for the prevention of allergy.
The present work describes the identification, purification, and characterization of bile salt hydrolase (BSH) from Bifidobacterium animalis subsp. lactis. The enzyme was purified to electrophoretic homogeneity by hydrophobic chromatography, ion-exchange chromatography and ultrafiltration. SDS-PAGE analysis of putative BSH and gel filtration revealed that the analyzed protein is presumably a tetramer composed of four monomers each of about 35 kDa. The purified enzyme was analyzed by liquid chromatography coupled to LTQ FT ICR mass spectrometry and unambiguously identified as a bile salt hydrolase from B. animalis. The isoelectric point of the studied protein was estimated to be around pH 4.9. The pH optimum of the purified BSH is between 4.7 to 6.5, and the temperature optimum is around 50oC. The BSH of B. animalis could deconjugate all tested bile salts, with clear preference for glycine-conjugated bile salts over taurine-conjugated forms. Genetic analysis of the bsh showed high similarity to the previously sequenced bsh gene from B. animalis and confirmed the usefulness of bile salt hydrolase as a genetic marker for B. animalis identification.
Kim, Jae Hwan;Jeong, Minju;Doo, Eun-Hee;Koo, Young Tae;Lee, Seon Joo;Jang, Ji Won;Park, Jung Han Yoon;Huh, Chul Sung;Byun, Sanguine;Lee, Ki Won
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.32
no.9
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pp.1146-1153
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2022
Many probiotic species have been used as a fermentation starter for manufacturing functional food materials. We have isolated Bifidobacterium animalis subsp. lactis LDTM 8102 from the feces of infants as a novel strain for fermentation. While Glycine max has been known to display various bioactivities including anti-oxidant, anti-skin aging, and anti-cancer effects, the immune-modulatory effect of Glycine max has not been reported. In the current study, we have discovered that the extract of Glycine max fermented with B. animalis subsp. lactis LDTM 8102 (GFB 8102), could exert immuno-modulatory properties. GFB 8102 treatment increased the production of immune-stimulatory cytokines in RAW264.7 macrophages without any noticeable cytotoxicity. Analysis of the molecular mechanism revealed that GFB 8102 could upregulate MAPK2K and MAPK signaling pathways including ERK, p38, and JNK. GFB 8102 also increased the proliferation rate of splenocytes isolated from mice. In an animal study, administration of GFB 8102 partially recovered cyclophosphamide-mediated reduction in thymus and spleen weight. Moreover, splenocytes from the GFB 8102-treated group exhibited increased TNF-α, IL-6, and IL-1β production. Based on these findings, GFB 8102 could be a promising functional food material for enhancing immune function.
Chemotherapy regimens for non-small cell lung cancer (NSCLC) have various adverse effects on the human body. For this reason, probiotics have received attention regarding their potential value as a safe and natural complementary strategy for cancer prevention. This study analyzed the anticancer effects of aqueous extracts of probiotic bacteria Bifidobacterium bifidum (BB), Bifidobacterium longum (BL), Bifidobacterium lactis (BLA), Bifidobacterium infantis 1 (BI1), and Bifidobacterium infantis 2 (BI2) on NSCLC cell lines. When the aqueous extracts of probiotic Bifidobacterium species were applied to the NSCLC cell lines A549, H1299, and HCC827, cell death increased considerably; in particular, the aqueous extracts from BB and BLA markedly reduced cell proliferation. p38 phosphorylation induced by BB aqueous extract increased the expression of cleaved caspase 3 and cleaved poly (ADP-ribose) polymerase (PARP), consequently inducing the apoptosis of A549 and H1299 cells. When the p38 inhibitor SB203580 was applied, phosphorylation of p38 decreased, and the expression of cleaved caspase 3 and cleaved PARP was also inhibited, resulting in a reduction of cell death. In addition, BB aqueous extracts reduced the secretion of MMP-9, leading to inhibition of cancer cell invasion. By contrast, after transfection of short hairpin RNA shMMP-9 (for a knockdown of MMP-9) into cancer cells, BB aqueous extracts treatment failed to suppress the cancer cell invasiveness. According to our results about their anticancer effects on NSCLC, probiotics consisting of Bifidobacterium species may be useful as adjunctive anticancer treatment in the future.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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