• 한국미생물·생명공학회지
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• 제43권3호
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• pp.296-299
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• 2015

Cowpea mild mottle virus (CPMMV)는 국내 미보고 바이러스로, 넓은 숙주범위를 가지며, 국내 관리급 검역바이러스로 지정되어 있다. 본 연구에서는 검역현장에서 신속하게 CPMMV를 진단할 수 있는 방법을 개발하였다. 이번 연구는 사용자를 위한 검사방법 개발을 위하여, 기존의 검역현장에서 활용하는 PCR 조성과 조건을 활용하였다. 본 연구에서는 CPMMV를 특이적으로 진단할 수 있는 2개의 RT-PCR 프라이머를 개발하였으며 각각 579와 638 bp를 증폭할 수 있다. 최종적으로 증폭되는 nested PCR 산물의 크기는 (579 → 298 bp)과 (638 → 252 bp)로 CPMMV의 특이 유전자를 진단할 수 있다. 또한, 제한효소 Xho I이 반응할 수 있는 염기 서열을 삽입하여 양성대조구 플라스미드를 개발하였다. 이것은 실험실 오염으로부터 거짓양성을 검증할 수 있게 하였다. 본 연구는 CPMMV와 관련된 수입 작물로부터 검역진단에 기여할 것이라고 사료된다.

• The Plant Pathology Journal
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• 제39권5호
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• pp.486-493
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• 2023

Cowpea mild mottle virus (CPMMV) is a global plant virus that poses a threat to the production and quality of legume crops. Early and accurate diagnosis is essential for effective managing CPMMV outbreaks. With the advancement in isothermal recombinase polymerase amplification and lateral flow strips technologies, more rapid and sensitive methods have become available for detecting this pathogen. In this study, we have developed a reverse transcription recombinase polymerase amplification combined with lateral flow strips (RT-RPA-LFS) method for the detection of CPMMV, specifically targeting the CPMMV coat protein (CP) gene. The RT-RPA-LFS assay only requires 20 min at 40℃ and demonstrates high specificity. Its detection limit was 10 copies/µl, which is approximately up to 100 times more sensitive than RT-PCR on agarose gel electrophoresis. The developed RT-RPA-LFS method offers a rapid, convenient, and sensitive approach for field detection of CPMMV, which contribute to controlling the spread of the virus.