• 동의신경정신과학회지
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• 제22권4호
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• pp.201-218
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• 2011

Objectives : The aim of this study was to investigate the effects of Guibi-Tang(GBT) on focal brain ischemic injury induced by intraluminal filament insertion in rats. Methods : The ischemia was induced by intraluminal filament insertion into middle cerebral artery. Sprague-Dawley rats were divided into five groups, normal group(n=8); control group was ischemia induced and no treatment(n=8); GBT 1X group was ischemia induced and administrated 42.2 mg/ml/kg of Guibi-Tang orally(n=8); GBT 3X group was ischemia induced and administrated 126.6 mg/ml/kg of Guibi-Tang orally(n=8); GBT 6X group was ischemia induced and administrated 253.2 mg/ml/kg of Guibi-Tang orally(n=8) for 21 days. mGluR5, Bax, Bcl-2 and cytochrome C were investigated to observe the effects of Guibi-Tang on apoptosis. The effects of Guibi-Tang on neuroprotective/apoptotic agents in cresyl violet, choline acetyltranferase(ChAT) with ischemic injury were investigated. Results : The intensity of mGluR5 mRNA in the hippocampal CA1 was increased in normal and GBT(Guibi-Tang) 1X groups compared with the control group. The intensity of Bax mRNA in the hippocampal CA1 was decreased in normal and GBT 1X groups compared with the control group. However it was increased unexpectedly in GBT 3X group. The intensity of Bcl-2 mRNA in the hippocampal CA1 was increased in normal and GBT 1X groups compared with the control group. The intensity of Bax/Bcl-2 ratio in the hippocampal CA1 was decreased in normal and GBT 1X groups compared with the control group. The intensity of cytochrome C protein in the hippocampal CA1 was decreased in normal, GBT 1X and GBT 6X groups compared with the control group. The density of neurons stained by cresyl violet and ChAT was increased in normal and GBT 1X groups compared with the control group. Conclusions : These results suggest that Guibi-Tang may have protective effect on vascular dementia.

• 동의생리병리학회지
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• 제20권4호
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• pp.936-941
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• 2006

To prevent human body injury from oxidative stress, antioxidants are very important and many research about antioxidants are generally being conducted. Hydrogen peroxide$(H_20_2)$ that is one of vitality oxygen species has been seen that cause various diseases, DNA damage and gene change. We have already known that the inhibition effect of Zizania latifolia Radix, Rhizoma on apoptosis induced by $H_2O_2$ in Neuro2A cell. And the purpose of this study was that we made a comparative study on the inhibition effect of apoptosis in Neuro2A cell on the region of Zizania latifolia(Radix, Rhizoma, Herba). Neuro2A cells were cultivated in RPMI(GibcoBRL) with 5% FBS and treated with $H_2O_2$ and Zizania latifolia(Radix, Rhizoma, Herba). Separately we measured the cell viability and analyzed DNA fragmentation. Activity of PARP, Cytochrome C, caspase-9, caspase-3, p53, p21, Bax and Bcl-2 in the cell was examined by using western blot. The results obtained were as Follows: The cell viability in all of Zizania latifolia (Radix, Rhizoma, Herba) treatment (60ug/m1<) decreased significantly compared with that of none treatment(p<0.001). Zizania latifolia Radix increased cell viability was most effective of three regions. But we had no significant difference among three regions. All of Zizania latifolia (Radix, Rhizoma, Herba) increased cell viability about twice as much as that being injury by $H_2O_2$,(Zizania Latifolia (Radix, nhizoma, Herba) 20ug/m1, $H_2O_2$ 200uM, p<0.001). DNA fragmentation developed by $H_2O_2$, but was not developed in all of Zizania latifolia (Radix, Rhizoma, Herba) treatment. PARP, Cytochrome C, caspase-9 and caspase-3 activated all by $H_2O_2$ but were not activated in all of Zizania latifolia (Radix, Rhizoma, Herba) treatment. P53, P2l and Bax activated by $H_2O_2$, and Bcl-2 got into inactivation. But the opposite results appeared in all of Zizania latifolia (Radix, Rhizoma, Herba) treatment. In conclusion, these results suggest that all of Zizania latifolia (Radix, Rhizoma, Herba) inhibit the development of DNA fragmentation and apoptosis by $H_2O_2$and the antioridant action of all of Zizania latifolia (Radix, Rhizoma, Herba) is effective.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제25권3호
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• pp.288-295
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• 2017

The incidence of polypharmacy-which can result in drug-drug interactions-has increased in recent years. Drug-metabolizing enzymes and drug transporters are important polypharmacy modulators. In this study, the effects of bosentan and rifampin on the expression and activities of organic anion-transporting peptide (OATP) and cytochrome P450 (CYP450) 2C9 and CYP3A4 were investigated in vitro. HEK293 cells and primary human hepatocytes overexpressing the target genes were treated with bosentan and various concentrations of rifampin, which decreased the uptake activities of OATP transporters in a dose-dependent manner. In primary human hepatocytes, CYP2C9 and CYP3A4 gene expression and activities decreased upon treatment with $20{\mu}M$ $bosentan+200{\mu}M$ rifampin. Rifampin also reduced gene expression of OATP1B1, OATP1B3, and OATP2B1 transporter, and inhibited bosentan influx in human hepatocytes at increasing concentrations. These results confirm rifampin- and bosentan-induced interactions between OATP transporters and CYP450.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제27권4호
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• pp.406-414
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• 2012

본 연구에서는 fucoidan이 macrophage의 활성과 항암효과를 확인하기 위하여 수행되었다. Fucoidan을 Raw 264.7 세포에 처리한 후 MTT assay로 측정한 결과 고농도 $100{\mu}g/mL$까지 세포독성은 없었으며, NO 및 TNF-${\alpha}$의 분비를 농도 유의적으로 증가시켰다. 또한 AGS 위암 세포 성장저해효과를 확인하기 위하여 MTT assay를 하였고 그 결과 농도와 시간 의존적으로 암 세포 성장이 유의적으로 감소하였다. Apoptosis로 인해 암 세포 성장이 감소하였는지 확인하기 위하여 DAPI 염색을 한 결과 apoptotic body와 세포질 응축이 시간 의존적으로 증가하는 것을 확인하였다. 또한 fucoidan은 미토콘드리아의 투과율을 향상시키며 미토콘드리아에서 방출되는 cytochrome c의 발현을 증가시켰다. Western blotting의 결과 시간 의존적으로 anti-apoptotic 분자인 Bcl-2와 XIAP 발현 감소와 반대로 pro-apoptotic 분자인 Bax 발현이 증가하였다. Cleaved-caspase-9의 발현이 증가하였으며 Akt의 인산화는 시간 의존적으로 감소하였다. Caspase 억제제인 z-VAD-FMK 처리 시 Bax, caspase-9의 발현을 감소시켜 apoptosis 유도를 억제하였으며 이러한 결과는 caspase가 apoptosis 유도에 중요한 역할을 하는 것으로 나타낸다. 본 실험의 AGS 위암 세포주에서 대조군에 비하여 fucoidan 처리군에서 면역세포 활성 및 AGS 위암 세포주에서 caspase 활성을 통해 apoptosis를 유도하는 것으로 사료된다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제34권5호
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• pp.502-507
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• 2019

본 연구는 국내에 유통되는 두족류 제품에 대한 모니터링을 수행하였다. 문어와 오징어로 표기되어 판매되는 28개 제품을 대상으로 DNA 바코드를 분석하여 원재료의 종을 동정하였다. DNA 바코드 증폭을 위하여 미토콘드리아의 16S ribosomal RNA 및 cytochrome c oxidase subunit I 유전자 부위를 증폭하는 두 종류의 프라이머 세트를 선정하였으며, 이를 이용하여 증폭된 PCR 산물의 염기서열을 분석하였다. 확보한 염기서열은 'BLAST Search'를 이용하여 미국국립보건원 GenBank에 등록되어있는 생물 종의 염기서열과 비교하여 유사도와 매칭 점수를 고려하여 최종 종을 동정하였다. 동정결과, 원재료를 오징어로 표기한 12개 제품은 아메리카대왕오징어(Dosidicus gigas, n=3), 살오징어(Todarodes pacificus, n=9) 종으로 확인되었다. 반면 문어를 원재료로 표기한 16개 제품의 경우, 6개 제품에서 대만주머니낙지(Cistopus taiwanicus, n=1), 하이야주꾸미(Amphioctopus marginatus, n=1), Scaeurgus unicirrhus(n=1), 아메리카대왕오징어(Dosidicus gigas, n=3)로 동정되어 표기된 원재료와 불일치하였으며, 이 중 3개의 제품은 알레르기 유발 원재료인 오징어가 사용되었음을 확인하였다.

• 생명과학회지
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• 제28권11호
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• pp.1268-1276
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• 2018

Cytidine analog decitabine (DEC)은 핵산 합성의 억제제로서 골수이형성 증후군 및 급성 골수성 백혈병 치료제로 사용되고 있다. 산화질소 합성에서 번역 단계를 억제하는 것으로 알려진 ammonium pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC)는 $NF-{\kappa}B$의 대표적인 억제제이다. 본 연구에서는 인체 위암 AGS 세포를 대상으로 DEC와 PDTC의 병용 처리에 따른 세포증식 억제 기전을 조사하였다. 본 연구의 결과에 따르면 PDTC에 의한 AGS 세포의 증식 억제 효과는 DEC에 의해 농도 의존적으로 유의하게 증가하였으며, 이는 G2/M기의 세포주기 정지 및 apoptosis 유도와 관련이 있었다. PDTC와 DEC의 병용 처리에 의한 세포 사멸의 유도는 DNA 손상 유도와 관련이 있음을 H2AX의 인산화 증가로 확인하였다. 아울러 PDTC와 DEC의 병용 처리는 미토콘드리아 막 전위의 파괴를 유도하고, 세포 내 활성산소종(ROS)의 생성과 Bax의 발현을 향상시키고, Bcl-2 발현을 감소시켰으며 미토콘드리아에서 세포질로의 cytochrome c 유출을 증가시켰다. 또한 PDTC과 DEC의 병용 처리는 외인성 및 내인성 apoptosis 개시 caspase에 해당하는 caspase-8과 caspase-9의 활성뿐만 아니라 caspase-3의 활성화와 PARP 단백질의 분해를 유도하였다. 결론적으로 본 연구의 결과는 PDTC와 DEC의 병용 처리가 DNA 손상을 유발하고, ROS 증가와 연계된 외인성 및 내인성 apoptosis 사멸 경로를 활성화시킴으로써 AGS 세포의 증식을 억제하였음을 의미한다.

• 대한임상검사과학회지
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• 제51권1호
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• pp.64-70
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• 2019

Dirofilaria immitis (D. immitis)는 개의 심폐사상충증을 일으키는 선형사상충이다. 이 기생충에 감염된 개는 감염 후기 단계에서 하나 이상의 증상과 혈관 주위의 염증을 동반한 심화된 심장 질환을 보인다. 감염 초기단계에 특이적이고 효율적으로 D. immitis를 검출하기 위해서, 선행연구에서 밝혀낸 D. immitis의 cytochrome c oxidase subunit I (COI)와 개의 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH)를 검출하는 특이적인 프라이머와 프로브를 이용하여 이중 TaqMan qPCR 방법을 개발했다. 양성 대조군인 플라스미드 유전자는 TA-cloning vector와 D. immitis의 COI나 개의 GAPDH로 구성되었다. 단일과 이중 TaqMan qPCR 방법은 특이적인 프라이머와 프로브, 그리고 게놈 유전자나 플라스미드 유전자로 수행했다. 프라이머의 농도를 최적한 후, 본 연구에서 개발한 이중 반응은 D. immitis의 COI와 개의 GAPDH를 동일 시료에서 동시에 검출했다. 검출 한계는 단일과 이중 방법 모두 25 copies였고, 두 방법 모두 좋은 선형성과 높은 민감도, 그리고 우수한 PCR 효율을 보여주었다. 병원체를 검출하기 위한 이중 방법은 단일 방법에 비해 비용과 노동력, 시간이 적게 든다. 따라서 이중 TaqMan qPCR 방법의 개발은 많은 수의 시료로부터 동시에 효율적으로 D. immitis 검출과 정량이 가능하게 할 것이다.

• 생태와환경
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• 제54권3호
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• pp.240-246
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• 2021

깔따구(Diptera: Chironomidae)는 저서성 대형무척추동물로 환경 및 수질 변화에 민감한 영향을 받는 중요한 환경지표생물이다. 이러한 깔따구 유충이 정수장에서 본 연구에서는 제주 정수처리장에서 발견된 깔따구 유충의 종을 분류하기 위해 형태 사진 및 COI (cytochrome c oxidase subunit I) Primer로 증폭시킨 DNA의 염기서열을 계통수 분석을 통해 분석을 실시하였다. 정수장 내 수도꼭지와 소화관 등에서 채집된 17개체는 둥근깃깔따구(O. tamarutilus) 14개체, 타마긴털깔따구(P. tammaater) 3개체 총 2종으로 확인되었다. 각 깔따구 종의 형태적 특징은 두부, 하순기절, 대악, 안테나, 발톱의 형태적 특징의 분류기로 종 동정하였다. NCBI Genbank에 등록된 깔따구 19종 COI 염기서열을 기반으로 본 연구에서 조사된 17개체의 계통진화적 분석 결과 채집된 깔따구 COI 염기서열이 둥근깃깔따구(O. tamarutilus)와 타마긴털깔따구(P. tammaater) 2종으로 각각 계통군(clade)를 이루는 것이 확인되었다. 이러한 결과는 정수장 환경별 발견되는 깔따구 유충의 다양성의 확인과 형태적-유전적 종 동정 분류정보를 바탕으로 수환경 관리 및 평가를 위한 기반 정보로 활용될 것이다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제35권6호
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• pp.574-580
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• 2020

본 연구에서는 민어과 수산물의 표준시료 DNA 염기서열을 분석한 후 DNA barcode 염기서열을 확정하고 검증한 후 시중 유통 중인 민어과 수산가공식품의 위변조 현황을 조사하였다. 표준시료의 미토콘드리아 cytochrome c oxidase subunit I유전자를 증폭한 후 증폭된 PCR 산물의 염기서열을 분석하였다. 분석결과 종 판별에 특이적인 655 bp를 선정하여 DNA barcode 염기서열로 하였다. DNA barcode information과 primer set을 이용한 진위판별 정확성을 확인한 결과 PCR 증폭은 모두 확인되었다. NCBI에 등록된 각각 어류의 유전자 염기서열과 비교하였을 때 참조기 100%, 부세 100%, 보구치 100%, 민어 100%의 상동성을 나타내어 실험에 사용된 DNA barcode information과 primer set의 정확성을 확인하였다. DNA barcode 시험법을 이용해 시중 유통되는 민어과 수산가공품 32건에 대해 조사한 결과 위변조 사례는 나타나지 않았다. 그러나 식품공전에 등재된 보구치 대신 백조기라는 일반명이 사용되고 있어 소비자에게 혼란을 야기하고 있었다. 따라서 수산가공품 원재료 표시에 일반명과 더불어 표준명 또는 학명을 표시하여야 할 것으로 판단되었다.

• 한국식품위생안전성학회지
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• 제36권4호
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• pp.331-341
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• 2021

본 연구에서는 DNA barcode 시험법을 이용하여 시중 유통 중인 도미와 옥돔 수산가공식품의 위변조현황을 분석하였다. 참돔 12건, 돌돔 4건, 황돔 7건, 감성돔 2건, 나일틸라피아 7건, 옥돔 6건, 옥두어 8건 총 46건의 시료에 대해 실험을 진행하였다. 생물 종 판별에 주로 이용되는 mitochondrial DNA의 COX I (cytochrome C oxidase subunit I) 유전자 영역을 분석하여 원재료의 종을 판정하였다. NCBI에서 제공하는 BLAST Search 프로그램을 이용하여 분석된 염기서열과 NCBI에 등록된 각각 어류의 유전자 염기서열을 비교하였다. 분석 결과 염기서열 상동성(identity)이 97% 이상인 종을 원재료 종으로 판별하였다. DNA barcode 시험법을 이용해 시중 유통되는 참돔, 돌돔, 황돔, 감성돔, 나일틸라피아, 옥돔, 옥두 수산가공품 46건에 대해 조사한 결과 위변조 사례는 나타나지 않았다. 그러나 시장에서 통용되는 일반명칭과 식품공전에 기술된 표준명칭이 상이하여 소비자의 혼란을 야기할 수 있어 수산물 가공식품 표기에 일반명칭과 더불어 표준명칭 또는 학명을 같이 기술하여야 할 것으로 판단되었다.