The present study was undertaken to investigate whether the known adenylate cyclase activators, forskolin and cholera toxin, would affect the germinal vesicle breakdown (GVBD) and the production of cAMP in mouse oocytes in vitro. To do this, in vitro oocyte culture method and adenylate cyclase assay were employed. In response to different concentrations of forskolin (20 to 80 $\\mu$g/ml) added to a culture medium, the percentage of GVBD significantly decreased (56 to 31%) in a dose-dependent manner as compared to that of control (63%). This inhibitory phenomenon by forskolin was reversible since the rate of GVBD was returned to the control level when the oocytes were transferred to a control medium following exposure to forskolin (80 $\\mu$g/ml). Treatment of cholera toxin (10 to 1, 000 ng/ml) was, however, ineffective in suppressing GVBD. When forskolin (10 to 80 $\\mu$g/ml) was added to the mouse oocyte extracts, cAMP production significantly increased by 5 to 18 fold, whereas cholera toxin (10 to 1, 000 ng/ml) was no longer effective. In addition, treatment of guanidyl-imidodiphosphate (GppNHp, 100 $\\mu$M), which is an activator of the regulatory unit of adenylate cycleas, with forskolin did not exhibit any changes in cAMP production as compared to that induced by forskolin alone. Neither cholera toxin nor cholera toxin plus GppNHp (100 $\\mu$M) exhibited any differences in mouse oocytes. From the above results, the suppression of GVBD by forskolin may be mediated by a high level of intracellular cAMP in mouse oocytes. It appears that the changes in intracellular cAMP level may an important role in the mouse oocyte maturation.
The insulin-like growth factor-I(IGF-I) is an important metabolic factor involved in cell growth and metabolism. Although secretion of IGF-I in rat liver is regulated by growth hormone, the effects of forskolin, adenylate cyclase activator, on secretion of IGF-I have not been reported. Therefore, a modified perfused rat liver model was used to investigate the regulatory effects of forskolin on IGF-I secretion in this experiment. The results were summerized as follows : 1. Modified perfused rat liver model was not changed to aspartate aminotransferase(AST), alanine aminotransferase(ALT) and lactic dehydrogenase(LDH) secretion in time. 2. The IGF-I secretion in hepatic cell was increased by forskolin($10^{-5}$, $10^{-6}$ and $10^{-7}M$) in a dose-dependent manner as compared with those of the controls, and significantly increased by $10^{-5}$ and $10^{-6}$ forskolin(p < 0.05). 3. Secretion of glucose in hepatic cell significantly was decreased by $10^{-5}$ forskolin as compared with those of controls(p < 0.05). These results suggest that forskolin may be involved in the regulation of IGF-I secretion in the perfused rat liver.
The objectives of this study is to compare the inhibitory mechanism of sodium nitroprusside and forskolin on the phorbol ester, activator of protein kinase C (PKC), -induced contractions in rat aorta. $0.1\;{\mu}M$ phorbol dibutyrate (PDBu) induced sustained contractions and increased phosphorylations of myosin light chain (MLC) time-dependently. At 30 min, the contractions and phosphorylations of MLC by PDBu were augmented maximally and remained constant. Moreover, $^{45}Ca^{2+}$ uptake was increased 30 min after PDBu stimulation from resting values. Sodium nitroprusside which activates guanylyl cyclase followed by increasing cGMP, inhibited the PDBu-induced contractions concentration-dependently. On the other hand, forskolin which activates adenylyl cyclase followed by increasing cAMP, also inhibited the PDBu-induced contractions concentration-dependently. However, sodium nitroprusside was more potent to inhibition of the PDBu-induced contractions than forskolin. Sodium nitroprusside inhibited $^{45}Ca^{2+}$ uptake by PDBu stimulation. Forskolin also inhibited $^{45}Ca^{2+}$ uptake by PDBu stimulation. Sodium nitroprusside and forskolin inhibited the phosphorylations of MLC by PDBu, respectively. However, sodium nitroprusside was more potent to inhibition of phosphorylations of MLC by PDBu than forskolin. From these results, Sodium nitroprusside via cGMP or forskilin via cAMP may reduce myoplasmic $Ca^{2+}$ followed by suppression of phosphorylations of MLC of PKC-mediated contractions, which results in vasodilation. However, cGMP may play a role more importantly than cAMP on the regulation of protein kinase C-mediated contraction in vascular smooth muscle.
The involvement of the cyclic AMP (cAMP) effector system in the release of endogenous dopamine and acetylcholine from the rat neostriatum was assessed. Forskolin, an activator of adenylate cyclase, was used to enhance cAMP production, and the consequence of this enhancement on the spontaneous and potassium stimulated release of dopamine and acetylcholine was evaluated. Neostriatal slices were prepared from Fischer 344 rats and after a preincubation period the release of each endogenous neurotransmitter was measured from the same slice preparation. To measure acetylcholine release the slice acetylcholinesterase (AChE) activity was inhibited with physostigmine, but the release from slices with intact AChE activity was also determined (choline, instead of acetylcholine was detected in the medium). Under both conditions forskolin induced a significant dose-dependent increase in the potassium-evoked release of dopamine. In the same tissue preparations the release of neither acetylcholine (AChE inhibited) nor choline (AChE intact) was affected by forskolin. The results indicate that the CAMP second messenger system might be involved in neuronal mechanisms that enhance neostriatal dopamine release, but stimulation of this second messenger by forskolin does not further enhance neostriatal acetylcholine release.
The effect of forskolin on corticostriatal synaptic transmission was examined by recording excitatory postsynaptic currents (EPSCs) in rat brain slices using the whole-cell voltage-clamp technique. Forskolin produced a dose-dependent increase of corticostriatal EPSCs (1, 3, 10, and $30{\mu}M$) immediately after its treatment, and the increase at 10 and $30{\mu}M$ was maintained even after its washout. When the brain slices were pre-treated with (DL)-2-amino-phosphonovaleric acid (AP-V, $100{\mu}M$), an NMDA receptor antagonist, the acute effect of forskolin ($10{\mu}M$) was blocked. However, after washout of forskolin, an increase of corticostriatal EPSCs was still observed even in the presence of AP-V. When KT 5720 ($5{\mu}M$), a protein kinase A (PKA) inhibitor, was applied through the patch pipette, forskolin ($10{\mu}M$) increased corticostriatal EPSCs, but this increase was not maintained. When forskolin was applied together with AP-V and KT 5720, both the increase and maintenance of the corticostriatal EPSCs were blocked. These results suggest that forskolin activates both NMDA receptors and PKA, however, in a different manner.
The present study was an attempt to investigate the effect of forskolin on secretion of catecholamines (CA) evoked by Ach, excess $K^+$, DMPP, McN-A-343 and caffeine from the isolated perfused rat adrenal glands and to elucidate its mechanism of action. The perfusion with forskolin (1.0 uM) for 1 min into the adrenal vein enhanced markedly the secreation of CA evoked by Ach (50 ug), excess $K^+$ (56 mM) DMPP (100 uM) and by caffeine (0.3 mM) but did not that by McN-A-343. Forskolin alone did not potentiate the CA secretion. Moreover, forskolin augmented the CA release evoked by the above same stimulation even in the absence of extracellular calcium. The 1 min perfusion of 300 uM-dibutyryl cyclic AMP (DBcAMP), which is known to increase cyclic AMP levels, led to enhancement of Ca secretion evoked by Ach, excess $K^+$ and DMPP but did not that by McN-A-343 and caffeine. DBcAMP by itself also did not augment the CA secretion. In the calcium-free medium DBcAMP significantly enhanced the CA secretion by the same stimulation, except for the case of McN-A-343. These experimental results suggest that forskolin activates adenylate cyclase, resulting the elevation of cyclic AMP which may potentiate cholinergic nicotinic receptor-mediated and also depolarization-dependent CA secretion and that it may alter the intracellular calcium homeostasis in the rat adrenal glands.
This study was designed to clarify the mechanism of the inhibitory effect of forskolin on contraction, cytosolic $Ca^{2+}$ level $([Ca^{2+}]_i)$, and $Ca^{2+}$ sensitivity in guinea pig ileum. Forskolin (0.1 nM ${\sim}$ 10 ${\mu}M$) inhibited high $K^+$ (25 mM and 40 mM)- or histamine (3 ${\mu}M$)-evoked contractions in a concentration-dependent manner. Histamine-evoked contractions were more sensitive to forskolin than high $K^+$-evoked contractions. Spontaneous changes in $[Ca^{2+}]_i$ and contractions were inhibited by forskolin (1 ${\mu}M$) without changing the resting $[Ca^{2+}]_i$. Forskoln (10 ${\mu}M$ ) inhibited muscle tension more strongly than $[Ca^{2+}]_i$ stimulated by high $K^+$, and thus shifted the $[Ca^{2+}]_i$-tension relationship to the lower-right. In histamine-stimulated contractions, forskolin (1 ${\mu}M$) inhibited both $[Ca^{2+}]_i$ and muscle tension without changing the $[Ca^{2+}]_i$-tension relationship. In ${\alpha}$-toxin-permeabilized tissues, forskolin (10 ${\mu}M$) inhibited the 0.3 ${\mu}M$$Ca^{2+}$-evoked contractions in the presence of 0.1 mM GTP, but showed no effect on the $Ca^{2+}$-tension relationship. We conclude that forskolin inhibits smooth muscle contractions by the following two mechanisms: a decrease in $Ca^{2+}$ sensitivity of contractile elements in high $K^+$-stimulated muscle and a decrease in $[Ca^{2+}]_i$ in histamine-stimulated muscle.
Dibutyryl-cyclic AMP (db-cAMP) and forskolin were used to investigate vasodilating mechanism of cAMP in rabbit aorta. Db-cAMP and forskolin inhibited the development of contractile tension induced by norepinephrine (NE) concentration-dependently. However, high $K{^+}-induced$ contractile tension was inhibited less effectively by db-cAMP and forskolin. Db-cAMP and forskolin inhibited $^{45}Ca^{2+}$ uptake increased by NE. Forskolin seemed to inhibit $^{45}Ca^{2+}$ uptake increased by high $K{^+}$, but this inhibition was not significant statistically. Db-cAMP inhibited $Ca^{2+}-transient$ contraction by NE in $Ca^{2+}-free$ solution. In conclusion, it seems that cAMP blocks $Ca^{2+}$ influx through receptor operated $Ca^{2+}$ channels (ROCs), but that the effect of cAMP on $Ca^{2+}$ influx through voltage gated $Ca^{2+}$ channels (VGCs) is not clear in this experiment. Furthermore, cAMP is likely to inhibit calcium release from the intracellular stores.
Kim Sung-Dae;Cho Jae-Youl;Park Hwa-Jin;Kim Sang-Keun;Rhee Man-Hee
Biomedical Science Letters
/
v.12
no.3
/
pp.131-137
/
2006
RGS is a negative regulator of G-protein signaling and can be identified by the presence of a conserved $120{sim}125$ amino acid motif, which is referred to as the RGS box. A number of RGSs are induced in response to a wide variety of stimuli. Increased levels of RGSs lead to significant decreases in GPCR responsiveness. To obtain further evidence of a role of RGS proteins in rat C6 astrocytoma cells, we first determined the expression profile of RGS-specific mRNA in C6 cells using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) with a poly dT18 primer and transcript-specific primers. We found that RGS2, RGS3, RGS6, RGS9, RGS10, RGS12, and RGS16 were differentially expressed in C6 astrocytoma cells. The highest expression rate was found for RGS3, followed by RGS16, RGS10 and RGS9, whereas the expression level for RGS2 was barely detectable. We next assessed whether forskolin regulated the expression of RGSs expressed in C6 astrocytoma cells. The present study found that forskolin dose-dependently stimulated the expression of RGS2 transcripts. This up-regulation of RGS2 gene was abrogated by H-89, potent and broad-spectrum protein kinase A (PKA) inhibitors. Actinomycin D completely inhibited the up-regulation of RGS2 gene induced by forskolin $(10{\mu}M)$, indicating that the regulation of RGS2 gene is controlled at the transcriptional level. In addition, forskolin did significantly activate transcriptional cAMP response element (CRE) in either HEK 293 cells or C6 cells and did not modulate the $NF-{\kappa}B$ and AP-l activity as measured by luciferase reporter gene assay. Finally, forskolin induced the expression of RGS2 mRNA in C6 astrocytoma cells, which depend on the PKA pathway and CRE transcriptional pathways.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.