Evaluation of viability and capacitation of canine sperm is of great importance to deter- mine good condition for freezing canine semen and consequently to improve conception rate by arti-ficial insemination. Semen were collected from nine male dots which had been proved to be fertile in the post and the semen were treaded for freezing procedure. Semen were thawed at 37$^{\circ}C$ for 30 seconds. In this study, hypoosmotic swelling(HOS) test and chlortetracycline(CTC) test were per- formed to evaluate post-thaw viability and capacitated status of sperm, respectively. In HOS test far canine sperm, the highest percentage of curled sperm was shown at 60 mOsm. In HOS test for canine semen, there were considerably significant correlation between HOS values and sperm motil- ity(r=0.9064, p<0.01) and converse correlation between HOS values and sperm abnormality(r=- 0.6905, p<0.05). The sperm viability and HOS-values for chilled extended semen were significantly decreased from 0 to 72 hours during storage at 5$^{\circ}C$ (p<0.05). Of the media added to canine semen after thawing, the most capacitated sperm were shown in CCM(p<0.01), and then This Fructose Cit- rate(TFC) medium with calcium from 3 hours after incubation with media. It was concluded that HOS test is of great value to determine the viability and motility of canine sperm, whereas CTC test is usable to determine the capacitated status. Consequently, both tests were thought to be useful as the additional tests to standard semen analysis.
Jang Hyun-Yong;Jung Yoo-Sung;Kim Jong-Taek;Park Chun-Keun;Cheong Hee-Tae;Kim Choung-Ik;Yang Hoo-Keun
Reproductive and Developmental Biology
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제30권1호
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pp.71-74
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2006
Hypoosmotic swelling test (HOST) is used for evaluating the plasma membrane function and fertilizing ability in mammal spermatozoa. However, HOS solutions and experimental conditions have not been determined clearly for assessing canine spermatozoa. This study was conducted to examine the HOS solutions and assay conditions, including incubation time (30 to 120 min), storage temperature (4, 17 and $20^{\circ}C$), semen status (fresh and frozen). Maximum spermatozoal plasma membrane swelling was obtained in an 150 mOsm Na-citrate/Fructose solutions with an incubation time for 45 min. The storage temperature and semen status affected the percentage of HOS positive spermatozoa. The HOS test adapted to canine spermatozoa in this study was simple and highly consistent assay with good repeatability. The optimal condition of HOST in canine spermatozoa is an 150 mOsm Na-citrate/Fructose solutions with an incubation time for 45 min regardless of semen storage temperature and semen status.
Objectives: We have previous reported that thawed testicular sperm and sperm extracted from seminiferous tubule could achieved optimal fertilization and pregnancy in azoospermic patients. However, thawed testicular sperm did not show motility in many cases. Therefore we studied viability of immotile sperm extracted from frozen-thawed seminiferous tubule using hypo-osmotic swelling (HOS) test and eosin-Y test. Materials and Methods: After sperm extraction using for ICSI, the remained sections of seminiferous tubules were frozen with a computerized freezer. For thawing and preparation of testicular sperm, the seminiferous tubules were thawed by removing from $LN_2$ and letting them at room temperature for 10 min followed by %37^{\circ}C$ water bath for 10 min. The prepared samples were washed for free of preservation medium and sperm preparation method described previous. Sperm was suspended in 0.1 ml hypoosmotic solution. After 30 minutes, the type of distally coiled sperm were assessed. Results: In 44 cases of cryopreservation of seminiferous tubules in obstructive azoospennic patients, the fertilization rates with 2PN were 71.4% and pregnancy rates were 34.1%. The presence of motile spermatozoa on subsequent post-thaw testicular sperm remarked 15.1% and were increased to 77.3% just before ICSI. After sperm extracted from frozen-thawed seminiferous tubule, 3 hrs later in in vitro culture, the cases of presence of motile sperm, reaction of hypo-osmotic swelling test and viable sperm were 63.6% (28/44), 93.2% (41/44), and 77.3% (34/44), respectively. Conclusions: Just after post-thawed testicular sperm did not showed motility. Although motility was gained after in vitro culture, many cases showed non-motile sperm until optimal insemination time. However, HOS test showed positive reaction in non-motile sperm. Therefore, HOS test is an alternative method for the selection of viable sperm for ICSI.
Flow cytometry를 이용하여 개 정자의 생존율 평가를 수행하고자 2-4세의 수캐 5두가 이용되었고, 분석을 위해 PI염색을 실시하였다. Flow cytometry를 이용한 개 신선 정액의 생존율 평가는 생존 정자와 죽은 정자의 비율을 1:0, 1:1, 1:3으로 조성하여 이를 flow cytometry로 평가하고 광학현미경검사, CFDA/PI 염색검사, HOS test에 의한 생존율과 비교하여 flow cytometry와의 상관관계를 알아보았다. 또한 개 정액을 동결하여 응해 후의 개 정자의 생존율 평가에도 동일한 방법으로 상관관계를 조사하였다. 신선 정액에서 생존 정자와 죽은 정자의 비율이 1:0, 1:1, 1:3 모든 경우에서 flow cytometry를 이용한 생존율은 HOS test에 의한 생존율과 높은 상관관계를 나타내었다 (p<0.01). 신선 정액에서 생존 정자와 죽은 정자의 비율이 1:0과 1:3일 때 광학현미경적 검사에 의한 생존율은 flow cytometry 분석에 의한 생존율과 유의 적인 상관관계를 나타내었으나 (p<0.05), 1:1 비율의 경우 상관관계를 보이지 않았다. 신선 정액에 생존 정자와 죽은 정자의 비율이 1:0과 1:1일 때 CFDA/PI 염색 검사에 의한 생존율은 flow cytometry분석에 의한 생존율과 높은 상관관계를 보였으며(p<0.01), 1:3 비율에서는 유의적인 상관관계를 보였다 (p<0.05). 동결 및 응해 후의 개 정자의 생존율 평가에서 HOS test 결과는 flow cytometry분석에 의한 생존율과 높은 상관관계를 보였으며 (p<0.01), 광학현미경적 검사를 통한 생존율은 유의적인 상관관계를 보였으나 (p<0.05), CFDA/PI 염색 검사결과는 상관관계를 보이지 않았다. 이상의 결과 flow cytometry는 신선정액 및 동결 융해 후 개 정자에 대한 생존율 검사에 정확한 평가 방법 인 것으로 판단되었다.
The objective of this study was to establish the optimal conditions for hypoosmotic swelling (HOS) test to assess the functional integrity of the membranes of boar fresh or frozen/thawed spermatozoa. When pooled semen sample was incubated for 30 min at $37^{\circ}C$ with different test solution of varied osmolarity, the highest percentage of HOS positive spermatozoa was observed in a 150 mOsmol fructose/Na-citrate solution (33.6%). Incubation time did not affect significantly the score of HOS positive spermatozoa observed in a 150 mOsmol fructose/Na-citrate solution at $37^{\circ}C$, but the osmolarity affected the score of HOS positive spermatozoa under the same condition above. Fresh semen was significantly better than frozen/thawed semen in semen parameters evaluated such as motility, viability, membrane integrity and lipid peroxidation (p<005). In the relationships of sperm parameters, motility vs viability, motility vs membrane integrity and viability vs membrane integrity were positively correlated ($0.82{\sim}0.94$) but lipid peroxidation vs other estimated factors was negatively correlated ($- 0.90{\sim}- 0.98$). Among the evaluation methods, motility vs Viability, motility vs membrane integrity and lipid peroxidation vs other estimated factors were significantly correlated (p<0.05). These results of this. study indicate that the optimal condition of HOST in boar spermatozoa is a 150 mOsmol fructose/Na-citrate solution for 30 min incubation at $37^{\circ}C$ and HOST can substitute the examination of motility, viability and lipid peroxidation.
대형 화물자동차의 사고는 일반적인 사고와 달리 심각한 인명피해 등을 동반할 확률이 높다. 장거리 운행이 많은 화물자동차 운전특징으로 인해 운전자의 피로 및 피로로 인한 사고가 높다. 이러한 피로와 관련된 사고를 감소시키기 위해서 외국에서는 운전자의 피로에 영향을 주는 중요변수인 운전시간, 수면시간, 운행형태 등을 고려하여 운전자의 운행시간(Hour-of-Service:HOS)을 법으로 규정하고 있다. 운송업체 또한 운전자들의 사고를 감소시키기 위해 법정 운전자 근무시간 준수를 위해 노력하고 있는 실정이다. 그러나 우리나라는 화물자동차 운전자의 피로와 관련 사고율을 줄일 수 있는 기초적인 법정 운전자 운행시간 조차 제시되지 않고 있다. 본 연구는 우리나라 화물자동차 사고사망자수를 감소시킬 수 있는 운전자의 근로기준법 제정 필요성을 제시하는데 목적이 있다. 이를 위해서 현재 운영 중인 선진외국의 화물자동차 운전자 운전시간 및 운행규정을 살펴보고 실증적 자료를 통해 운전시간에 따른 사고 위험도의 차이를 살펴보았다. 실증적 자료는 미국의 화물자동차 3곳의 사고 자료 231명의 운행일지와 사고가 나지 않은 자료 462명의 운행일지를 수집, 총 693명 운전자의 운행일지를 수집하였다. 운전자의 연속된 운행에 대한 특징을 반영할 수 있도록 time-dependent 로지스틱 회귀모형을 사용하였다. 분석결ㄹ과 운행시간 1시간부터 3시간까지 운전한 운전자 사고위험도 차이는 없는 것으로 나타났다. 운행시간이 10시간인 운전자는 운행시간 1시간인 운전자보다 사고위험도가 약 2.2배 높은 것으로 분석되었다. 결론적으로 운행시간이 증가할수록 사고위험도 또한 증가한다는 것을 알 수 있다. 또한 본 연구는 우리나라의 지역적 특성과 운전자 특성에 맞는 운전자 운전시간 설정을 위한 연구방향 및 향후 연구과제에 대하여 연급하였다.
Park, Kyou-Hwa;Koak, Jai-Young;Kim, Seong-Kyun;Heo, Seong-Joo
The Journal of Advanced Prosthodontics
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제3권2호
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pp.63-68
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2011
PURPOSE. The object of this study was to investigate the effect of UV irradiation (by a general commercial UV sterilizer) on anodized titanium surface. Surface characteristics and cellular responses were compared between anodized titanium discs and UV irradiated anodized titanium discs. MATERIALS AND METHODS. Titanium discs were anodized and divided into the following groups: Group 1, anodized (control), and Goup 2, anodized and UV irradiated for 24 hours. The surface characteristics including contact angle, roughness, phase of oxide layer, and chemical elemental composition were inspected. The osteoblast-like human osteogenic sarcoma (HOS) cells were cultured on control and test group discs. Initial cellular attachment, MTS-based cell proliferation assay, and ALP synthesis level were compared between the two groups for the evaluation of cellular response. RESULTS. After UV irradiation, the contact angle decreased significantly (P<.001). The surface roughness and phase of oxide layer did not show definite changes, but carbon showed a considerable decrease after UV irradiation. Initial cell attachment was increased in test group (P=.004). Cells cultured on test group samples proliferated more actively (P=.009 at day 2, 5, and 7) and the ALP synthesis also increased in cells cultured on the test group (P=.016 at day 3, P=.009 at day 7 and 14). CONCLUSION. UV irradiation induced enhanced wettability, and increased initial cellular responses of HOS cells on anodized titanium surface.
Personality characteristics of third decade female TMD patients was studied by means of SCL-90-R test. 112 TMD patients and 96 dental controls were subjected at the department of Oral medicine, Kyungpook National University Hospital. All the patients were divided into 3 groups according to their pain profile namely, MPDS, ID with Pain and ID with out Pain, and dental controls were divided into 2 groups manely, Dental Controls with Pain and Dental Controls without Pain for comparison. The obtained results were as follows : 1. Mean T-scores of SCL-90-R primary scales and global indexes in the patient and control group were within normal range. 2. When compared between groups with pain, MPDS group were significantly higher in scales of SOM, 0-C, I-S, HOS and PHOB than ID with Pain group and in scales of SOM, I-S. DEP, HOS and PHOM than Dental Controls with Pain group. 3. When compared with ID and Control groups in same pain condition, there were no significant differences between ID without pain and Dental Controls without Pain group. 4. When compared between groups with pain and groups without pain, there were significant differences in scales of SOM and O-C between Dental Controls with Pain and Dental controls without Pain group.
목적: Bisphosphonate(BPs)는 endogenous pyrophosphates의 유사체로 Paget's disease, 골다공증, 종양 유발성 골용해와 같은 골격계 질환의 치료에 쓰이고 있으며, 유방암의 골파괴성 전이에 대한 치료제로 사용되어 지고 있다. 골전이의 양상이 골흡수성 및 골생성이 혼합되어 나타나는 전립선암의 전이에서도 치료제의 하나로 이용되고 있다. BPs는 파골세포성 골흡수가 과하게 일어난 질환에 대해서는 비교적 널리 알려져 있지만, 골종양 세포에 대한 직접적인 효과에 대해서는 아직 밝혀져 있지 않다. 가장 강력한 질소 함유(nitrogen-containing) BPs인 Zoledronic acid(ZOL)로서 골육종이 발현된 nude mouse model을 이용하여 ZOL의 종양 억제능을 생체내 실험으로 확인하고자 하였다. 대상 및 방법: 인간 골육종 세포주로는 MG-63과 HOS 골육종 세포주를 이용하였고, 종양의 크기 변화를 육안으로 확인하기 위하여 GFP 유전자가 형질 전환된 MG-63-GFP, HOSGFP 세포를 6주령된 수컷 마우스 10마리에 각각 피하주사하여 종양의 조각이 $3{\times}3{\times}3$ mm이 될 때까지 사육한 후, ZOL을 120 ug/kg의 농도로 일주일에 2번 피하에 주사하였다. 종양의 크기를 일주일에 두 번씩 측정하고, 형광조명을 이용하여 촬영하였다. 결과: HOS 골육종 세포주를 이용한 생체실험에서 대조군의 종양의 평균 크기는 2,520 $mm^3$이며 ZOL 투여군은 131 $mm^3$로서 94%의 감소를 보이며, MG-63 골육종 세포주를 이용한 생체실험에서는 대조군의 종양의 평균 크기는 2,866 $mm^3$이며 실험군은 209 $mm^3$로서 72%의 감소를 보였다(P<0.05). 결론: Nude mouse를 이용한 생체실험에서 ZOL은 골육종의 세포사멸에 직접적인 영향을 미치며 이것은 앞으로 골육종 치료의 약제중 하나로 선택되어 질수 있다고 판단되며, 종양세포주에 따라 ZOL의 영향이 다를 수 있으므로 ZOL에 감수성 있는 종양세포를 찾아 적용하는 것이 좋을 것으로 사료된다.
최근 들어, 광 기록 저장 시스템을 위한 다양한 기록 방식들이 연구되고 있다. BD (Blue-ray Disc)나 HD-DVD (High-Definition Digital Versatile Disc) 기록 방식의 표준화가 진행된 후에 차세대 광 기록 방식에 대한 관련 업계의 초점이 모아지고 있다. 이러한 차세대 광 기록 저장 시스템 가운데 기술의 호환성이 장점인 Super-RENS (Super-Resolution Near field Structure) 기술이 유력한 후보 중 하나이다. 본 논문에서는 HOS (Higher-Order Statistics)에서 사용되는 bicoherence 테스트를 통해 Super-RENS read-out 신호의 비선형성을 분석하고, Super-RENS 시스템의 비선형 모델링을 위해 신경망을 적용하고자 한다. 본 논문에서 고려하는 모델 구조는 NARX (Nonlinear AutoRegressive eXogenous) 모델이다. 모의실험 결과, Super-RENS read-out 신호의 비선형성이 존재함을 알 수 있었고, Super-RENS 시스템의 비선형 모델링을 위해 신경망이 유용하게 활용될 수 있다는 가능성을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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