Liu, Zhong;Wang, Xin-Mei;Jia, Tong-Fu;Zhai, Yi;Sun, Ling-Yan;Cheng, Yu-Ping;Zhang, Yue-Min;Liu, Shi-Hai;Liang, Jun
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제16권2호
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pp.679-682
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2015
Background: Studies indicate the immediate early response gene 3 (IER3) is involved in many biological processes. Recently, it was discovered that IER3 plays an important role in tumorigenesis and tumor progression. Thus it may be a valuable biomarker in tumor. This study was designed to investigate the expression status of IER3 in primary hepatocarcinoma (PHC) and correlation with clinicopathological parameters. Materials and Methods: Real-time PCR was performed to evaluate the expression levels of IER3 in 62 pathologically diagnosed human PHC specimens. Results: A statistically significant association was disclosed between the expression of IER3 and P53 mutant protein (short for P53), Ki-67, EGFR and the biggest diameter, differentiation grade of tumor. Conclusions: This work is the first to shed light on the potential clinical usefulness of IER3, as an efficient tumor biomarker in PHC.
Epidermal growth factor (EGF) activates many intracellular effector molecules, which subsequently influence the expression levels of many genes involved in cell growth, apoptosis and signal transduction, etc. In this study, the early response of gene expressions due to EGF treatment was monitored using oligonucleotide DNA microarrays in rat schwannoma cell lines. An immunoblotting experiment showed the successful activation of EGF receptors and an effector protein, STAT5, due to EGF treatment. The microarray study showed that 35 genes were significantly induced and 2 were repressed within 60 min after the treatment. The list of induced genes included early growth response 1, suppressor of cytokine signaling 3, c-fos, interferon regulatory factor 1 and early growth response 2, etc. According to the microarray data, six of these were induced by more than 10-fold, and showed at least two different induction patterns, indicating complicated regulatory mechanisms in the EGF signal transduction.
The oral cavity is humid environment mainly due to the continuous salivary flow. The reaction of oral mucosa to fluid flow is important for homeostasis and pathogenesis. The objective of this study is the screening the change of gene expression after the application of fluid induced shear stress (FISS) on the gingival fibroblast using cDNA microarray assay. The immortalized human gingival fibroblasts were grown and FISS was applied using a cone viscometer at a rotational velocity of 40 rpm, respectively for periods of 2 and 4 hours. The synthesis of cDNA was done from the extracted total RNA and cDNA microarray assay was done subsequently. The genes that showed over 1.6 in the Cy3/Cy5 or the Cy5/Cy3 value were regarded as genes influenced significantly by the FISS application ion (/M/>0.7). The " RUNX-1" was increased its expression in 2 hours group and " RUN and SH3 domain containing 1" was increased its expression in 4 hours group. The "CC020415", "cyclin L1", "interferon regulatory factor1", "early growth response 1", "immediate early response 2", and "immediate early response 3" genes were increased their expression in 2 and 4 hours after FISS application. In conclusion, we could find many genes that were probably related to the FISS application. Interestingly, most of them were placed in similar molecular pathways and these findings improve the reliability of chip data and usefulness in overall screening. From this experiment, we could find many items for further study and it will make improvement in the understanding of intracellular events in response to FISS.
As a step toward a more complete understanding of the molecular actions of TNF, we prepared a cDNA library from TNF-treated human FS-4 fibroblasts and used differential hybridization to identify cDNA clones corresponding to mRNAs enriched in TNF-treated eells. In Quiescent FS-4 cells n induces an increase in the level of some mRNAs within 20 to 30 min. Some of these immediate-early response mRNAs are elevated only transiently for about 30 to 120 min, e. g., c-fos and c-myc (Lin and Vilcek,1987) or the transcription factor IRF-1 (Fujita et al.1989). Such immediate-early gene products may be important for the activation of other genes, but their transient induction suggests that they are not the actual effector molecules responsible for the phenotypic changes induced by TNF. We chose a 3-h incubation with W because we were seeking cDNAs corresponding to messages that are more stably elevated after TNF treatment. Indeed, the results shown in Figure 8 and 9 indicate that all of the mRNAs corresponding to the eight TSG cDNAs isolated remained significantly elevated after 16h of continuous treatment with TNF, and their kinetics of induction were clearly different from those of the immediate-early response mRNAs such as c-fos, c-myc or IRF-1. Nevertheless, only the induction of TSG-21 (collagenase) and TSG-27 (stromelysin) nNAs was completely inhibited by cycloheximide and the induction of TSG-37 (metallothionein-II) was reduced in the presence of this inhibitor of protein synthesis. Induction of the other five TSG mRNAs by TNF was completelyresistant to cycloheximide, suggest ins that no protein intermediate is needed for the upregulation of these mRNAs.
Human cytomegalovirus (HCMV) 의 immediate early(IE) 유전자의 promoter/enhancer 부위에 cAMP response element가 있다는 것으부터 caMP 가 HCMV 의 증식에 관여할 것이라고 생각할 수 있다. 이러한 가능성을 알아보기 위해 8-bromoadenosine 3', 5'-cyclic monophosphate (BrA) 와 papaverine 같은 세포내 cAMP 농도를 변화시키는 약제를 사용하여 HCMV 의 증식, DNA 합성 및 IE 유전자 발현에 대한 영향을 알아보았다. HCMV 증식과 DNA 합성은 papaverine 에 의해 억제된 반면, BrA 는 HCMV 의 증식에는 큰 영향을 주지 않았고 DNA 합성은 오히려 촉진시키는 것을 알 수 있었다. HCMV IE promoter 에 의해 작동되는 CAT 유전자를 함유한 plasmid pCMVIE/CAT 을 세포내로 transfection 시켰을 때, papaverine 을 처리한 세포에서는 CAT 효소 활성도가 감소한 반면 BrA 를 처리한 세포에서는 증가하였다. HCMV 에 감수성이 없는 HeLa 세포에서는 CAT 활성도가 감소성 세포인 HEL 세포에서보다 높게 나타난 반면, Vero 세포에서는 낮게 나타났다. 이들 비감수성 세포인 HEL 세포에서 보다 높게 나타난 반면 Vero 세포에서는 낮게 나타났다. 이 들 비감수성 세포에서의 CAT 활성도는 BrA 를 처리하여 주었을 때 모두 증가하였다. 이상과 같은 결과로부터 cAMP 는 HCMV 증식과 IE 유전자 발현에 어느 정도 관여한다는 것을 알 수 있다.
본 연구는 떡잎의 발달 동안 지방의 유동 및 대사와 관련된 오이 유전자들의 발현을 조사하여 유전자의 활성을 비교하고자 하였으며, 글라이옥시좀과 미토콘드리아 사이의 탄소원(아세틸 단위)의 가능한 경로를 탐색하고자 하였다. 네 곳의 세포 내 소기관인 글라이옥시좀(퍼옥시좀), 미토콘드리아, 엽록체 및 세포질에서 작동하는 중요 대사경로의 10개 유전자들이 조사되었다. 나아가 암소에서 발아한 유식물체의 발아 초기 반응과 이후 3일간 빛을 주었을 때의 반응을 조사하였다. 역전사-중합효소연쇄반응(RT-PCR)에 따르면, 유식물체의 발달 동안에 저장지방의 유동과 관련된 Thio2, ICL 및 MS 유전자는 항상 유사한 유전자 발현 양상을 나타냈다. 오이의 발아 초기에 BOU 유전자와 함께 ICL 및 MS 유전자의 공조된 발현은 퍼옥시좀과 미톤콘드리아 사이에 아세틸 단위의 2차 통로의 존재 가능성에 대한 강한 증거이다. 앞서 보고된 연구에서 보여준 BOU 활성에서처럼 BOU 유전자는 빛 의존성으로 암소에서는 세포막의 미약한 발달로 인하여 활성이 저하됨을 암시한다. 나머지의 유전자들은 떡잎이 초록색으로 발달하고 노쇠화 할 때까지 떡잎의 전 발달 기간 동안에 활성을 나타냈다. 본 연구에서는 아세틸 단위의 운반에 대한 새로운 추가적 제안으로써 지방 저장 종자의 발아와 오이 떡잎의 발달과 관련된 유전자의 발현을 통해 처음으로 확인하였다.
Arsenic exposure is associated with several human diseases, including cancers, atherosclerosis, hypertension, and cerebrovascular diseases. In cultured cells, arsenite, an inorganic arsenic com-pound, was demonstrated to interfere with many physiological functions, such as enhancement of oxidative stress, delay of cell cycle progression, and induction of structural and numerical changes of chromosomes. The objective of this study is to investigate the effects of arsenic exposure on gene expression profiles by colorimetric cDNA microarray technique. HFW (normal human diploid skin fibroblasts), CL3 (human lung adenocarcinoma cell line), and HaCaT (immortalized human keratinocyte cell line) were treated with 5 $\mu\textrm{M}$ or 10 $\mu\textrm{M}$ sodium arsenite for 6 or 16 h, respectively. By a dual-color detection system, the expression profile of arsenite-treated cultures was compared to that of control cultures. Several genes expressed differentially were identified on the microarray membranes. For example, MDM2, SWI/SNF, ubiquitin specific protease 4, MAP3K11, RecQ protein-like 5, and Ribosomal protein Ll0a were consistently induced in all three cell types by arsenite, whereas prohibitin, cyclin D1, nucleolar protein 1, PCNA, Nm23, and immediate early protein (ETR101) were apparently inhibited. The present results suggest that arsenite insults altered the expression of several genes participating in cellular responses to DNA damage, stress, transcription, and cell cycle arrest.
Transforming growth $factor-{\beta}$ ($TGF-{\beta}$)에 의해 유도되는 세포사멸 과정은 정상 조직에서 손상 받은 조직이나 비정상 적인 조직을 제거하는데 중요한 역할을 담당한다. Gadd45b는 p38 kinase를 활성화시킴으로 $TGF-{\beta}$에 의해 유도되는 세포사멸 과정을 매개한다고 알려져 있다. 본 연구에서는 $TGF-{\beta}$에 의해 세포사멸이 일어나는 EpH4 세포에서 Gadd45b 유전자의 발현이 $TGF-{\beta}$에 의해 촉진됨을 보여주었다. 어떠한 기작으로 $TGF-{\beta}$에 의해 Gadd45b 유전자의 발현이 촉진되는지 알아보기 위해 Gadd45g 유전자의 5'-flanking region을 cloning하였으며, EpH4 세포에서 $TGF-{\beta}$에 의해 그 promoter activity가 증가함을 확인하였다. 여러 가지 deletion mutants를 제조하여 promoter activity를 조사한 결과 전사 개시점으로부터 220 bp upstream 부위 에 promoter activity에 필수적인 sequence가 존재함을 확인하였다. 또한 $TGF-{\beta}$에 의한 Gadd45b 유전자의 promoter activity에 Smad2, Smad3, 그리고 Smad4가 중요한 기능을 담당함도 확인하였다. 마지막으로 ras 유전자가 도입되어 $TGF-{\beta}$에 의한 세포사멸이 억제되어있는 EpRas 세포에서 $TGF-{\beta}$에 의한 Gadd45b 유전자의 발현을 확인한 결과 EpRas 세포에서 $TGF-{\beta}$에 의한 Gadd45b 유전자의 발현이 억제됨을 확인하였다. 이러한 결과는 Gadd45b 유전자가 EpH4 세포에서 $TGF-{\beta}$에 의한 세포사멸을 유도하는데 중요한 기능을 담당할 가능성이 높음을 의미하는 것이다.
Jin Guang-Shi;Lee Jae-Hyo;Lee Jae-Hee;Lee Moon-Young;Kim Min-Sun;Jin Yuan Zhe;Song Jeong-Hoon;Park Byung-Rim
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제11권1호
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pp.1-7
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2007
Altered environmental gravity, including both hypo- and hypergravity, may result in space adaptation syndrome. To explore the characteristics of this adaptive plasticity, the expression of immediate early gene c-fos mRNA in the vestibular related tissues following an exposure to hypergravity stimulus was determined in rats. The animals were subjected to a force of 2 g (twice earth's gravity) for 1, 3, or 12 h, and were examined poststimulus at 0, 2, 6, 12, and 24 h. RT-PCR (reverse transcription polymerase chain reaction) and real-time quantitative RT-PCR were adopted to analyze temporal changes in the expression of c-fos mRNA. The hypergravity stimulus increased the expression of c-fos mRNA in the vestibular ganglion, medial vestibular nucleus, inferior vestibular nucleus, hippocampus, cerebellum, and cortex. The peak expression occurred at 0 h poststimulation in animals stimulated with hypergravity for 1 h, and at 6 h poststimulus in those stimulated for 3 h. In contrast, those stimulated for 12 h exhibited dual peaks at 0 and 12 h poststimulus. Bilateral labyrinthectomy markedly attenuated the degree of c-fos mRNA expression. Glutamate receptor antagonist also dramatically attenuated the degree of c-fos mRNA expression. These results indicate that expression of c-fos mRNA in response to hypergravity occurs in the vestibular related tissues of the central nervous system, in which peripheral vestibular receptors and glutamate receptors play an important role. The temporal pattern of c-fos mRNA expression depended on the duration of the hypergravity stimulus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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