• 제목/요약/키워드: Proliferation of splenolcyte and PBMC

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Alamar Blue 색소의 환원량 평가에 의한 급성기 반응중 육계병아리의 비장세포와 PBMC 증식도 측정 (Proliferation Assay of Splenocyte and PBMC by the Evaluation of Alamar Blue Dye Reduction Value in Broiler Chicks)

  • 임진택;박인경;고태송
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제49권2호
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    • pp.213-224
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    • 2007
  • 급성기 반응중인 가금의 비장세포와 PBMC 증식도를 alamar blue(alamar blue) 환원량으로 측정하기 위한 조건들을 조사하였다. 갓 부화한 육계병아리(Ross 종) 수컷에 기초사료를 급여하고, 9, 11 및 13일령에 각각 복강내 LPS를 주입으로 급성기 반응중인 14일령 육계병아리의 혈액에서 PBMC와 비장에서 비장세포를 분리하였다. alamar blue 환원량은 비장세포에서는 4, 24, 48, 96 및 120시간, PBMC는 4, 8, 12, 24 및 48시간에 그리고 웰당 103, 104 및 105개로 분배하고, 배양액 ml 당 0.0, 1.0, 5.0 및 10.0㎍의 Con A를 첨가하며, 배양액 중 2.5%의 자가혈청과 FBS를 첨가하여 측정하였다. 1.alamar blue 환원량은 배양시간의 경과(R2=0.825~1.000)에 따라 그리고, 세포수(R2= 0.999)의 증가에 따라 직선적으로 증가하였다.2. 급성기 반응중인 병아리에서, alamar blue 환원량은 대조구에 비해 비장세포는 24시간이후, PBMC는 4시간이후부터 105개의 세포접종시 유의하게(p<0.05) 높았다.3.급성기 반응중인 병아리의 비장세포와 PBMC에서 alamar blue 환원량은 Con A 농도에 관계없이 대조구에 비해 높았으며, 배양액 ml 당 Con A 1.0 또는 5.0 ㎍ 첨가에 비해 10.0㎍ 첨가시 유의하게(p<0.05) 높았다.4. 그리고, 배양액중 2.5%의 자가혈청은 급성기 반응과 관계없이 FBS에 비해 alamar blue 환원량을 유의하게 높였다. 본 연구는 alamar blue 환원량 평가에 의한 급성기 반응중인 가금의 비장세포와 PBMC의 증식도 측정에는 alamar blue 첨가 후 PBMC는 4시간, 비장세포는 24시간 배양, 세포수는 웰 당 105개, 그리고, Con A는 배양액 ml 당 10.0 ㎍이 적당하다는 것을 나타낸다.