• KSBB Journal
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• 제14권3호
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• pp.380-383
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• 1999

본 연구를 통하여 Rhodococcus erythropolis IGTS8은 배양증애 유기 황화합물인 dibenzothiophene을 2-hydroxybiphenyl로 탈황하며 이 과정에서 계면활성 물질을 분비함을 확인하였다. 생산된 계면활성제로 인하여 배지내의 탁도와 균체의 건조증량 사이에는 비례관계가 없음을 확인하였다. 인위적으로 Tween 80을 넣어준 결과 균체성장 속도, 즉 DBT 분해율은 증가되었으며 2%(v/v)이상의 Tween 80 농도에서는 오히려 저해 효과를 보았다.

• 한국축산식품학회지
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• 제25권2호
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• pp.232-237
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• 2005

락토페린은 트랜스페린 패밀리에 속하며, 철 결합성 당단백질로 대부분 포유동물의 젖에서 발견되고 있다 락토페린의 생리학적 기능으로는 항균활성, 항바이러스활성, 항염증반응, 항암효과, 세포의 성장과 항산화 효과 등이 알려져 있다. 본 연구는 PTip vector를 이용한 Rhodococcus erythropolis(R. erythropolis) 숙주로부터 재조합 젖소 락토페린과 락토페린 N-lobe의 생산을 시도하였다. 이들 단백질의 발현은 다양한 온도 범위에서 발현시켰다. 그리고 R. erythropolis의 숙주 내에서 이들 단백질의 발현은 낮은 온도 내에서도 가능함을 보여주었다. 생산된 재조합 단백질들은 Ni-NTA 정제 담체를 이용하여 정제하였다. 정제의 방법은 비변성 조건과 변성조건으로 수행하였다. 그리고 정제된 재조합 젖소 락토페린과 락토페린 N-lobe는 SDS-전기영동과 Western blot분석을 통하여 확인하였다. 생산된 재조합 젖소 락토페린은 분자량 80kDa, 그리고 락토페린 N-lobe가 43kDa의 분자량을 나타내었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제19권5호
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• pp.474-481
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• 2009

A novel microorganism, designated as LG12, was isolated from soil based on its ability to use acrylic acid as the sole carbon source. An electron microscopic analysis of its morphological characteristics and phylogenetic classification by 16S rRNA homology showed that the LG12 strain belongs to Rhodococcus erythropolis. R. erythropolis LG12 was able to metabolize a high concentration of acrylic acid (up to 40 g/l). In addition, R. erythropolis LG12 exhibited the highest acrylic acid-degrading activity among the tested microorganisms, including R. rhodochrous, R. equi, R. rubber, Candida rugosa, and Bacillus cereus. The effect of the culture conditions of R. erythropo/is LG12 on the production of 3-hydroxypropionic acid (3HP) from acrylic acid was also examined. To enhance the production of 3HP, acrylic acid-assimilating activity was induced by adding 1 mM acrylic acid to the culture medium when the cell density reached an $OD_{600}$ of 5. Further cultivation of R. erythropo/is LG 12 with 40 g/l of acrylic acid resulted in the production of 17.5 g/l of 3HP with a molar conversion yield of 44% and productivity of 0.22 g/l/h at $30^{\circ}C$ after 72 h.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제20권2호
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• pp.325-331
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• 2010

Rhodococcus erythropolis amidase was expressed in Escherichia coli cells. The crude amidase in the cell-free extract was immobilized using the cross-linked enzyme aggregate (CLEA) method. The crude amidase was mixed with bovine serum albumin and then precipitated with ammonium sulfate. The resultant precipitant was subsequently cross-linked with glutaraldehyde. Scanning electron microscopy revealed that this co-CLEA had a ball-like shape with a diameter of approximately $1\;{\mu}m$. This co-CLEA evidenced hydrolytic activity toward a variety of amide substrates. The amidase co-CLEA evidenced an optimum temperature of $60^{\circ}C$ and an optimum pH of 8.0, results that were similar to those of the soluble amidase. The reaction stability of the co-CLEA was increased. That is, it was stable up to $50^{\circ}C$ and in a pH range of 5.0-12.0. Additionally, the co-CLEA could be recovered by centrifugation, and retained 96% activity after 3 repeated cycles. This amidase co-CLEA may prove useful as a substitute for soluble amidase as a biocatalyst in the pharmaceutical and chemical industries.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제34권3호
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• pp.204-210
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• 2006

각종 니트릴 화합물은 키랄 의약품의 합성에 사용되는 유용한 중간체이다. 본 연구에서는 토양 분리균 중에서 4-chloro-3-hydroxy butyronitrile(CHBN)기질로부터 고지혈증 치료제인 Atorvastatin을 합성하는 데에 필요한 4-chloro-3-hydroxy butyric acid(CHBAc)를 생성하는 균주 2종류를 선발하였다. 16S rRNA 분석을 통해서 균 동정을 수행한 결과, 모두 Rhodococcus erythropolis에 속하는 것으로 밝혀졌으며, TLC 분석 결과로부터 CHBN 기질을 분해하는 효소는 니트릴 히드라타아제(NHase)와 아미다아제(amidase)인 것으로 추정되었다. 분리균의 CHBN 분해효소는 ${\varepsilon}$-카프로락탐에 의해서 발현이 유도되었으며, 균체와 세포 추출액에서 모두 기질 분해활성을 나타났다. 기존에 보고된 효소의 유전자 염기서열로부터 프리머를 제조하고 PCR을 수행함으로써 분리균으로부터 니트릴 히드라타아제와 아미다아제 유전자를 확보하게 되었다. 발굴된 유전자의 염기서열을 분석한 결과, 이미 보고된 Rhodococcus erythropolis의 니트릴 히드라타아제 ${\alpha}$-서브유니트과 ${\beta}$-서브유니트 및 아미다아제와 96% 이상의 상동성을 보였다. 따라서 CHBN기질은 분리균의 니트릴 히드라타아제와 아미다아제 효소에 의해서 아미(CHBAm)를 거쳐 산(CHBAc)으로 전환되는 것을 알게 되었다.

• 상하수도학회지
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• 제18권6호
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• pp.724-730
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• 2004

Effects of the biosurfactant produced by Rhodococcus erythropolis on the solubilization and biodegradation of phenanthrene were investigated. Based on surface tension measurements, the average critical micelle concentration of the biosurfactant was estimated to be about 16mg TOC/L. The apparent solubility of phenanthrene increased linearly with the addition of biosurfactants above the CMC, and the concentration of solubilized phenanthrene was 38.9mg/L in 322mg TOC/L biosurfactant solution. The weight-solubilization ratio of biosurfactants for phenanthrene was approximately 118.8mg/g, this value was over 5 times greater than that of sodium dodecyl sulfate. Using a known phenanthrene degrader, batch phenanthrene biodegradation experiments were conducted with and without biosurfactants in liquid culture. The rate and extent of phenanthrene mineralization by the phenanthrene degrader with biosurfactants were much greater than those without biosurfactants. The greater phenanthrene mineralization observed in the presence of biosurfactants is attributed to the increased phenanthrene concentration in the aqueous culture due to the partitioning of the compound to biosurfactant micelles. The biosurfactant did not exhibit any toxic effect on mineralization of glucose by the phenanthrene-degrader.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제18권3호
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• pp.552-559
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• 2008

Ethyl (S)-4-chloro-3-hydroxybutyrate is an intermediate for the synthesis of Atorvastatin, a chiral drug used for hypercholesterolemia. A Rhodococcus erythropolisstrain (No.7) able to convert 4-chloro-3-hydroxybutyronitrile into 4-chloro-3-hydroxybutyric acid has recently been isolated from soil. This activity has been regarded as having been caused by the successive actions of the nitrile hydratase and amidase. In this instance, the corresponding amidase gene was cloned from the R. erythropolis strain and expressed in Escherichia coli cells. A soluble active form of amidase enzyme was obtained at $18^{\circ}C$. The Ni column-purified recombinant amidase was found to have a specific activity of 3.89 U/mg toward the substrate isobutyramide. The amidase was found to exhibit a higher degree of activity when used with mid-chain substrates than with short-chain ones. Put differently, amongst the various amides tested, isobutyramide and butyramide were found to be hydrolyzed the most rapidly. In addition to amidase activity, the enzyme was found to exhibit acyltransferase activity when hydroxyl amine was present. This dual activity has also been observed in other enzymes belonging to the same amidase group (E.C. 3.5.1.4). Moreover, the purified enzyme was proven to be able to enantioselectively hydrolyze 4-chloro-3-hydroxybutyramide into the corresponding acid. The e.e. value was measured to be 52% when the conversion yield was 57%. Although this e.e. value is low for direct commercial use, molecular evolution could eventually result in this amidase being used as a biocatalyst for the production of ethyl (S)-4-chloro-3-hydroxybutyrate.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제15권5호
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• pp.1135-1139
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• 2005

Psychrotrophic phenanthrene-degrading bacteria were identified in the sediment samples collected from Lake Baikal, Russia. Among 70 phenanthrene-degrading isolates, the seven that had the highest phenanthrene-degradation rates were identified by 16S rDNA sequencing. Isolate P25, identified as the Gram-positive rod-shaped organism Rhodococcus erythropolis, had the highest growth and degradation rate at $15^{\circ}C$. It could remove $26.0\%$ of 100 mg $1^{-1}$ phenanthrene in 20 days at $15^{\circ}C$, and degradation was less at $5^{\circ}C\;and\;25^{\circ}C$. The addition of surfactants to enhance degradation was tested. Brij 30 and Triton X-100 inhibited degradation at all surfactant concentrations tested, but Tween 80 stimulated phenanthrene degradation, especially at low concentrations. When $20{\times}$ CMC (critical micelle concentration) of Tween 80 was added, $38.0\%$ of 100 mg $1^{-1}$ phenanthrene was degraded in 12 days at $15^{\circ}C$. This psychrotrophic phenanthrene-degrading bacterium is a candidate for use in bioremediation of polycyclic hydrocarbon contamination in low temperature environments.

• 대한환경공학회지
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• 제32권12호
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• pp.1141-1146
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• 2010

상수공급계 모래여과수에 존재하는 종속영양 호기성 세균을 NA 및 TSBA 고체배지로 분리하고 군체의 형태 및 색체로 구분 정량하여 우점종 8종을 선정, 정제하고 Sherlock System으로 동정하였다. 이들 각 종류의 세균에 대하여 액체배양한 후 세정하여 $10^6{\sim}10^7\;cells/mL$ 증류수 현탁액을 조제하여 CBD 중압 자외선 램프로 0, 5, 16, 40, $60\;mJ/cm^2$ 조사량으로 조사한 후 희석, 평판배지에 접종 배양하여 생존 세균농도를 정량하여 불활성화율을 평가하였다. Gram 양성균으로 Bacillus subtillis, Bacillus megaterium, Rhodococcus erythropolis, Microbacterium laevaniformans 등이 Gram 음성균으로 Pseudomonas pseudoflava, Pseudomonas vesicularis, Alcaligenes paradoxus, Zooglea ramigera 등이 동정되었다. 분리된 세균종들은 중압 자외선 조사에 높은 저항성을 나타내었으며, 표준균주보다 강하였다. 또한 Gram 양성세균이 Gram 음성세균에 비해 월등히 강한 내성을 나타내었다. 중압 자외선 램프를 상수처리장의 소독목적으로 도입할 경우 $60{\sim}100\;mJ/cm^2$의 조사량으로 높여 조사하여야 할 것으로 판단된다.

• 한국환경농학회지
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• 제31권2호
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• pp.185-191
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• 2012

본 연구에서는 산업폐수로부터 분리한 3가지 종의 인 제거율을 확인하였다. 3 가지 분리된 균을 동정한 결과 A1균은 Stenotrophomonas maltophilia strain CUPS 3, A2균은 Rhodococcus erythropolis strain Sco-C01, A3균은 Bacillus sp. 3434BRRJ이었다. 3 가지 분리된 균의 인 제거 및 경유분해를 확인한 결과 인 제거율은 Bacillus sp. 3434BRRJ > Stenotrophomonas maltophilia strain CUPS균 > Rhodococcus erythropolis strain Sco-C01균 순으로 높은 것으로 나타났으며 제거율은 약 99%, 50%, 20%로 확인되었다. 따라서 이 후 실험은 인 제거율이 가장 높았던 Bacillus sp. 3434BRRJ를 가지고 실험하였다. Bacillus sp. 3434BRRJ의 인 제거를 확인하기 위하여 온도별(15, 25 그리고 $30^{\circ}C$), 인 농도별(20, 30 그리고 40 mg/L) 그리고 산소조건(호기, 혐기/호기조건) 및 탄소원을 달리하여 실험하였다. 그 결과Bacillus sp. 3434BRRJ는 $30^{\circ}C$에서 인 제거가 가장 좋았으며 20 mg/L의 인은 약 99% 처리하였고 혐기조건을 거치고 탄소원으로 acetate와 glucose를 혼합하여 처리하였을 때 가장 효율이 좋은 것으로 나타났다. 본 연구에서는 Bacillus sp. 3434BRRJ의 인 제거를 확인 하였다. 균의 생장이 높을수록 인의 제거율은 높았으며, 미생물을 이용한 환경오염물질의 제거에 있어서 가장 중요한 것은 미생물의 활성을 높이는 환경조건을 제공하는 것이다.