• KSBB Journal
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• 제13권3호
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• pp.308-311
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• 1998

A novel process was developed to simultaneously produce invertase and yeast extract from baker's yeast using ultrafiltration (UF) and microfiltration (MF) membrane processing. After the extraction of invertase under the optimal condition obtained in this study, invertase was separated from yeast cells using a hollow fiber membrane with a pore size of 0.1 $\mu\textrm{m}$. The resulting permeate containing invertase was concentrated using a hollow fiber membrane with a nominal molecular weight cut-off of 30 kDa. The yeast cell and permeate solutions, which were obtained after MF and UF membrane processing, respectively, were mixed together, and the autolysis was performed at 50$^{\circ}C$ in the presence of 5% (w/v) ethanol and 1% (w/v) NaCl. As a result, the yeast extract and invertase could be simultaneously produced from baker's yeast by this novel process.

• 한국식품영양학회지
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• 제2권2호
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• pp.8-13
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• 1989

A strain of Saccharomyces cerevisiae BY-366 was found to produce a strong sucrose-hydrolyzing enzyme Using this strain, the optimal culture conditions for the production of invertase were investigated. The results are as follows : 1. For enzyme production, optimal temperature, initial pH and critical concentrations of sucrose and raffinose were 3$0^{\circ}C$, 5.0 and 3.0%, respectively. 2. Enzyme production was reached maximum by organic nitrogen source, 0.3% yeast extract plus 0.5% bactopeptone. 3. It was appeared the presence of 0.1 M Mn2+ and Fe2+ ion was essential factors, on the other hand, 0.1 M Ag+ and Hg2+ ion almost block in yeast growth and enzyme production. 4. Invertase productivity was reached maximum within 3 days on stationary culture with medium-composed of sucrose 3%, bactopeptone 0.5%, yeast extract 0.3%, KEHPO. 0,1%, MgSO4.7H2O 0.05%.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권4호
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• pp.417-421
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• 1992

Sucrose에 의한 재조합 Saccharomyces cerevisiae의 invertase 생성 양성을 이단계 배양을 통하여 관찰하였다. 포도당 배지에서 SUC2 유전자의 발현이 억제된 상태에서 발현배지의 sucrose 농도가 2$g/\ell$일 경우 invertase 최대 비역가는 10 units로 5$g/\ell$보다 40% 향상된 값을 보여주었다. 발현배지에서의 당의 농도변화와 invertase 발현은 서로 대응관계가 있음을 발견하였다. 초기에는 SUC2 유전자가 발현되어 invertase가 생성 분비되어서 배지중 sucrose를 포도당과 과당으로 분해하였다. 분해된 포도당의 농도가 2$g/\ell$ 이상이 되면 invertase 생성은 다시 억제되었다. 동시에 미생물에 생육에 의해 포도당 농도가 2$g/\ell$이하로 감소되면서 다시 invertase 생성이 유도되었다. 이러한 현사은 5$g/\ell$의 sucrose 배지에서 더욱 현저하게 관찰 할 수 있었다. 발현배지의 온도를 $35^{\circ}C$증가시켰을 경우 invertase 생성은 $30^{\circ}C$보다 약 1.7배만큼 증가하였다.

• 한국식품영양학회지
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• 제2권2호
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• pp.14-20
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• 1989

A strain of Saccharomyces cerevisiae BY-366 was isolated to produce a strong sucrose-hydrolyzing enzyme. After entrapment of yeast cell invertase with alginate, enzymatic properties of immobilized cells were investigated. The results are as follows. 1. The optimum pH of invertase in immobilized cells and non- immobilized cells was 6.0 and 5.0, and pH stability of invertase in immobilized cells and non- immobilized cells was 6.0 and 5.0, respectively. 2 Activation energy of immobilized cells was 4.7 kcal/mol. 3 The immobilized preparation exhibited high resistance to heat and urea Induced denaturation. 4, The bead size less than 2 mm in diameter was desirable. 5. In spite of repeated use, the enzyme activity of immobilized cells was inhibited slightly in batch reaction, and a small column of the immobilized preparation could hydrolyze relatively high concentration of sucrose almost quantitatively to more than 6 days.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제34권4호
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• pp.318-322
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• 2006

알칼리와 고온에 대한 내성을 가진 invertase를 대량생산하기 위하여 호알칼리성이며 고온성 세균인 Bacillus sp. TA-11의 세포내 invertase유전자를 pUC 19벡터를 이용하여 E. coli HB101에 클로닝 시키고 발현시켜 invertase를 강력하게 생산하는 재조합 E. coli (pYC17)를 얻었다. 재조합 E. coli(pYC17)를 이용한 invertase 생산 최적조건을 검토한 결과 E. coil(pYC17)를 0.25% sucrose, 0.5% yeast extract, 0.1% $K_2HPO_4$와 0.1% $KH_2PO_4$을 함유한 SY배지(초기 pH 9.0)에 접종하여 37$^{\circ}C$에서 9시간 배양하였을 때 친주보다도 많은 47.7 U/ml-cell free extract의 invertase가 생산되었다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제21권6호
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• pp.725-730
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• 1992

이담자 효모균 Rhodosporidium toruloides의 mating type A 세포에서 세포내 invertase를 정제하였다. 세포내 invertase는 배양 세포의 파쇄액을 산침전 시킨 후 그 상등액으로부터 DEAE-Sephadex A-50, SP-Sephadex C-50 column chromatography와 Sephadex G-200 gel fitration 등의 과정을 거쳐 polyacrylamide gel disc 전기영동상 단일 효소 단백질까지 정제되었다. 정제효소의 분자량은 gel filtration에 의하여 90,000이었고, SDS-PAGE상에서는 22,000 dalttons에서 단일 band를 보여 단일종의 subunit가 4개로 구성된 단백질로 추정된다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제19권6호
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• pp.577-582
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• 1990

Aspergillus niger로 부터 invertase 생성의 최적조건과 생성된 효소의 특성을 조사하였다. 곰팡이는 탄소원으로 inulin과 sucrose를, 질소원으로 yeast extract를 사용했을 때 최대효소 생성을 얻을 수 있었다. 또한 사용한 배지의 pH를 4.5, 배양온도를 3$0^{\circ}C$로 유지했을 때 효소생성이 높았다. 효소 활성을 위한 최적조건은 pH 5.0 및 5$0^{\circ}C$였다. 효소는 pH 6.0에서 가장 안정했으며, 또한 5$0^{\circ}C$이하에서 안정하였다. 효소는 Hg++, Ag+ 및 Cu++ 이온의 첨가에 의하여 불활성화 되었다.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제2권3호
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• pp.250-254
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• 1997

The internal invertase of Rhodosporidium toruloids mating type a cells was purified to a single band on SDS-PAGE from cell-free extract by acid precipitation, ion exchange chromatogaphy andgel filtration. The determined molecular weight of he purified enzyme was about 95,000 by gel filtration and 100,000 daltons on SDS-polyacryamide gel electrophoresis. This enzyme didn't show any activity change by several metal ions except 15.4% decrease by {TEX}$Mn^{2+}${/TEX} and was strongly inhibited by 2-mercaptoethanol and SDS. The invertase maintained its activity at high level until 70℃, but inactivated at 80℃ almost completely. The optimal temperature and pH of the enzyme were about 60℃ and pH 5.0, respectively. The stable pH range of invertase was narrow from pH 3.0 to 6.0. The Km value and isoelectric point of enzyme were 3.4×{TEX}$10^{3}${/TEX} M, pH 4.4, respectively.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제20권6호
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• pp.625-629
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• 1992

서로 다른 성접합형 A와 a를 가지는 Rhodosporidium toruloides가 생산하는 invertase를 조사한 결과, 접합형 A는 세포내, 세포벽 결합, 세포의 분비성 invertase의 3가지를 생산하였으나, 접합형 a는 세포외 invertase를 생산하지 않는 접합형 특이성이 있는 것을 알았다. 양 접합형 세포로부터 세포내 invertase를 부분정제하여 이들의 성질을 비교한 결과, 접합형 A세포 유래의 효소는 $Zn^{2+}$에 의하여 11의 활성 상승효과와Mn^{2+}$에 의한 42.2%의 감소를 보이는 반면, a세포 유래의 효소는 $Mn^{2+}$에 의한 15의 활성 감소만을 보였다. 효소 저해제의 효과에서 a세포의 invertase는 2-mercaptoethanol, sodium dodecyl sulfate, pheonl에만 약간 저해를 받을 뿐이었다. 이들 양 효소의 열안정성은 모두 $80^{\circ}C$ 이상에서 급격히 실활되는 양상을 보였으며 최적 온도가 $60^{\circ}C$로 둘다 비슷하였다. a세포 유래의 invertase는 pH 3에서 pH 10까지 넓은 pH의 범위에서 안정하며 최적 pH가 4.0인반면, A 세포의 invertase는 pH 3에서 pH 6까지 산성의 조건에서만 안정하였으며 최적 pH는 5.0으로 나타났다.그리고, A 세포와 atpvh 유래 invertase의 $K_m$값은 각각 $2.5{\times}10^3$M 과 $3.4{\times}10^3$M과 이였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권4호
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• pp.368-375
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• 1990

세포내 및 세포벽 뿐만 아니라, 세포외에도 invertase를 구성적으로 생산하는 효모 Rh.glutinis K-24로 부터 세포외 invertase를 disc 전기 영동상으로 단일한 상태로까지 정제하였다. 정제 효소의 효소화학적 성질을 밝힌 후 이미 보고한 바 있는 세포내 및 세포벽 invertase와 그 개락적 성질을 비교 검토하였다.