Aflatoxins are highly carcinogenic agents consistantly found as contaminants in human food supplies in many areas of the world and epidemiologically linked to incidence of human liver cancer. To examine the carcinogenic action of aflatoxin $B_1$, aflatoxin $B_1-DNA$ adducts were chemically synhtesized with the reaction of 20 mg calf thymus DNA, and 8 mg standard aflatoxin $B_1$. Since DNA molecule was too large for analysis, it was fragmented by acid hydrolysis and heat. The fragmented aflatoxin $B_1-DNA$ adducts were selectively concentrated by immunoaffinity column procedure and confirmed by HPLC method. The main component was aflatoxin $B_1-guanine$ adduct, which was quantatively measured as 5.2 mg aflatoxin $B_1$.
Cytotoxic and genotoxic potential of monosodium glutamate (MSG) were evaluated in primary cultures of rat hepatocytes. When exposed to liver cell culture continuously for 24 hr, MSG did not show any cytotoxic effects up to 0.5% (w/v) level as determined by Tryphan Blue exclusion and lactic dehydrogenase release test. MSG also did not induce unscheduled DNA synthesis or DNA single-strand breaks in hepatocyte cultures up to 1% level. No synergistic effects of MSG were observed on aflatoxin B$_1$-induced DNA damage when 1% MSG was treated to liver cell culture along with aflatoxin B$_1$.
24 samples which were incoulated with Aspergillus flavus and Bcillus subtilis and cultured on the steamed soybean media under various conditions-pH, moisture and temperature were-investigated on the production of aflatoxin by the interaction of these two microorganisms. 1) The amount of aflatoxin produced by mixed cultures of Aspergillus flavus and Bacillus subtilis was decreased significantly rather than that of single cultures of Aspergillus flavus. 2) Maximum production of crude aflatoxin was 2,560 ppm $(B_1,\;0.908\;ppm;\;B_2,\;0.261\;ppm;\;G_1,\;1.162\;ppm;\;G_2,\;0.229\;ppm)$ at 30% moisture, pH 5.0 and $20^{\circ}C$, whereas minimum production was 1.107 ppm $(B_1,\;0.341\;ppm;\;B_2,\;0.104\;ppm;\;G_1,\;532\;ppm;\;G_2,\;0.130\;ppm)$ at 63% moisture, pH 9.0 and $40^{\circ}C$.
This study is an endeavor to evaluate the risk assessment of hazardous(aflatoxin $B_1$) in medicines from oriental medical prescription which are circulated much recently. For that, twelve globular and granule types, seven liquid types of herbal medicine were bought to compare and analyze the content of aflatoxin aflatoxin B_1), which are harmful to human body. Woo Hwang Cheong Sim Hwan of Aflatoxin $B_1$ concentration lower than the standard accepted by all the products have been detected, B company(tradition) is the concentration of $1.24\;{\mu}g/kg$, C company $1.04\;{\mu}g/kg$, A company(tradition) and B company did not detect. And the general pill of aflatoxin B1 concentration lower than the standard accepted by all the products have been detected, S-1 is the concentration of $1.8\;{\mu}g/kg$, S-2 of $1.04\;{\mu}g/kg$, S-3 of $0.88\;{\mu}g/kg$, S-4 of $9.32\l\;{\mu}g/kg$, S-6 of $7.8\;{\mu}g/kg$, S-5 did not detect. All the products eundan allowed in the concentration of aflatoxin $B_1$ levels were lower than detection, D company of $0.96\;{\mu}g/kg$, E company concentration was not detected. The liquid product of aflatoxin $B_1$ concentration was found liwer than the standard accepted by all the product, L-3 concentration of $0.8\;{\mu}g/kg$, K-4 was detected in the $1.16\;{\mu}g/kg$, L-1 and L-2 is not detected, L-5 concentration of $15\;{\mu}g/kg$, L-7 is detected as $1.08\;{\mu}g/kg$ and, L-6 was not detected.
In order to investigate the production of aflatoxin in various conditions such as pH, moisture and temperature, 27 smaples were inoculated with Aspergillus flavus, and in addition 3 smaples were inoculated with the mixture of Aspergillus flavus and Bacillus subtilis and cultured under the conditions such as $20^{\circ}C$ and 30% moisture contents. The following results were obtained : 1) Aflatoxin production was the highest at pH 5.0 and relatively high at pH 7.0. Its production was decreased significantly when pH reached 9.0. 2) The yield of aflatoxin was shown comparatively high level at 30% moisture contens. The higher moisture contents was, the lower aflatoxin production was. 3) The highest level of aflatoxin production was at $20^{\circ}C$, and comparatively high level was at $30^{\circ}C$. However, its production was fairly low at $40^{\circ}C$. 4) The highest crude aflatoxin production was 5,093ppm $(B_1,\;1.912\;ppm;\;B_2,\;0.521\;ppm;\;G_1,\;2.119\;ppm;\;G_2,\;0.541\;ppm)$ at 30% moisture, pH 5.0 and $20^{\circ}C$ and the lowest one 2.197 ppm $(B_1,\;0.793\;ppm;\;B_2,\;0.185\;ppm;\;G_1,\;0.102\;ppm;\;G_2,\;0.381\;ppm)$ at 63% moisture, pH 9.0 and $40^{\circ}C$ 5) When Aspergillus flavus and Bacillus subilis were cultured together under the conditions such as $20^{\circ}C$ and 30% moisture, aflatoxin production was decreased by 27% comparing with the culture of Aspergillus flavus alone.
For a survey of the occurrence of aflatoxin M$_{1}$ (AFM$_{1}$) in domestic cow's milk, we developed an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) system, and quantitated the toxin in cow's milk. In order to produce specific antibodies AFM, conjugated to bovine serum albumin (AFM$_{1}$-BSA) and Freund's adjuvant were immunized subcutaneously to rabbits. By use of the antiserum showing the highest titer and AFB$_{1}$-HRP conjugate, we established a competitive direct ELISA (cdELISA) for AFM$_{1}$, whose detection limit was 0.003 ppb. The cross-reactivities of the antiserum against aflatoxin M$_{1}$ M$_{2}$, B$_{1}$, B$_{2}$, G$_{1}$, G$_{2}$, B$_{2a}$, and G$_{2a}$, were 100, 29.9, 25.0, 2.7, 13.0, 0.65, 0, and 0%, respectively. When the cdELISA was applied to the cow's milk spiked with AFM$_{1}$ and followed by cleanup with C$_{18}$ cartridge, the mean recovery of the assay was 104% (mean of CV, 6.4%) in the final concentration of 0.01-1 ppb (10-1, 000 ppt). When cow's milk samples gathered from markets and farms were assayed by the cdELISA, the mean concentration and SD of AFM$_{1}$ was 80.4 $\pm$ 55.0 ppt (n=64; range, 5.6-280 ppt).
The objective of this study was to examine the effects of steam flaking treatment of corn grains imported from USA and India on in vitro gas production, microbial growth and contents of aflatoxin $B_1$ and ochratoxin A. Each treatment was composed of total 4 treatments including (1) USCW (US com-whole type), (2) USCF (US corn-flaked type), (3) IDCW (India corn-whole type) and (4) IDCF (India orn-flaked type) with 4 replications $\times$ 6 incubation times (3, 6, 9, 12, 18 and 24 hr). Mycotoxin (aflatoxin $B_1$ & ochratoxin A) contents in test corns tended to increase gradually with increasing logistics periods from the harbor, hopper, silo to processing line. The contents of aflatoxin $B_1$ in India corn (IDCW) and US corn (USCW) were 11.71 and 1.78 ppb, respectively when measured at the hopper. After steam flaking, both contents of aflatoxin $B_1$ in USCW and IDCW were 0.00 ppb. It means that Aspergillus flavus could be decreased by steam flaking. However, this trend was not observed in ochratoxin content. The gas production rate of USA corns (USCW & USCF) was significantly (p<0.05) higher than India corns (IDCW & IDCF), and that of steam flaked corns (USCF & IDCF) was higher $1.5{\sim}2%$ than whole corns (USCW & IDCW) after 3 hr incubation in in vitro experiment. pH value was optimally maintained for microbial growth during whole incubation times with the value of 6.05 to 6.54, and was not significantly different between treatments, but USCF was somewhat lower than other treatments. pH value decreased following 12 hr of incubation but gas production increased rapidly during the same period. In addition, in vitro microbial growth rates also increased with up to 18 hr of incubation period, thereafter experienced a decrease with extended incubation time. In conclusion, US corn was superior to India corn by origin based on the results of in vitro and mycotoxin contents. And steam flaking process of imported corns tended to decrease mycotoxin contents such as aflatoxin $B_1$ and ochratoxin A as well as improve in vitro gas production and microbial growth rates.
Lee, Sung Deuk;Yu, In Sil;Jung, Kweon;Kim, Yeon Sun
Mycobiology
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v.42
no.4
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pp.339-345
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2014
During 2011~2013, a total of 729 samples for 19 types of medicinal plant were collected from Seoulyekryungsi in Seoul, Korea, and investigated for the presence of aflatoxins. The samples were analyzed using immunoaffinity column cleanup and high-performance liquid chromatography coupled to a fluorescence detector after post-column derivatization. Aflatoxins were found in 124 out of the 729 analyzed samples: 65 containing aflatoxin B1 (AFB1), 24 with aflatoxin B2 (AFB2), 15 with aflatoxin G1 (AFG1), and 20 samples with aflatoxin G2 (AFG2). The ranges for positive samples were $0.1{\sim}404.7{\mu}g/kg$ for AFB1, $0.1{\sim}10.0{\mu}g/kg$ for AFB2, $0.1{\sim}635.3{\mu}g/kg$ for AFG1, $0.1{\sim}182.5{\mu}g/kg$ for AFG2, and $0.1{\sim}1,043.9{\mu}g/kg$ for total aflatoxins. Most of the medicinal plant samples (721, 98.9%) were below legal limits, but 8 samples exceeded the legal limits of 10 and $15{\mu}g/kg$ established by the Korean standard for AFB1 and total aflatoxins (the sum of AFB1, AFB2, AFG1 and AFG2), respectively.
Daily exposure of aflatoxin B1 (AFB1) was estimated in foods (rice, barley, soybean, peanut, soysauce, soybean paste) by ELISA (enzyme linked immunosorbent assay) using polyclonal antibody R101. Before ELISA, a simple extraction method was applied for the quantitation of AFB1 in foods using chloroform which showed high recovery (70$\pm$12%). AFB1 levels in foods were 0.32 ng/ml (rice), 0.24ng/ml (barley), 0.22 ng/ml (peanut), 0.30~0.78 ng/ml (soysauce), and 0.2 ng/ml (soybean paste). Based on food consumption, we estimated that Koreans were exposed to AFB1 at the level of 1.86$\pm$0.46 ng/kg/day and liver cancer incidence attributed to AFB1 exposure (assuming that AFB1 as a single hepatocarcinogenic agent) might be calculated to be 13.1 per 100, 000 population. Our data demonstrate that AFB1 levels in foods were below the regulation of 10 ppb in foods and might not be the major risk factor for the high incidence of lover cancer in Korea.
Chand, N.;Muhammad, Din;Durrani, F.R.;Qureshi, M. Subhan;Ullah, Sahibzada S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.24
no.7
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pp.1011-1018
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2011
Aflatoxin-contaminated feed cause mortality, suppression of the immune system, reduced growth rates and losses in feed efficiency. This research study was planned to investigate the immunomodulatory and growth promoting effect of milk thistle as feed additive against aflatoxin $B_1$ in broiler chicks at NWFP Agricultural University Peshawar, Pakistan. Two hundred and forty (240) day old broilers chicks were randomly assigned into four major groups AfF, aflatoxin free feed; Aflatoxin $B_1$ was present in the feed at the levels of 80-520 ${\mu}g/kg$ of the feed in the remaining three groups. Aflatoxin contaminated feed was provided for 5 weeks. Group AfB was supplemented with toxin binder "Mycoad" at 3 g/kg of feed and group AfT was supplemented with milk thistle at10 g/kg of feed. Each group was further sub divided into two sub-groups, vaccinated against ND (Newcastle disease), IB (Infectious bronchitis) and IBD (Infectious bursal diseases) according to recommended schedule of vaccination or non vaccinated. Each sub group carried three replicates with 10 chicks per replicate. Chicks were reared in pens in an open sided house. Supplementary heat was provided to all the chicks during brooding period. Mean body weight gain and dressing percentage were significantly (p<0.05) higher in group AfF, followed by AfT, AfB and Af. Weight gain and dressing percentage was the same in group AfB and AfT, while it was significantly lower in group Af. Feed intake, breast, thigh and leg weight were found significantly (p<0.05) higher in group AfF, followed by AfB, AfT and Af. Significantly lower (better) FCR value was recorded in group AfT. Water intake was significantly (p<0.05) higher in group AfT and AfF as compared to other groups. Mortality was significantly (p<0.05) higher in group Af. Mean bursa and thymus weights were found significantly (p<0.05) higher in group AfF, AfB and AfT followed by Af, while higher spleen weight was recorded in group AfT. Mean antibody titer against ND, IB and IBD was significantly (p<0.05) higher in group AfT, as compared to other groups. It is concluded that milk thistle at 10 g/kg of feed could effectively be utilized as immunostimulant and growth promotant in the presence of immunosuppressant aflatoxin $B_1$ in the feed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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