Seven gtrains of Lactobacillus produce bacteriocin being active for Lacidophilus. All strains producing bacteriocin were found to be L. acidophilus except with one strain of L. gasseri. The maximum activity of bacteriocin produced by Lactobacillus strains was obtained at a middle or late stage of the log phase, or a early stage of the stationary phase. After the maximum was reached, however, the activity was rapidly decreased. The bacteriocins were inactivated easily by the treatment with proteolytic enzymes but not with nucleolytic enzymes, suggesting that the bacteriocin was proteinaceous. The bacteriocins were different from the other previously reported lactobacillus bacteriocin in their flexibility to the treatment at 10$0^{\circ}C$. Bacteriocins of L. acidophilus ATCC 9857 and 4357 decreased in activity by the treatment with diethylether, presumably the bacteriocin contained of a lipid component. It sums likely that L. acidophilus A4 bacteriocin adsorb to a regularly arrayed layer of the cell wall.
Kim, Sung-Koo;Lee, Eun-Ju;Park, Keun-Young;Jun, Hong-Ki
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.8
no.6
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pp.588-594
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1998
Lactic acid bacteria were isolated from Kimchi and screened for bacteriocin production. Strain SE1, identified as Lactobacillus curvatus sp., showed the strongest inhibitory activity against Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii. The bacteriocin was inactivated by amyloglucosidase, trypsin, or protease K treatment. However, it maintained its activity under heat treatment at $100^{\circ}C$ for 60 min. The production of the bacteriocin had a growth-related mode and decreased around the early-stationary phase. The optimum temperature for the growth of L. curvatus SE1 was $37^{\circ}C$; however, the optimum temperature for bacteriocin production was $30^{\circ}C$. The bacteriocin activity was decreased by treatment with methanol, butanol, acetone, or chloroform, however, it was not affected by treatment with ethanol, iso-propanol, or cyclohexane. The inhibitory activity of bacteriocin was stable over a wide range of pHs (2 to 11). The bacteriocin from L. curvatus SE1 killed the indicator strain by a bactericidal mode of action. The bacteriocin from L. curvatus SE1 was partially purified by ethanol precipitation and ion exchange chromatography. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis was used to determine the molecular weight of the bacteriocin by the bacteriocin activity test. The apparent molecular mass of the bacteriocin produced by L. curvatus SE1 was about 14 kDa.
A bacteriocin-producing strain, J-105, was isolated from Kimchi and identified as Lactococcus sp. The optimum conditions for the bacteriocin production from the isolated microorganism were evaluated. For maximum yield of bacteriocin from Lactotoccus sp. J-105, the cell should be harvested at the early stationary phase and temperature, pH and NaCl concentration should be $25^{\circ}C$, pH 8.0 and without the addition of NaCl, respectively. Maltose should be used as a carbon source and organic nitrogen such as polypeptone should be used as a nitrogen source for the best yield. The bacteriocin from isolate was inhibitory against Acetobacter aceti, Bacillus subtilis and several strains of lactic acid bacteria. The bacteriocin of J-105 was sensitive to pepsin, but stable for heat treatment. It was stable even at autoclaving temperature for 15 min.
Leuconostoc sp. LAB145-3A isolated from kimchi produced a bacteriocin which was active against food pathogens, such as Listeria monocytogenes, Enterococcus faecalis, and E. faecium. Bacteriocin production occurred during the early exponential phase of growth and was stable upto the late stationary phase of growth. Optimum conditions for bacteriocin production were $37^{\circ}C$ with an initial pH of 7.0. The bacteriocin of LAB145-3A was sensitive to proteases, but stable for solvents, pH change and heat treatment. It was stable even at autoclaving temperature for 15 min. The bacteriocin exhibited a bactericidal mode of action against Lactobacillus curvatus LAB170-12. The bacteriocin produced by Leuconostoc sp. LAB145-3A was purified by CM-cellulose cation exchange column chromatography and Sephadex G-50 gel filtration. The purification resulted in an approximate 10,000-fold increase in the specific activity. Approximately 4% of the initial activity was recovered. Purified bacteriocin exhibited a single band on the SDS-PAGE with an apparent molecular weight of 4,400 daltons. This bacteriocin was named leucocin K. Leuconostoc sp. LAB145-3A had two residential plasmids with molecular sizes of 23 kb and 48 kb. A comparison of plasmid profiles between LAB145-3A and its mutants revealed that the 23 kb plasmid (pCA23) was responsible for bacteriocin production and immunity to the bacteriocin in Leuconostoc sp. LAB145-3A.
Jo, Young-Bae;Cho, Young-Im;Baik, Hyung-Suk;Jun, Hong-Ki
Journal of Life Science
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v.6
no.4
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pp.270-277
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1996
Streptococcus sp J-C1 producing bacteriocin was isolated from Kimchi. The optimum conditions for bacteriocin production by Streptococcus sp. J-C1 were evaluated. For the maximum yield of bacteriocin production by Streptococcus sp. J-C1, the cell should be harvested at the late stationary phase and the temperature, pH and NaCl concentration should be 25$\circ$C, pH 8 and without the addition of NaCl, respectively. Sucrose should be used as a carbon source and organic nitrogen such as peptone should be used as a nitorgen source for the best yield. The production of bacteriocin is related to the cell growth of Streptococcus sp. J-C1. The bacteriocin from Streptococcus sp. J-C1 was active for gram positive microorganisms such as Lactobacillus sp., Leuconoctoc sp., Lactococcus sp., Streptococcus mutans, Staphylococcus aureus amd Bacillus subtilis and also active for gram negetive bacteria such as Acetobacter aceti. Antibacterial activity of the bacteriocin was completely disappeared by protease treatment.
In this study, we want to detect bacteriocin production in purple nonsulfur bacteria. As a results, it was showed that bacteriocin produced between some strains of Rhodobacter capsulatus, Rhodobacter sphaeroides and Rhodocyclus gelatinosus. In particular, it was appeared that cell membrane-bound bacteriocin was also produced by Rhodobacter capsulatus ATCC 17016.
A bacteriocin-producing organism, Enterococcus sp. T7, was isolated from human fecal samples. Bacteriocin T7, named tentatively as the bacteriocin, was produced by Enterococcus sp. T7 and it inhibited some strains of Lactobacillus. Staphylococcus, Enterococcus, and Streptococcus, but not all the lactococci and gram-negative bacteria tested. Bacteriocin T7 inhibited the growth of Listeria monocytogenes Scott A, but the degree of inhibition was less than those for other sensitive gram-positive vacteria. Bacteriocin T7 in MRS broth started to produce at the middle of the exponential growth phase and the inhibitory activity reached its maximum level during the stationary growth phase. Bacteriocin T7 was stable against heat treatments, pH variations (pH 2-10), and exposure to organic solvents. The molecular weight of bacteriocin T7 was estimated to be 6.500 Da by SDS-PAGe. All these facts, including physico-chemical stabilities, small molecular size, and inhibition of Kisteria monocytogenes, indicate that bacteriocin T7 is likely to be a member of the class IIa bacteriocins.
A novel bacteriocin produced by Streptococcus parauberis Z49 strain was characterized and efficiently extracted from fermented cultures by use of aqueous two-phase systems. The nisin-like bacteriocin, which was active even after a heat treatment at $121^{\circ}C$ for 15 min and in the broad pH range from 2 to 12, showed inhibition of bacterial growth of Micrococcus luteus, Lactobacillus spp., Lactobacillus fermentum, Enterococcus faecium, Listereia monocytogenes, and Pseudomonas fluorescens. Optimal conditions of PEG 600/$Na_2SO_4$ aqueous two-phase systems for the simple and rapid extraction of a novel bacteriocin were determined to be PEG 600 15%, $Na_2SO_4$ 30%, and NaCl 8%, where the bacteriocin was concentrated in PEG layer.
A strain of Erwinia spp. was selected from the soil for the production of bacteriocin to the root rot plant pathogen. Bacteriocin producing gene was not located on plasmid but on chromosome. Genomic library of Erwinia spp. were made by using pLAFR 3 as a vector system for cloning of the gene. It was been cloned and expressed in E. coli DH 5 . Bacteriocin producing colony was composed of pLAFR 3 vector and 3.0 kb EcoRI fragment of Erwinia spp. ehromosomal DNA. The inserted fragment (3.0 kb) was possessed a EcoRI and BarnHI restriction sites.
We isolated microorganism secreting antimicrobial substance from tomato and identified as Enterococcus faecium. This substance was completely inactivated by pretense treatment and retained activity after catalase treatment. This result indicated that the antimicrobial activity of this substance was due to proteinaceous substance known as bacteriocin. The bacteriocin inhibited growth of Gram positive bacteria, such as Listeria monocytogenes, Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus plantarum, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pyrogenes, and Gram negative bacteria, such as Pseudomonas aeruginosa. Purification of the bacteriocin was achieved by ethanol precipitation, ion exchange chromatography on CM Sepharose CL-6B, and gel filtration on Sephacryl S-100 HR. After these purification steps, the specific activity of the bacteriocin was increased 35.8 fold compared with culture broth. Purified bacteriocin was shown single band on SDS-PAGE and molecular weight was estimated 51 kDa. The residual activity of this bacteriocin was 3.3% at 10$0^{\circ}C$ for 60 min, and this bacteriocin was stable at pH 2~7.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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