• 제목/요약/키워드: chromatography

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옥수수 종실의 Brassinosteroid 활성물질 탐색 (Brassinosteroid Substances in Immature Zea mays Seeds)

  • 박근형;김선재현규환
    • KSBB Journal
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    • 제8권3호
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    • pp.300-305
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    • 1993
  • 옥수수 종설에 존재하는 brassinosteroid 활생물질 을 탐색하기 위하여 MeOH로 추출하고, 이 추출물을 rice inclination test를 지표로 용매분획, silica g gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 c chromatography, charcoal adsorption chromato­g graphy, bondesil chromatography 등의 수법으로 b brassinosteroid 활생물질을 정제한 다음, silica gel 흡착 chromatography로 활생 성분을 분리하고 H HPLC에 의해 활성 본체를 구명한 결과, castas­t terone과 teasterone이 동정되었는데, 대부분 cas­t tasterone형태로 존재하였다. 옥수수 종실에 함유된 b brassinosteroid함량은 brassinolide로 환산하여 생 체중량 g당 3-8ng 수준이였다.

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들깨의 brassinosteroid 활성물질 (Brassinosteroid substances in immature Perilla frutescense seeds)

  • 박근형;김선재;현규환
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제36권3호
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    • pp.197-202
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    • 1993
  • 들깨에 존재하는 brassinosteroid 활성물질을 탐색하기 위하여 미숙종자를 MeOH로 추출하고, 이 추출물을 rice inclination test를 지표로, 용매 분획, silica gel adsorption chromatography, Sephadex LH-20 chromatography, charcoal adsorption chromatography, Bondesil chromatography 등의 수법으로 brassinosteroid 활성물질을 정제한 다음, silica gel 흡착 chromatography로 활성성분을 분리하고, 각 활성획분에 대해 HPLC에 의해 활성본체를 구명한 결과, main brassinosteroid로 castasterone이 그리고 minor brassinosteroid로 homodolicholide가 최초로 동정되었다. 들깨에 함유된 brassinosteroid의 함량은 brassinolide로 환산하여 생체중량 g당 $0.5{\sim}0.8\;ng$ 수준이었다.

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남극에서 분리한 저온성 세균 유래 단백질 분해 효소 (Purification and Characterization of Extracellular Protease form Psychrotrophic Antarctic Bacteria)

  • 조기웅;방지헌;홍혜원;박승일;이윤호
    • 미생물학회지
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    • 제38권4호
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    • pp.254-259
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    • 2002
  • 저온에서 최적 생육을 보이는 저온성 균주를 남극해양에서 분리하여 생화학적 특성 및 165 rRNA 염기서열로부터 Shewanella sp.에 속하는 균주로 동정하고 Shewanella sp. L93으로명명하였다. 본 균주에서 생산되는 저온성 세포외 단백질 분해 효소(extracellular protease)를 ammonium sulfate precipitation, High-Q column chromatography, 일차 gel permeation chromatography, BioScale Q2 ion exchange chromatography 및 gel permeation chromatography를 통하여 purification fold 19.3, yield 0.7 %로 정제하였고 그 특성을 조사하였다.

Solvent Extraction과 Gel Chromatography를 이용한 Phenoxyethanol Galactoside와 Chlorphenesin Galactoside의 정제 (Purifications of Phenoxyethanol Galactoside and Chlorphenesin Galactoside using Solvent Extraction followed by Gel Chromatography)

  • 정경환
    • 한국응용과학기술학회지
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    • 제34권4호
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    • pp.954-961
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    • 2017
  • 재조합 ${\beta}$-galactosidase (${\beta}$-gal)을 이용하여 transgalactosylation 반응으로 합성된 2-phenoxyethanol galactoside (PE-gal)과 chlorphenesin galactoside (CPN-gal)의 정제를 실시하였다. 먼저 PE와 PE-gal이 포함된 반응물에 ethyl acetate (EA)를 넣고, EA/water 이상계 시스템에서 PE와 PE-gal을 분획하였다. 이 시스템에서 PE는 EA층으로 PE-gal은 water층으로 분획되었다. 그리고, 물층을 모아서 silica gel chromatography를 실시하였다. 최종적으로, silica gel chromatography만 실시하여 PE-gal을 정제한 경우와, EA 처리 후 silica gel chromatography를 실시하여 PE-gal을 정제한 경우의 정제 PE-gal에 대하여 HPLC (High performance liquid chromatography)와 TLC (thin-layer chromatography) 분석을 수행하였다. 그 결과 EA를 처리하여 분획한 후, silica gel chromatography를 수행한 시료에서 잔여 PE가 완전히 제거되는 것을 관찰하였고, silica gel chromatography만 실시하여 PE-gal을 정제한 경우에는 상당량의 잔여 PE가 관찰되었다. 이 때, mole 기준으로 약 21%의 정제 수율을 확인할 수 있었다. 마찬가지로 CPN-gal의 정제에서도 EA 분획 처리 후, silica gel chromatography를 수행하였더니, 잔여 CPN이 거의 없는 순수한 CPN-gal을 얻을 수 있었다.

Gel filtration chromatography와 propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis를 이용한 봉독 성분의 분리 (Purification of Peptide Components including Melittin from Bee Venom using gel filtration chromatography and propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis)

  • 최영권;최석호;권기록
    • 대한약침학회지
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    • 제9권2호
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    • pp.105-111
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    • 2006
  • Objectives : This study was conducted to carry out Purification of Melittin and other peptide components from Bee Venom using gel filtration chromatography and propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis Methods : Melittin and other peptide components were separated from bee venom by using gel filtration chromatography on Sephadex G-50 column in 0.05M ammonium acetate buffer. Results : Melittin and other peptide components were separated from bee venom by using gel filtration chromatography on Sephadex G-50 column in 0.05M ammonium acetate buffer. The fractions obtained from gel filtration chromatography was analyzed by using SDS-PAGE and propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis. The melittin obtained from the gel filtration contained residual amount of phospholipase $A_2$ and a protein with molecular weight of 6,000. The contaminating proteins were removed by the second gel filtration chromatography. Conclusion : Gel filtration chromatography and propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis are useful to separate peptide components including melittin from bee venom.

Paper chromatography와 Thin-layer chromatography에 의한 시판 Jelly류의 착색료에 관한 고찰 (A study on the Detection of Artificial Dyes in the Commercial Jellys by Use of Paper Chromatography and Thin-Layer Chromatography.)

  • 구성회;오석흔;우세홍;한양일;이성호;남궁석;박선이
    • 한국환경보건학회지
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    • 제4권1호
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    • pp.10-12
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    • 1977
  • A study was carried out to detect of illegal artificial dyes and to confirm the used rate of illegal dyes in the production process of commercial jellys by thindayer chromatography and paper chromatography, from March, 1976 to July, 1976. The following conclusions were obtained 1. Seperated dyes were amaranth, erythrosin, tatrazin, sunset yellow FCF, fight green SF yellowish, fast green FCF and the most frequent use of amaranth. 2. Used rate of legal dyes were 94.12% (96 samples) and illegal dyes were 5.88% (6 samples) with samples 102. 3. The average Rf value of T.L.C. were amaranth (0.92), erythrosin (0.48), tatrazin (0.83), sunset yellow FCF(0.86), fast green FCF (0.63), light green SF yellowish (0.23) and paper chromatography were amaranth (0.76), erythrosin (0.44), tatrazin(0.75), sunset yellow FCF (0.76), fast green FCF (0.86), light green SF yellowish(0.52).

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Mycobacterium fortuitum의 스테로이드 9${\alpha}$-하이드록실라제의 분리 및 부분정제 (Isolation and Partial Purification of the Steroid 9${\alpha}$-Hydroxylase from Mycobacterium fortuitum)

  • 강희경
    • 약학회지
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    • 제41권5호
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    • pp.638-646
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    • 1997
  • The steroid 9${alpha}$-hydroxylase activity has been detected in cytosol fraction, $100,00{\times}g$ supernatant of cell free extract of Mycobacterium fortuitum. The activity was not linear with protein concentration in the assay suggesting 9${alpha}$-hydroxylase is a multicomponent enzyme. The 9${alpha}$-hydroxylase system was partially purified through fractional saturation of ammonium sulfate, strong anion exchange (Mono Q) column chromatography, gel filtration (Superose 12) column chromatography, and testosterone affinity gel chromatography. Ammonium sulfate 50~60% saturated fraction of the cytosol gave 9${alpha}$-hydroxylase activity. For further purification, the half-saturated ammonium sulfate fraction was applied to Mono Q, Superose 12, or affinity gel column. The purification factors of 9${alpha}$-hydroxylase containing fraction after Mono Q, Superose 12, and affinity gel chromatography was 13, 11, and 17 respectively.

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미역의 Brassinosteroid 활성물질검색 (Investigation of Brassinosteroid Substances in Undmia pinnatifida)

  • 문제학;현규환박근형
    • KSBB Journal
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    • 제7권1호
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    • pp.21-26
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    • 1992
  • 미역엽상부의 MeOH추출물에 포함되어 있는 brassinosteroid활성물질을 검색하기 위하여 용매분획, CCD, silica gel흡착 chromatography, Sephadex LH-20 chromatography, charcoal 흡착 chromatography, Bondesil chromatography, 그리고 reverse phase의 HPLC등의 수법을 이용하여 분리 정제하고 각 단계에서 생물검정법으로 활성을 검정한 결과, 해조류인 미역에도 brassinosteroid활성물질의 존재가 인정되었는데, 그 함량은 타 식물의 영양조직에 비교하여 낮은 수준이었다.

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Streptomyces diastatochromogens로부터 제한효소 SdiI의 분리정제 (Purification of Festriction Endonuclease,SdiI, from Streptomyces diastatochromogenes)

  • 배무;송은숙
    • 미생물학회지
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    • 제32권4호
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    • pp.297-300
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    • 1994
  • 토양에서 분리한 방선균에서 제한효소 활성을 조사하여 그 가운데 Streptomyces diastatochromogenes로부터 제한효소 활성을 확인하였다. 이 균주의 제한효소 SdiI을 균체 15g으로부터 streptomycin sulfate침전, ammonium sulfate 침전, hydroxylapatite colume chromatography, Sephacryl S-200 HR column chromatography, hydroxylapatite column chromatography의 단계를 거쳐 분리하였고, SDS-polyacrylamide gel-electrophoresis에 의하면 소단위체 분자량은 약 35,000Da으로 추정되었다.

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Preparative Chromatographic Separaction: Simulated Moving Bed and Modified Chromatography Methods

  • Yi Xie;Koo, Yoon-Mo;Nien-Hwa Linda Wang
    • Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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    • 제6권6호
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    • pp.363-375
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    • 2001
  • Chromatography has been method of choice for the separation complex biologi-cal mixtures fro analytical purpose, particularly for the last fifty years. Its use has recently been extended to preparative separation where the productivity relative to the amount of resin and sol-vent used is a matter of concern. To overcome the inherent thermodynamic inefficiency of batch chromatography, as exemplified by the partial temporal usage of the resin and dilution of the product with the solvent, chromatography has been continually modified by separation engineers. Column switching and recycling represnet some of the process modifications that have brought high productivity to chromatography. Recently, the simulated moving bed (SMB) method, which claims a high separation efficiency based on counter-current moving bed chromatography. has be-come the mainstay of preparative separation, especially in chiral separation. Accordingly, this pa-per reviews the current status of SMB along with several chromatographic modification, which may be helpful in routine laboratory and industrial chromatographic practices.

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