• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제17권4호
• /
• pp.681-684
• /
• 2007

An immunoassay method was developed to quantitatively detect phosphinothricin-N-acetyltransferase (PAT) encoded by the Bialaphos resistance (bar) gene in genetically modified (GM) pepper. The histidine-tagged PAT was overexpressed in Escherichia coli M15 (pQE3l-bar) and efficiently purified by $Ni^{2+}$ affinity chromatography. A developed sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (S-ELISA) method (detection limit: $0.01{\mu}g/ml$) was 100-fold more sensitive than a competitive indirect ELISA (CI-ELISA) method or Western blot analysis in detecting the recombinant PAT. In real sample tests, PAT in genetically modified herbicide-tolerant (GMHT) peppers was successfully quantified [$4.9{\pm}0.4{\mu}g/g$ of sample (n=6)] by the S-ELISA method. The S-ELISA method developed here could be applied to other GMHT crops and vegetables producing PAT.

• 한국식품과학회지
• /
• 제52권1호
• /
• pp.40-45
• /
• 2020

1996년 이후부터 현재까지 개발된 GM 작물은 520여종에 이르며, 미국, 브라질, 아르헨티나, 캐나다, 인도 등을 포함해 26개국에서 GM 작물을 재배하고 있다. 특히, 제1세대 GM 작물로 구분되는 제초제 내성 GM 작물은 전체 GM 작물의 67%를 차지하며, 그 중 제초제 glufosinate에 내성을 나타내는 pat 또는 bar 유전자를 지닌 작물은 44%를 차지한다. 하지만 GM 작물이 같은 형질을 지녔더라도 유전자의 기원, 식물의 종 및 개발자에 따라 그 유전자의 서열은 매우 가변적이기 때문에 이를 식별하기란 쉽지 않다. 따라서 본 연구에서는 전체 GM 작물의 44%, 국내 승인 GM 작물의 약 53%를 차지하는 제초제 glufosinate 내성 유전자에 특이적이면서도 보편적인 마커를 개발하고자, 여러 GM 작물의 pat 또는 bar 유전자의 DNA 염기서열을 비교하여 PCR 프라이머를 개발하였으며, 이를 GM 작물 표준물질을 사용하여 검증하였다. 정성 및 정량적 PCR 실험을 통해 pat 유전자에 특이적인 PCR 프라이머를 개발하였다. 또한 pat과 bar 유전자를 동시에 검출 할 수 있는 PCR 프라이머도 개발하였으며, 정량적 PCR 분석을 통해 0.1% 함량의 수준까지도 검출 가능함을 확인하였다. 따라서 본 연구의 수행 결과로 확인된 PCR 마커 및 분석법이 향후 GM 작물의 안전한 유통관리 및 GM 식품의 식품 안전관리를 위한 저비용 고효율적 검출방법으로 이용될 수 있을 것이라 생각된다.

• 한국응용곤충학회지
• /
• 제54권4호
• /
• pp.335-343
• /
• 2015

유전자변형 작물이 절지동물에 미칠 수 있는 잠재적인 부정적 영향은 유전자변형 작물의 주요한 환경위해성의 하나로 여겨지고 있다. 본 연구에서는 PPO (protoporphyrinogen oxidase) 저해 제초제 내성 유전자변형 벼가 절지동물에 미칠 수 있는 영향을 평가하기 위하여 절지동물의 다양성과 군집구조를 조사하였다. 절지동물은 야외포장에서 벼의 생육기간 동안 황색점착트랩을 이용하여 채집하였다. 유전자변형 벼는 채집된 절지동물군집의 다양도 지수에 유의한 영향을 주지 않았다. 또한 다변량분석(PerMANOVA, NMDS) 결과에서도 절지동물군집 구조는 채집시기에 따라 달랐지만 벼의 유전형(유전자변형 또는 비변형)에 의해 영향을 받지 않았다.

• 농업과학연구
• /
• 제41권3호
• /
• pp.187-191
• /
• 2014

The cultivation area and use of genetically modified (GM) crops have been increased continuously over the world. Concerns about the potential risks of GM crops are also increasing. Safe management for the development and production of GM crops is required according to Living Modified Organism Act in Korea. Planning about the methods, duration, and frequency of environmental monitoring is also required for commercial use of GM crops. GM Zoysia japonica Steud. (event name: JG21) expressing resistance to glufosinate-ammonium has been generated previously. By using gamma ray treatment to JG21 we also developed male sterility and dwarf Z. japonica (event name: JG21-MS). The objective of this study was to establish the monitoring system for environment release of JG21-MS. In this study we extracted RNA from JG21 and JG21-MS and conducted RAPD (random amplified polymorphic DNA) method to distinguish JG21 and JG21-MS.

• Weed & Turfgrass Science
• /
• 제3권4호
• /
• pp.305-311
• /
• 2014

유전자변형(genetically modified, GM)작물의 종자 및 꽃가루를 통한 환경 생태계로의 확산은 안전성평가와 안전관리에 있어 매우 중요한 요소이며, 국내에서는 LMO법에 따라 GM 작물의 개발 및 생산 등에 대한 안전관리와 GM 작물의 상업화를 위한 환경모니터링에 대한 방법, 기간, 빈도 등에 대한 계획을 요구하고 있다. 본 연구는 제초제저항성 들잔디(zoysiagrass)의 야외환경모니터링을 수행을 통한 환경모니터링 시스템 기반 구축을 위해 수행되었다. 연구에 사용된 GM 들잔디는 제초제저항 형질의 JG21과 JG21에 방사능처리로 웅성불임을 유도한 JG21-MS 등 2개의 이벤트를 이용하였다. 환경모니터링은 충남 성환, 충북 오창, 제주대 및 제주 납원읍 등 4개 격리포장 주변에서 2011년부터 2013년까지 종자 및 영양번식체에 의한 산포 조사와 화분에 의한 유전자이동에 대해 수행되었다. 모니터링 수행 결과 3개 지역에서 유전자이동 및 산포가 발견되지 않았으나, 2012년 제주 남원읍 지역 조사에서 격리포장 주변 2 m 부근에서 JG21 들잔디 1개체의 유출이 발견되어 보고 및 안전관리 조치를 수행하였다. 본 연구에서 사용된 GM 들잔디의 검출 방법과 환경모니터링 기법들은 GM 들잔디 개발을 위한 포장시험 연구와 상업화 후 환경모니터링을 위한 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 기대한다.