protein phosphatase 2A는 bovine brain homogenate의 세포질 fraction에서 얻어졌다. 기질로서 인산화된 histione H1을 이용하여 측정한 phosphatase 의 활성은 dipalmitoyIphophatidylcholine(DPPC) 혹은 phosphatidylserine/DPPC의 혼합물로 구성된 liposome의 존재하에서 저해되었다. Protein phosphatase 2A의 lipid membrane에의 결합은 다중층 지질막의 혼합물 계에서 liposome 의 양이 증가함에 따라서 상등액 중의 phosphatase의 활성이 감소하는 것으로 확인할 수 있었다. 또한 [$^{125}I$]protein phosphatase 2A가 liposome과 동시에 용출되는 것으로도 확인되었다. 그러나 liposome에 대한 protein phosphatase의 친화력은 높지 않았다. 한편, okadaic acid와 liposome은 협동으로 phosphatase의 활성을 감소시켰다. 이것은 okadaic acid가 lipid membrane이나 membrane에 결함한 phosphatase에는 결합하지 않는다는 것을 의미한다. 그러므로 lipid membrane에 의한 protein phosphatase 2A의 활성 저해 효과는 phosphatase 2A와 lipid membrane과의 결합에 의한 것이라고 설명될 수있다.
This study determined hepatic microsomal lipid peroxide values glucose 6-phosphatase NA-DPH-cytochrome P450 reductase and cytosolic glutathione S-transferase activites to examine the effects of methyl group deficiency on hepatic lipid peroxidation in rats treated with diethylni-trosamine(DEN) and 2-acetylamionfluorene(AAF) Weanling sprague Dawley male rats were fed the diet with methyl group supplemented or deficient. Two weeks after feeding rate were injected with a single of 200mg/kg body weight DEN intraperitoneally and after four weeks 0.02% AAF containing diets were fed for two weeks. Animals were sacrificed at 6th week. Microsomal lipid peroxide values were tended to increase in methyl group deficiency(MD). Especially in case of carcinogen tratments lipid peroxide values were increased significantly in MD. Microsomal glucose 6-phophatase activities were decreased by MD and carcinogens and in MD with carcinogen group (MD+C) the enzyme activites were the lowest Glucose 6-phosphatase activities were negatively correlated with lipid peroxidation. Microsomal NADPH-cytochrome P450 reductase activities were the highest in MD+C and correlated positively with lipid peroxidation. Cytosolic glutathione S-transferase activities were the highest in MD+C Methyl group deficiency induces lipid peroxidation especially in case of being exposed to carcinogens. Therefore the results suggest that lipid peroxidation may be one of the meachanisms of carcinogensis by methyl group deficiency.
발암물질인 2-acetylaminofluorence(2-AAF)과 Choline 결핍이 서로 다른 지방을 섭취한 쥐간의 지질과산물, Glucose 6-phosphatase (G6Pase)와 Glutathione S-transferase(GST) 활성도에 미치는 영향을 연구 하였다. 식이 지방은 쇠기름과 옥수수유를 사용하였으며 각 식이 지방군을 Choline 결핍군과 대조군으로 나누어 실험하였다. 식이섭취 3주와 5주째, 2-AAF 처리군과 비처리군으로 나누어 처리군에 매주 2회씩 총4회 2-AAF를 주사 한 뒤 식이섭취 10주 루 동물을 희생 시켰다. MIcrosome의 지질과산화물 함량은 2-AAF와 Choline결핍(CD)식이에 의해 옥수수유 군에서 증가하여 지질과산화 반응에 있어 2-AAF와 CD식이의 역활이 쇠기름을 섭취하였을때 보다 옥수수유를 섭취한 경우 더 중요함을 알 수 있었다. Microsome의 G6Pase활성은 유의적이지는 않으나 2-AAF와 CD식이에 의해 감소하는 경향을 보였으며 옥수수유의 섭취에 의해서는 유의적으로 감소하였다. GST활성은 식이지방에 따라 2-AAF나 CD식이에 의해 증가하였으며 이때 증가된 GST는 발암물질의 대사와 지질과산화물 형성에 대해 방어 작용을 한것으로 보인다.
This study was done to investigate effects of ${\gamma}$-irradiated pork feeding on the formation of glutathione S-transferase placental form positive (GST-P$^{+}$) foci, lipid peroxidation, cytochrome P450 system and microsomal glucose 6-phosphatase activity in diethylnitrosamine (DEN)-initiated rat hepatocarcinogenesis. Weaning Sprague-Dawley male rats were fed the diet containing ${\gamma}$-irradiated ground pork at the dose of 0, 3, 10, 30 kGy as a 20% of protein source for 8 weeks. One week after feeding, rats were intraperitoneally injected twice with a dose of DEN (50 mg/kg BW). As a promote.,0.05%phenobarbital was fed in drinking water from one week after DEN treatment until the end of experiment. At the end of 8th week, rats were sacrificed and hepatic GST-P$^{+}$ foci, microsomal malondialdehyde (MDA) and conjugated diene contents were determined. In addition, cytochrome P450 content and the activities of NADPH cytochrome P450 reductase and glucose 6-phosphatase were also measured. There was no significant effect by gamma irradiation on microsomal MDA content, conjugated diene, cytochrome P450 content and activities of NADPH cytochrome P450 reductase and glucose 6-phosphatase. However with DEN treatment, microsomal MDA content showed a increasing tendency. Cytochrome P450 content was also significantly increased while microsomal glucose 6-phophatase activity was significantly decreased with DEN treatment. However the activity of NADPH cytochrome P450 reductase was not affected. An interesting finding in this study was that the number and area of hepatic GST-P$^{+}$ foci of rats fed gamma irradiated pork were tended to be decreased by high dose of irradiation, but were not significantly different. These results might imply that the consumption of low dose of gamma irradiated pork does not affect the formation of hepatic GST-P$^{+}$ foci and lipid peroxide and membrane stability.ability.
Effects of ${\alpha}$-tocopherol and perilla oil on the toxicity of polychlorinated biphenyls (PCB) in male rat were studied. Rats were fed ad libitum for 6 weeks with the animal diet which contains PCB 30 ppm and 100 ppm. Perilla oil (0.5 g/kg body weight) and ${\alpha}$-tocopherol (30 mg/kg body weight) were administered intraperitoneally twice a week for 6 weeks. Rats fed with PCB showed enlargement of liver and spleen, increase in aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, sereum lipid and cytochrome P 450 and decrease in body weight and glutathione. When perilla oil was administered to rats fed with PCB increase in aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, serum lipid and cytochrome P45O and decrease in body weight and glutathione were significantly augmented, compared to rats fed with PCB alone. This means that perilla oil potentiates the toxicity of PCB. On the other hand when ${\alpha}$-tocopherol was administered to rats fed with PCB increase in aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, serum lipid and cytochrome P45O and decrease in body weight and glutathione were signigicantly reduced, compared to rats fed with PCB alone. This means that u-tocopherol reduces the toxicity of PCB. From the above results, it may be concluded that PCB is metabolized by microsomal mixed function oxidase and the metabolite causes the toxicity and microsomal glutathione plays a role of protection on the toxicity of PCB.
솔잎혹파리 (Thecodiplosis japonensis Uchi. et Inouye)의 충영속 유충과 충영을 탈출하여 낙하한 토중의 유충을 대상으로 체액을 분석, 측정코저 종이 크로마토그라피법, micro-Kjeldahl법, 박층 크로카토그라피 법, 왈부르그 검압계법, Bessey-Lowry법과 Reitman-Frankel법으로 측정 또는 분석하였다. 충영과 유충과 토중의 유충에 따라 유리 아미노산, 총 질소함량의 변화, 탄수화물의 변화, 지질의 종류와 변화, 호흡능, phosphatase, GOT, ?의 활성도가 측정되었다. 유리 아미노산, 총 질소함량, 지질함량, 호흡능, acid phosphatase의 황성, GPT의 활성은 충영속의 유충에서 토중의 유충으로 진행함에 따라 감소하는 경향을 나타냈다. 그러나 trehalose의 함량과 alkaline phosphatase의 활성은 증가하는 경향을 나타냈다.
This study was done to investigate effects of ${\gamma}$ irradiated beef feeding on the formation of gluta thione S transferase placental form positive(GST P+) foci, lipid peroxidation, cytochrome P450 system and microsomal glucose 6 phosphate activity in diethylnitrosamine(DEN) initiated rat hepatocarci nogenesis. Weaning Sprague Dawley male rats were fed the diet containing ${\gamma}$ irradiatied ground beef at the dose of 0, 3, 5kGy as a 20% of protein source for 8 weeks. One week after feeding, rats were intraperitoneally injected twice with a dose of DEN(50mg/kg BW). As a promoter, 0.05% phenobarbital was fed in drinking water from one week after DEN treatment until the end of experiment. At the end of 8th week, rats were sacrificed and hepatic GST P+ foci, microsomal malondialdehyde(MDA) and conjugated diene contents were determined. In addition, cytochrome P450 content and the activities of NADPH cytochrome P450 reductase and glucose 6 phosphatase were also measured. There was no significant effect by gamma irradiation on microsomal MDA content, conjugated diene, cytochrome P450 content and activities of NADPH cytochrome P450 reductase and glucose 6 phosphatase. However with DEN treatment, microsomal MDA content and conjugated diene contents were significantly changed. Cytochrome P450 content was also significantly increased while microsomal glucose 6 phophatase activity was significantly decreased with DEN treatment. However activity of NADPH cytochrome P450 reductase was not affected. An interesting finding in this study was that the number and area of hepatic GST P+ foci of the rats fed gamma irradiated beef were significantly(p<0.05) lower than those of the control. Such a lowering effect on GST P+ foci formation was highest at the dose of 3kGy than others. Overall results suggest that the consumption of low dose of gamma irradiated beef does not affect the formation of lipid peroxide, cytochrome P450 system and membrane stability.
The effects of ginseng saponins, gypsophila saponin, sodium dodecyl sulfate(SDS), and Triton X-100 on membrane $K^+-dependent$ phosphatase activity which is lipid dependent and represents dephosphorylation step of the complete Na+, $K^+-ATPase$ reaction were investigated in this study to elucidate whether the effects of ginseng saponins are due to the detergent action, using sarcolemma enriched preparation isolated from dog ventricle. $Na^+$, $K^+-ATPase$ and $K^+-dependent$ phosphatase activities of cardiac sarcolemma were about $143\;{\mu}mol$ Pi/mg protein/hr and $34\;{\mu}mol$ p-nitrophenol/mg protein/hr, respectively. While ginseng saponins (triol>total>diol) inhibited $K^+-dependent$ phosphatase activity, gypsophila saponin, and low dose of SDS($0.4\;{\mu}g/{\mu}g$ protein), and Triton X-100 ($0.6\;{\mu}g/{\mu}g$ protein) increased the enzyme activity, indicating disruptive effect of detergents on membrane barriers. The activating effect of low doses of Triton X-100 on membrane $K^+-dependent$ phosphatase appeared at concentration decreasing light scattering. However, the inhibitory effect of ginseng saponin appeared before a decrease in light scattering. These results suggest that low concentrations of ginseng saponins inhibit the membrane $K^+-dependent$ phosphatase by interacting directly with enzyme before membrane disruption.
Panax ginseng occupies an important role in the folk medicine of China, Korea and Japan. The present study was undertaken to determine the radioprotective efficacy of ginseng root extract in the liver of Swiss albino mice. The animals were divided into 4 groups. Group I-Only vehicle was administered. Group II-The animals received 10 mg/kg body weight ginseng root extract i.p. for 4 consecutive days. Group III-Animals were irradiated with 8Gy gamma radiation at the dose rate of 1.69 Gy/min at the distance of 80 ems. Group IV-Animals were given by ginseng root extract (10 mg/kg body weight) continuously for 4 days and on 4th day they were irradiated with 8 Gy gamma radiation after 30 min. The animals from above groups were autopsied on 1,3,7,14 and 30 days. Biochemical estimations of phosphatases (acid & alkaline), LDH (lactate dehydrogenase), LPO (lipid peroxidation) and GSH (reduced glutathione) in liver and SGOT (serum glutamate oxaloacetate transaminase), SGPT (serum glutamate pyruvate transaminase) and alkaline phosphatase in serum were done. In ginseng treated group acid phosphatase (ACP), alkaline phosphatase (ALP), LPO and LDH in liver and SGOT, SGPT and alkaline phosphatase in serum did not show any significant alteration. However, a significant increase in GSH content in liver was recorded. In irradiated group there was a significant increase in ACP, ALP and LPO content in liver and SGOT & SGPT in serum was noted. Whereas, a significant decrease was recorded in GSH and LDH activity in liver and alkaline phosphatase activity in serum. Pretreatment of ginseng with radiation significantly alters the biochemical parameters in liver and serum. A significant decline in ACP, ALP activity and LPO content in liver and SGOT and SGPT activity in serum was observed. However, a significant increase in GSH content and LDH activity in liver and ALP activity in serum was estimated. The present study suggests that pretreatment of ginseng before irradiation significantly protects the liver and maintains the enzyme activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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