Kim, Yangseon;Goh, Jaeduk;Kang, Injeong;Shim, Hyeongkwon;Heu, Sunggi;Roh, Jaehwan
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.112-112
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2017
Rice blast caused by Magnaporthe oryzae is one of the most serious diseases that affect the quantity and quality of rice production. The use of resistant rice varieties would be the most effective way to control the rice blast. However R gene incorporation into the rice variety takes time and pathogen could overcome the R gene effects after for a while. For monitoring the rice blast resistance gene distribution in Korean varieties, the four major blast resistance genes against M. oryzae were screened in a number of Korean rice varieties using molecular markers. Of the 120 rice varieties tested, 40 were found to contain the Pi-5 gene, 25 for the Pi-9 gene, 79 for Pi-b and 40 for the Pi-ta gene. None of these rice varieties includes tested 4 R genes. 3 R genes combination, Pi-5/Pi-9/Pi-b, Pi-5, Pi-9.Pi-ta, or Pi-9/Pi-b/Pi-ta were found in 12 varieties, the rice blast disease severity were showed as resistant in the rice verities containing Pi-9/Pi-b/Pi-ta R genes combination, respectively. Also pathogenic diversity of M. oryzae isolates collected in the rice field from 2004 to 2015 in rice field in Korea were analyzed using rice blast monogenic lines, each harboring a single blast resistance gene. Compatibility of blast isolates against rice blast monogenic lines carrying the resistance genes Pi5, Pi9, Pib, and Piz showed dynamic changes by year. It indicates that pathogen has high evolutionary potential adapted host resistances to increase fitness and would lead to rice blast resistance bred into the cultivar becoming ineffective eventually.
Tran, Dang Xuan;Tran, Dang Khanh;Truong, Thi Tu Anh
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.27-27
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2017
The rapid growth of world population, reduction of cultivated areas for crop production, and detrimental effects of pests, diseases, and climate changes have required to breed new rice cultivars with high yield, accepted quality, but strong resistance to abiotic and biotic stresses. However, traditional breeding needs much time to breed a new cultivar, whereas the successful use of molecular breeding is still questionable. We have developed a novel mutation which allow to cross many rice cultivars together with low segregation, that allow to breed a new cultivar in only several cropping. The mechanism has been unknown, but we suggest that gene linkage may play a crucial role, of which the semi dwarf gene might be the center gene for gene linkage occurrence. The phenomenon of this possible gene linkage is contrary to Mendel rules, but it is promising to breed new rice cultivars, of which, the most elite genes in rice might be able to gather in a targeted rice variety.
Kim, So-Young;Kim, Chang-Kug;Kang, Min;Ji, Seung-Uk;Yoon, Ung-Han;Kim, Yong-Hwan;Lee, Gang-Seob
Plant Breeding and Biotechnology
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v.6
no.4
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pp.313-320
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2018
Rice is the staple food of more than 50% of the world population. Cultivated rice has the AA genome (diploid, 2n = 24) and small genome size of only 430 megabase (haploid genome). As the sequencing of rice genome was completed by the International Rice Genome Sequencing Project (IRGSP), many researchers in the world have been working to explore the gene function on rice genome. Insertional mutagenesis has been a powerful strategy for assessing gene function. In maize, well characterized transposable elements have traditionally been used to clone genes for which only phenotypic information is available. In rice endogenous mobile elements such as MITE and Tos have been used to generate gene-tagged populations. To date T-DNA and maize transposable element systems have been utilized as main insertional mutagens in rice. The Ac/Ds system offers the advantage of generating new mutants by secondary transposition from a single tagged gene. To enhance the efficiency of gene detection, advanced gene-tagging systems (i.e. activation, gene or enhancer trap) have been employed for functional genomic studies in rice. Internationally, there have been many projects to develop large scales of insertional mutagenized populations and databases of insertion sites has been established. Ultimate goals of these projects are to supply genetic materials and informations essential for functional analysis of rice genes and for breeding using agronomically important genes. In this report, we summarize the current status of Ac/Ds-mediated gene tagging systems that has been conducted by collaborative works in Korea.
A vector for plant transformation which had two reporter genes(Gus and Hpt genes) in a single plasmid was constructed. After rice embryos imbibed DNA solution, DNA uptake and gene expression in rice were monitored. Main expression sites of the Gus gene were meristem of root and coleoptiles. There was no difference in Hpt gene expression between a single Hpt vector and the constructed vector in viability of rice in the hygromycin medium after DNA imbibition, The genomic DNA and total RNA extracted from rice transformant survived in the hygromycin medium were subjected to PCR and RT PCR analysis, respectively. As a result, we found the existence of the Hpt gene and its expression in rice.
Kim, Sung-Eun;Moon, Jae-Sun;Kim, Jung-Kyu;Choi, Won-Sik;Lee, Sang-Han;Kim, Sung-Uk
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.20
no.1
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pp.187-192
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2010
In order to monitor the possibility of horizontal gene transfer between transgenic rice and microorganisms in a paddy rice field, the gene flow from a bifunctional fusion (TPSP) rice containing trehalose-6-phosphate synthase and phosphatase to microorganisms in soils was investigated. The soil samples collected from the paddy rice field during June 2004 to March 2006 were investigated by multiplex PCR, Southern hybridization, and amplified fragment length polymorphism (AFLP). The TPSP gene from soil genomic DNAs was not detected by PCR. Soil genomic DNAs did not show homologies on the Southern blotting data, indicating that gene transfer did not occur during the last two years in the paddy rice field. In addition, the AFLP band patterns produced by soil genomic DNAs from both transgenic and non-transgenic rice fields appeared similar to each other when analyzed by the NTSYSpc program. Thus, these data suggest that transgenic rice does not give a significant impact on the communities of soil microorganisms, although long-term observation may be needed.
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2017.06a
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pp.109-109
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2017
The core components of ABA-dependent gene expression signaling have been identified in Arabidopsis and rice. This signaling pathway consists of four major components; group A OsbZIPs, SAPKs, subclass A OsPP2Cs and OsPYL/RCARs in rice. These might be able to make thousands of combinations through interaction networks resulting in diverse signaling responses. We tried to characterize those gene functions using transient gene expression for rice protoplasts (TGERP) because it is instantaneous and convenient system. Firstly, in order to monitor the ABA signaling output, we developed reporter system named pRab16A-fLUC which consists of Rab16A promoter of rice and luciferase gene. It responses more rapidly and sensitively to ABA than pABRC3-fLUC that consists of ABRC3 of HVA1 promoter in TGERP. We screened the reporter responses for over-expression of each signaling components from group A OsbZIPs to OsPYL/RCARs with or without ABA in TGERP. OsbZIP46 induced reporter most strongly among OsbZIPs tested in the presence of ABA. SAPKs could activate the OsbZIP46 even in the ABA independence. Subclass A OsPP2C6 and -8 almost completely inhibited the OsbZIP46 activity in the different degree through the SAPK9. Lastly, OsPYL/RCAR2 and -5 rescued the OsbZIP46 activity in the presence of SAPK9 and OsPP2C6 dependent on ABA concentration and expression level. By using TGERP, we could characterize successfully the effects of ABA dependent gene expression signaling components in rice. In conclusion, TGERP represents very useful technology to study systemic functional genomics in rice or other monocots.
The Pi-b is the rice gene conferring race specific resistance to the blast fungus Magnaporthe grisea race having a corresponding avirulence gene, AVR-Pi-b. All resistant cultivars have two copies of the Pi-b gene, but susceptible cultivars have a single copy of the gene. About 1 Kbp insertion sequence was detected in the open reading frame of the Pi-b gene from the susceptible cv. Nipponbare. The nature of insertion sequence was identified as a solo long terminal repeat (LTR) of new rice Tyl-copia-like retrotransposon. LTR was widely distributed in the rice genome. Various types of different patterns of restriction fragment length polymorphism of LTR were detected in indica cultivars, whereas a single type was detected from japonica cultivars. The insertion of LTR sequence in the Pi-b gene in the susceptible cultivar suggested that retrotransposon-mediated insertional mutation might played an important role in the resistance breakdown as well as evolution of resistance genes in rice.
Proceedings of the Korean Society of Sericultural Science Conference
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1997.06a
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pp.23-49
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1997
This is a progress report of rice biotechnology including development of gene transformation system, gene cloning and molecular mapping in rice. The scope of the research was focused on the connection between conventional breeding and biotech-researches. Plant transformation via Agrobacterium or particle bombardment was developed to introduce one or several genes to recommended rice cultivars. Two chimeric genes containing a maize ribosome inactivating protein gene (RIP) and a gerbicide resistant gene (bar) were introduced to Nipponbare, a Japonica cultivar, and transmitted to Korean cultivars. The homozygous progenies of herbicide resistant transgenic plant showed good fertility and agronomic characters. To explore the genetic resourses in rice, over 8,000 cDNA clones from immature rice seed have been isolated and sequenced. About 13% of clones were identified as enzymes related to metabolic pathway. Among them, twenty clones have high homology with genes encoding enzymes in the photorespiratory carbon cycle reaction. Up to now about 100 clones were fully sequenced and registered at EMBL and GenBank. For the mapping of quantitative tarits loci (QTL) and eternal recombinant inbred population with 164 F13 lines (MGRI) was developed from a cross between Milyang 23 and Gihobyeo, Korean rice cultivars. After construction of fully saturated RFLP and AFLP map, quantitative traits using MGRI population were analyzed and integrated into the molecular map. Eighty seven loci were determined with 27 QTL characters including yield and yield components on rice chromosomes. Map based cloning was also tried to isolate semi-dwarf (sd-1) gene in rice. A DNA probe, RG 109, the most tightly linked to sd-1 gene was used to screen from bacterial artifical chromosome (BAC) libraries and five over lapping clones presumably containing sd-1 gene were isolated. Rice genetic database including results of biotech reasearch and classical genetics is provided at Korea Rice Genome Server which is accessible with world wide web (www) browser. The server provides rice cDNA sequences and map informations linked with phenotypic images.
Proceedings of the Korean Society of Crop Science Conference
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2022.10a
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pp.201-201
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2022
Rice bakanae disease is a serious global threat in major rice-cultivating regions worldwide causing high yield loss. It is caused by the fungal pathogen Fusarium fujikuroi. Varying degree of resistance or susceptibility to bakanae disease had been reported among Korean japonica rice varieties. We developed a modified in vitro bakanae disease bioassay method and tested 31 Korean japonica rice varieties. Nampyeong and Samgwang varieties showed highest resistance while 14 varieties including Junam and Hopum were highly susceptible with 100% mortality rate. We carried out mapping QTLs for bakanae disease resistance with four F2:F3 populations derived from the crosses between Korean japonica rice varieties. The Kompetitive Allele-Specific PCR (KASP) markers developed in our laboratory based on the SNPs detected in Korean japonica rice varieties were used in genotyping F2 plants in the populations. We found four major QTLs on chromosome 1, 4, 6, and 9 with LOD scores of 21.4, 6.9, 6.0, and 60.3, respectively. In addition, we are doing map-based cloning of the QTLs on chromosome 1 and 9 which were found with Junam/Nampyeong F2:F3 population and Junam/Samgwang F2:F3 population, respectively. These QTLs will be very useful in developing bakanae disease resistant high quality rice varieties.
In order to understand the molecular interactions that occur between rice and the rice blast fungus during infection, we previously identified a number of rice blast fungal elicitor-responsive genes from rice (Oryza sativa cv. Milyang 117). Here, we report the cloning and characterization of the rice fungal elicitor-inducible gene Oshin1 (GenBank Accession Number AF039532). Sequence analysis revealed that the Oshin1 cDNA is 1067 bp long and contains an open reading frame encoding 205 amino acid residues. The Oshin1 gene shows considerable sequence similarity to the tobacco hin1 and hin2 genes. The predicted Oshin1 protein has a cysteine-rich domain at the N-terminus and is rich in leucine, serine, and alanine residues. Southern blot analysis suggests that Oshin1 gene is a member of a small gene family in the rice genome. To examine the expression of Oshin1, Northern blot analysis was conducted. Expression of the Oshin1 transcript is rapidly induced in suspension-cultured rice cells treated with fungal elicitor, salicylic acid or hydrogen peroxide. In addition, Oshin1 transcript levels are rapidly increased by treatment with $Ca^{2+}$/A23187. The expression of Oshin1 was also elevated in 3-week old leaf tissues upon ethephon application or fungal elicitor treatment. Our results suggest that the Oshin1 gene is involved in plant defense responses to environmental stresses.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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