Journal of the korean academy of Pediatric Dentistry
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v.32
no.2
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pp.357-369
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2005
Streptococci are Gram-positive, facultative anaerobes and have no catalase activities. Among mutans streptococci containing ${\alpha}-type$ hemolytic activity, S. mutans is a causative agent for dental caries. As well as acid production yielding the demineralization of tooth enamel, adherence and colonization of S. mutans to the teeth are also important for its virulence. These early colonization are accomplished by the bacterial fibrillar protein, Antigen I/II (Ag I/II) and glucosyltransferase (GTF). Therefore, Ag I/II and GTF are reasonable targets for the development of vaccine against S. mutans GS-5. The ag I/II and gtfD genes from S. mutans GS-5 were cloned and sequenced. Sequence analyses showed the nucleotides sequence of cloned genes had high homology to the sequences previously reported. The sequence alignment of 280 nucleotides between the cloned Ag I/II and the available sequence of the corresponding S. mutans GS-5 showed the perfect match. Comparing with the sequence of gtfD from S. mutans UA159, the corresponding nucleotide sequence of S. mutans GS-5 showed some mismatches and the mismatches introduced changes in four residues out of 105 amino acids, yielding four missense mutations.
Vibrio cholerae, cause of the life-threatening diarrheal disease cholera, can be divided into different serogroups based on the structure of its lipopolysaccharide (LPS), which consists of lipid-A, core-polysaccharide and O-antigen polysaccharide (O-PS). The O1 serogroup, the predominant cause of cholera, includes two major serotypes, Inaba and Ogawa. These serotypes are differentiated by the presence of a single 2-O-methyl group in the upstream terminal perosamine of the Ogawa O-PS, which is absent in the Inaba O-PS. To ensure the consistent quality and efficacy of the current cholera vaccines, accurate measurement and characterization of each of these two serotypes is highly important. In this study, we efficiently screened a phage-displayed human synthetic Fab library by bio-panning against Ogawa LPS and finally selected three unique mAbs (D9, E11, and F7) that specifically react with Ogawa LPS. The mAbs bound to Vibrio cholerae vaccine in a dose-dependent fashion. Sequence and structure analyses of antibody paratopes suggest that IgG D9 might have the same fine specificity as that of the murine mAbs, which were shown to bind to the upstream terminal perosamine of Ogawa O-PS, whereas IgGs F7 and E11 showed some different characteristics in the paratopes. To our knowledge, this study is the first to demonstrate the generation of Ogawa-specific mAbs using phage display technology. The mAbs will be useful for identification and quantification of Ogawa LPS in multivalent V. cholerae vaccines.
Salmonella infections cause the disease in pigs but also some zoonotic Salmonella serotypes can be transmitted to human through swine products, resulting in food poisoning. The objective of this study was to investigate the bacteriological prevalence and detection of invA gene using Salmonella specific polymerase chain reaction (PCR), the epidemiological characteristics related to Salmonella strains cultured from pig samples in Gangwon areas using serotyping, random amplified polymorphic DNA (RAPD) and pulsed field gel electrophoresis (PFGE) methods. During the period of November 2001 through April 2002, 1,174 ileocecal lymph node were collected from the slaughtered pigs raised in 38 farms located in Gangwon province. The samples were submerged in boiling water and macerated in saline and lymph node homogenates were inoculated into Tetrathionate broth with iodine (TTB, Difco, 0.5% iodine was added) for enrichment growth. Then additional tests were performed using several mediums, and suspects were identified by API 20E kit (BioMerieux) and PCR. Of total 1,174 samples from 38 farms, 44 (3.7%) were isolated as Salmonella spp from 13 farms (34.2%). Of 44 isolates, 31 were in Yangyang region, followed by 9 in Goseong, 2 in both Gangneung and Sokcho. However, there was no difference in regional isolation frequency. All isolates have a 521bp amplified product in Salmonella specific PCR with primer invA which encodes in proteins for invasion of epithelial cells. Of 44 recovered serotypes, 23 (52.3%) were S Eingedi, 10 (22.7%) S Schwarzengrund, 9 (20.5%) S Typhimurium, and 2 (4.5%) S Mbandaka. In RAPD analysis, there appeared to be unique bands distinguishing each serotype, although similarities exist between the different serotypes. Four serotypes of 44 Salmonella isolates appeared to fall into 14 different RAPD types. In PFGE analysis, 9 S Typhimurium were tested with XbaI enzyme and SpeI enzyme. The combination of results obtained with two enzymes subdivided the 9 S Typhimurium into 4 PFGE types.
Salmonella is an important food-and water-borne pathogen associated with acute gastrointestinal illnesses around the world. The most common serotypes isolated from humans are Salmonella enterica serotype Typhimurium (S. Typhimurium) and S. Enteritidis. Traditional detection methods for Salmonella are based on cultures using selective media and characterization of suspicious colonies by biochemical and serological tests. These methods are generally time-consuming and not so highly sensitive. Recently, the Loop Mediated Isothermal Amplification and real-time PCR has been used as a highly sensitive, specific, and rapid test for the presence of pathogenic bacteria. In this study, a LAMP and real-time PCR was used to detect S. Typhimurium and S. Enteritidis. We selected target genes, which were the in invA and a randomly cloned sequence specific for the genus Salmonella. With LAMP and real-time PCR, random sequence was detected from Salmonella spp, invA were detected from all strain of S. Typhimurium and S. Enteritidis. This assay indicate that the specificity, sensitivity and rapid of the LAMP and real-time PCR make them potentially valuable tools for detection of S. Typhimurium and S. Enteritidis.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.31
no.3
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pp.534-538
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2002
To investigate the antimicrobial effects of Scutellariae Radix extract against Vibrio parahaemolyticus from food samples, Vibrio parahaemolyticus strains isolated from Tapes philippinarum were examined for their sensitivity to Scutellariae Radix extract. Total 66 Vibrio parahaemolyticus strains were isolated from Tapes philippinarm 72 samples (91.7%). The serotypes of isolated Vibrio parahemolytics were K-I group 7 strains (10.6%), K-IV group 5 strains (7.6%), K-II group 2 strains (3.0%), K-V group 2 strains (3.0%), K-VII group 2 strains (3.0%), K-VI group 1 strains (1.5%), K-VIII group 1 strains (1.5%) and antisera UT K-group 46 strains (69.7%) on antisera agglutination test, but K-III group and K-IX group strains were not found. The growth curves of isolates showed lag phase, logarithmic phase, stationary phase and death phase as typical sigmoid curve on the shellfish samples. After 6 hours, the group containing Scutellariae Radix extract differs from the control on shellfish samples in the growth inhibition curves, and Vibrio parahaemolyticus were inhibited in more than 1000 ppm Scutellariae Radix extract. The morphological changes were observed by transmission electron microscope and the microbial cells membrane was destroyed by Scutellariae Radix extract.
At the present study, it was aimed to explore the molecular genetic characterization of multiple antimicrobial resistant Salmonella spp. isolates from pigs and cattle. A total of 138 Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) isolates were typed with phage, among them, 83.3% of S. Typhimurium tested could divide into a 10 phage types. Definitive type 193 (DT193) (25.4%) and DT195 (24.6%) were exhibited as the dominant types. DT104 and U302 were found from pigs and cattle. On the other hand, S. Enteritidis had 6 phage types, of them, phage type 21 (PT21) and PT11b were the popular types. In the plasmid profiles, 135 of S. Typhimurium isolates were exhibited 1 to 6 plasmid bands which molecular weight ranged from 90 to 2kb. 35 isolates (25.4%) harbored a 90kb plasmid which is thought to be the serotype specific virulence plasmid. Two of twenty five S. Enteritidis had common plasmids at 2 and 1.5kb. With multiplex polymerase chain reaction, virulence genes (invA and spvC) were detected from all Salmonella spp. from 167 of S. Typhimurium, S. Enteritidis and chloramphenicol resistant S. Schwarzengrund, but some drug resistant genes, such as PSE-1, cml/tetR and flo were not determined but other drug resistant genes, for example TEM and int were found. The detection rates of spvC, TEM and int gene was 35.3%, 29.3% and 72.5%, respectively. The TEM gene was highly popular in S. Typhimurium, which was detected from ampicillin and amoxicillin resistant strains as 95.9%. int gene was able to detect from all the isolates identified as multidrug resistsnt (MDR), particularly DT193 was thought as the most prevalent virulence and multidrug resistance isolate. The major plasmid profile and drug resistance pattern of DT193 were 90, 40, 10.5, 6.3, 3.0kb and ACCbDNaPSSuT, respectively. MDR was commonly found in other phage types, particularly DT104, U302 and DT203.
This study investigated the pathogenicity of different genotypes of infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) strains isolated from infected rainbow trout in Gangwon Province. RtPc0314c and RtPc0314g strains belonging to the JRt-Shizuoka lineage and RtPc0816g strain belonging to the JRt-Nagano lineage showed 100% cumulative mortality when inoculated at a high titer. In addition, more rapid necrosis was observed in rainbow trout infected with RtPc0314c and RtPc0314g mutations. When inoculated at a low titer, 100% mortality was not observed until the end of the experiment, but the mortality was higher in rainbow trout infected with a mutant strain belonging to the JRt-Shizuoka linage than a mutant strain belonging to the JRt-Nagano lineage. A histopathological analysis showed a clear signature of infection in kidney and spleen tissues upon infection with RtPc0314c and RtPc0314g but no signature of infection associated with the Rt03186 strain. Based on the results in this study, it seems that strains belonging to the JRt-Shizuoka lineage in Gangwon Province IHNV are more pathogenic.
Symbiotic effectiveness and significance of Bradyrhizobium japonicum strains in five serogroups which were consisted of three corresponding serotype strains, respectively, indigenous to Korean soils were evaluated in terms of utility of strain serogroup for symbiotic improvement on soybean plant. The nodulation by rhizobia of each serogroup on four soybean cultivars(Danweonkong, Kwangkyo, Pangsakong, and Eunhakong) was good in order of USDA 123 > YCK 150 > YCK 117 > YCK 141 > USDA 110 serogroup members. Shoot dry weight of soybean was relatively high with USDA 110 serogroup members as well as with YCK 141 serogroup members, whereas the effectiveness of USDA 123 serogroup members was the lowest among the serogroups examined. In particular, Pangsakong among soybeans inoculated with five-serogroup members was positively outstanding on nodulation and shoot dry weight of the plant. Overall, symbiotic parameters of serogroup members associated with soybean plant such as nodule number, nodule mass, $N_2$ase activity, and shoot dry weight showed significantly different responses at level of 1% probability among both rhizobial serogroups and soybean cultivars, respectively. The rate in symbiotic similarity of the members of each serogroup from F-test ($$P{\leq_-}0.05$$) was 100% for nodule No., 90% for $N_2$ase activity. and 80% for soybean shoot dry weight. Taken together, the results indicated that the serological grouping of B. japonicum could be strongly useful for improving the symbiotic effectiveness hetween soybean and Rhizobium.
Salmonella is closely related with human health of modern society which has concern increased in livestock goods consumption as well as give economic damage throughout the chicken industry such as farm, hatchery, slaughter house and processing plant. From 2007 to 2011, this study investigated Salmonella prevalence from 200 old hen delivery trucks which deliver old egg-laying hens and broiler breeders in Korea. The prevalence of Salmonella species was 38.0% in old hen delivery truck. Serogroup C1 was the most frequently detected serogroup of Salmonella, followed by the serogroups D1, C2 and B. A total of 25 serotypes were identified and Salmonella infantis was the most frequently isolated serotype. In addition, we applied disinfectant to old hen delivery truck for the reduction of Salmonella contamination. The disinfectant consists of formaldehyde, glutaladehyde and quaternary ammonium compound was applied to the trucks. Salmonella isolation rate was significantly decreased after disinfection from 38.0% to 7.5%. Disinfectant could not effectively reduce Salmonella contamination at a dilution of 1:200 which is recommended by manufacturer, but Salmonella isolation rate was significantly decreased at a dilution of 1:50. Since old hen delivery truck could be a potential vector to carry Salmonella into farms and abattoirs, chicken delivery truck should be disinfected thoroughly and sufficiently to control contamination of farms and abattoirs.
Cho, Byoung Wook;Kwon, Seong Eun;Kwon, Mun Ju;Hur, Myong Je;Kim, Kyung Seon;Hong, Young Jin;Kim, Soon Ki;Kwon, Young Se;Kim, Dong Hyun
Pediatric Infection and Vaccine
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v.23
no.1
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pp.46-53
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2016
Purpose: Enterovirus (EV) infection in children can manifest various diseases from asymptomatic infection to nonspecific febrile illness, hand-foot-mouth disease, and aseptic meningitis. This study was aimed to investigate epidemiology and clinical significance of various genotypes of EV infections in pediatric inpatient. Methods: We collected the stool samples from the admitted pediatric patients in Inha University Hospital from March 2014 to March 2015. EV detection and genotype identification were performed by real-time RT-PCR and semi-nested RT-PCR. Phylogenetic trees were constructed by neighbor joining method. Results: A total of 400 samples were collected during study period and 112 patients (28%) were diagnosed with EV infections. The mean age of EV positive patients was 2.66 years (0.1-14) and sex ratio was 1.73:1. Genetic sequences of EVs were identified; coxsackievirus B5 (17, 15.2%), coxsackievirus A16 (13, 11.6%), enterovirus 71 (10, 8.9%), and coxsackievirus A2 (9, 8.0%). Nonspecific febrile illness (96, 86%) was the most common clinical manifestation and the duration of fever was 0-11 days (mean 3.1 days). Rash (44, 39%) and meningitis (43, 38%) were followed. Patients who were attending daycare center or had siblings accounted for 82.1%. Phylogenetic relationship tree revealed 6 distinct genogroups among 56 types of EVs. Conclusions: This study is the report of epidemiology, serotype distribution and clinical manifestations of children with EV infection in Incheon. This data will be helpful for further study about the epidemiology of EV infection in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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