Alcohol Dehydrogenase Active on Furfuryl Alcohol from Pseudomonas sp. (Part 1) Purification and Properties of Alcohol Dehydrogenase

Pseudomonas 속균이 생산하는 Alcohol Dehydrogenase에 관한 연구 (제1보) Alcohol Dehydrogenase 정제와 일반적성질

We isolated a strain of Pseudomonas sp. from soil to utilize furfuryl alcohol as a carton source by enrichment culture. Alcohol dehydrogenase from this bacteria was purified 700-fold by Sephadex G-200 and affinity column chromatography to be homogeneous by electrophoresis and analytical centrifugation. This enzyme had a molecular weight of 120,000 and was composed of four subunits consisting of 266 amino acid residues. The optimal pH of the enzyme was pH 8.5 to 9, and the optimal temperature was, 45$^{\circ}C$. This enzyme was stable at 55$^{\circ}C$, but lost 80% of its activity in 10min at 6$0^{\circ}C$.

본 실험에서 얻은 성과를 요약하면 다음과 같다. \circled1 Furfuryl alcohol를 단일탄소원으로 이용하여 ADH를 생산하는 세균을 토양중에서 분리하고, 균학적 성질에 따라 Pseudomonas sp.라 동정하였다. \circled2 본 효소는 disc 전기영동적, SDS 전기영동적, 초원침강적, 분석에서 완전히 균일하였다. \circled3 본 효소의 침강계수는 7.6S, 반응최적활성 pH는8.5~9.0에 위치하였으며, 최적활성온도는 45$^{\circ}C$ 이었다. \circled4 4개의 동일 subunit (M.W 30,000)가 회합하여 본 활성효소를 형성하는 tetramer이며, 분자량은 개략 120,000이다. \circled5 본 효소의 subunit 1분자는 266개의 amino 산 residues로 구성되고 있다.