Separation of Lipase Using Reverse Micelles in Spray Column

Spray Column에서 역미셀을 이용한 Lipase의 분리

Lipase was separated using reverse mlcelles in a spray column. The 50 mM AOT-Isooctane solution was used as reverse micellar solution for the extraction of lipase (crude containing 25% Protein). Ionic strength was controlled by KCl(0.1M KCl for extraction, 0.5M KCl for back exlractlon). Acetate buffer and phosphate buffer were used for control of pH. The efficiencies of extraction and stripping were 30% and 50%. An increase of circulation did not change the efficiency of extraction in forward extraction. The optimum flow rate was around 0.10ml/sec.

연속추출시 그 상의 분리가 용이한 spray column 에서 역미셀을 이용한 추출에 영향을 미치는 pH, 접촉횟수, 유속, 수용상과 유기상의 비 등 추출에 영향을 미치는 여러 인자들을 조사해 보았다. 그 결과 lipase는 등전점보다 낮은 3.6-4.5 사이에서 추출이 잘되었으며 역추출시에는 그와 반대로 등전점보다 높은 pH인 8.0-9.0에서 잘 추출되었다. 수용상과 유기상 사이의 접촉횟수가 증가함에 따라 추출량이 증가되었으며 추출시 계면활성제의 손실 때문에 유기상의 계속적인 공급이 필요하다. 유속의 효과는 접촉면적과 유기상 사이의 물의 함량의 반대효과로 0 0.068ml/sec과 0.101ml/sec사이에서 최적의 값을 갖는다. 수용상과 유기상간의 비에 따른 추출량은 예측했던데로 수용상의 양이 많을수록 그 추출량이 급격히 증가하는 경 향을 보였다. 각각에서 활성도는 추출전에 비해 70%의 회수율을 보였다.