Development of Optimal Culture Media for the Stable Production of Mushroom

버섯의 안정적 생산을 위한 최적배지의 개발

  • Gal, Sang-Wan (Dept. of microbiological engineering, Chinju national University) ;
  • Lee, Sang-Won (Dept. of microbiological engineering, Chinju national University)
  • 갈상완 (진주산업대학교 미생물공학과) ;
  • 이상원 (진주산업대학교 미생물공학과)
  • Published : 2002.05.31

Abstract

Several antagonistic bacteria, SD-1, 4, 10, 11, 14, 15, and 16, which have strong CMCase and amylase activities, were isolated from the fermented mushroom media. Among them, SD-1, 10, 11, and 15 have strong antibacterial activities against the mushroom pathogenic bacteria Pseudomonas sp., and SD-1, 10, 11, 14, and 16 have strong antifungal activities against the mushroom pathogenic fungi, Trichoderma sp. SD-14, 15, and 16 did not inhibit the growth of mushroom Pleurotus eryngii ASI-2302, and Pleurotus ostreatus ASI-2042 and ASI-2180. When the culture broth mixture of the seven bacterial strains was applied to the mushroom media, the growths of pathogens, Pseudomonas sp. and Trichoderma sp., were inhibited.

세균성 갈색무늬병과 푸른곰팡이 병에 길항력을 갖는 느타리버섯배지를 개발하기 위해서 자연계로부터 항균 미생물을 순수분리하였다. 분리균주가 생산하는 섬유성분해 효소 및 전분분해 효소의 활성을 검토한 결과 SD-1, 10, 11 및 16균주는 carboxy methyl cellulase(CMCase) 활성이 높았고, SD-4, 10, 14 및 15균주는 glucoamylase활성이 높은 것으로 나타났다. 그리고 이들 분리 균주는 carboxy methyl cellulose(CMC) 및 전분 함유 평판배지에서 뚜렷한 clear zone을 형성하였다. 병원성균에 대한 항균력을 검토한 결과 SD-10과 SD-11은 Pseudomonas tolaasii ATCC-14340 및 P. tolaasii ATCC-51312의 병원균에 강한 길항작용을 나타내었고, SD-1, SD-10및 SD-ll은 푸른곰팡이 병을 유발하는 Trichoderma virence와 T. harzianum에 강한 길항작용을 나타내었다. 분리균과 버섯 균사체와의 생육관계를 검토한 결과 SD-1은 Pleurotus ostreatus ASI-2042에, SD-15는 Pleurotus ostreatus ASI-2180에 약간의 생육저해를 일으킬 뿐 다른 분리균주들은 전혀 버섯균사체의 생육에 영향을 미치지 못하였다. 분리균주의 최적생육온도는 $30{\sim}35^{\circ}C$이었고, 생육가능온도 범위는 $15^{\circ}C{\sim}55^{\circ}C$로 매우 넓었다. 분리균 중에서 SD-1, 10 및 11균주를 느타리버섯 재배현장에 적용시켰을 때 대조구에 비하여 분리균을 접종한 시험구에서는 느타리버섯의 균사 및 자실체의 성장이 매우 균일하고 버섯의 품질이 우수하였다. 그리고 분리균 중에서 SD-10과 11을 균체지방산 조성을 검토한 결과 Bacillus sp.과 아주 유사하였다. 수자원의 절약과 하천수량의 증대에도 기여할 수 있을 것이다. (2.21%), 그리고 열매에서는 ${\alpha}-pinene$ (20.24%) > 1,8-cineole (11.47%) > ${\beta}-pinene$ (9.79%) > u-terpineol (7.08%) > sabinene (3.68%) limonene (2.77%)의 순서로 조성비율이 높았다. 전반적으로 순비기나무의 잎과 열매에서 분리한 정유에서는 monoterpene류의 조성비율이 높았으나 꽃과 줄기에서는 잎이나 열매에 비해 sesquitepene류, diterpene류 이외에도 구조를 동정하지 못하였으나 diterpene류 일 것으로 예상되는 분자량이 비교적 큰 성분들의 조성비율이 높았다./TEX>에서는 TA98 균주에서 $(100{\mu}g/plate)$의 시료농도에서는 부탄올 분획물이 89.92%로 가장 높은 억제효과를 보였으며 TA100 균주에서는 메탄올 추출물이 77.47%로 가장 높은 억제효과를 나타내었다. 암세포주(A549, Hep3B, MCF-7)에 대한 씀바귀 뿌리추출물의 세포독성을 알아보기 위하여 실험한 결과, 페암세포주인 A549세포에서는 에칠아세테이트 분획물$(250{\mu}g/ml)$이 91.67%로 가장 높은 억제효과를 나타내었고, 간암세포주인 Hep3B에서는 에칠아세테이트 분획물 $(500{\mu}g/ml)$이 75.01%로 가장 높은 억제효과를 나타냈으며, 유방암 세포주인 MCF-7에서도 에칠아세테이트 분획물$(500{\mu}g/ml)$이 84%로 가장 높은 억제효과를 보였다. 정상 간세포주인 293에 대하여 시료농도에 따른 세포독성 효과를 나타낸 것으로 $(500{\mu}g/ml)$ 시료 첨가시 암세포에 대하여 대부분 50% 전후(물 분획물 제외)의

Keywords

References

  1. Kawade, M., Sumiya, T, Shimura, K. and Ito, H. (1984) Activation of the reticulo-endothelial system by antitumor polysacchande from Agaricus btazei iwade. Medicine and Biotogy 109, 299-302
  2. Lee, B. W., Im, G. H., Kim, D. W., Park, K. M., Son, S. H. and Shon, T. H. (1993) Cultural characteristics and pilot scale fermentation for the submerged mycelial culture of Lentinus edodes. Kor. J. Appl. Microbiol. Biotechnol. 21, 609-614
  3. Hong, J. S. (1980) Nuthtion value and medicine efficacy of mushroom. Food Industry 53, 79-84
  4. Kwon, J. H., Byun, M. W., Cho, H. 0., Kim, Y. J. and Kim, J. G. (1987) Effect of chemical fumigant and $\gamma$-rays on the physicochemical properties of dried oak mushroom. Korean J. Food Sci. Technol. 19, 273-278
  5. Wells, J. M., Sapers, G. M. Felt, W. R, Butterfield, J. E., Jones, B., Bouzar, H. and Miller, F. C. (1996) Postharvest discoloration of the cultivated mushroom Agaricus bisporus caused by Pseudomonas totaasii, P. reactans and P. gingeri. Phytopathology 86, 1098-1104 https://doi.org/10.1094/Phyto-86-1098
  6. Healey K. W. and Harvey, J. M. (1989) A biological control agent for the mushroom industry, Proceedings Eighth Aust. Biotechnol. Conference 322-324
  7. Nutkins, C. J., Mortishire-Smith, J. R., Packman, C. L., Brodey, L. C. and Rainey, B. P. (1991) Structure determination of tolaasin, an extracellular lipodepsipeptide produced by the mushroom pathogen Pseudomonas totaasii paine. J. Am. Chem. Soc. 113, 2621-2627 https://doi.org/10.1021/ja00007a040
  8. Paine, S. G. (1919) Studies in bacteriosis II. A brown blotch disease of cultivated mushroom. Ann. Appl Biol. 5, 206-219 https://doi.org/10.1111/j.1744-7348.1919.tb05291.x
  9. Tolaas, A. G. (1915) A bacterial disease of cultivated mushrooms. Phytopathology 5, 51-54
  10. Kim, J. W., Kim, K. H. and Kang, H. J. (1994) Studies on the pathogenic Pseudomonas causing bacterial disease of cultivated mushrooms in Korea. 1. On the causal organisms of the rots of Agaricus bisporus, Pteurotus ostreatus and Lentinus edodes. Korean J. Ptant Pathol. 10, 197-210
  11. Kim, J. W., Kwon, S. I. and Kang, H. J. (1995) Studies on the pathogenic Pseudomonas causing bacterial disease of cultivated mushrooms in Korea. 2. Bactehological characteristics of P. tolaasi causing mushroom brown blotch and white line reacting organisms. Korean J. Ptant Pathol. 11, 353-360
  12. Seo, G. S. (2001) Mushroom pathogen and its protection. Mushroom 5, 17-38
  13. Mi11er, G. L., Blum, R., Gkennon, M. E. and Burton, A. L. (1960) Measurement of carboxymethyl cellulase activity. Anal. Biochem. 2, 127-132
  14. Lee, J, S., Shin, Y. K., Yoon, J. H., Takeuchi, M., Pyun, Y. R. and Park Y. H. (2001) Sphingonwnas aquatitis sp. nov., Sphingomonas koreensis sp. nov. and Sphingomonas taejonensis sp. nov. yellow-pigmented bacteria isolated from natural mineral water, International J. of Systematic and Evolutionary Micmbiology 51, 1491-1498 https://doi.org/10.1099/00207713-51-4-1491
  15. Nari, N. G. and Fahy, D. C. (1972) Bacteria antagonistic to Pseudonwnas tolaasii and control of brown blotch of the cultivated mushroom Agaricus bisporus. J. Appl. Bact. 35, 439-442 https://doi.org/10.1111/j.1365-2672.1972.tb03720.x
  16. Wong, W. C. and Preece T. F. (1985) Pseudomonas tolaasii in mushroom (Agaricus bispoms) crops: activity of formulation of 2-bromo-2-nitropane-1,3-dio1 (bronopol) against the bacterium and the use of this compound to control blotch disease. J. Appl. Bacteriol. 58, 275-281 https://doi.org/10.1111/j.1365-2672.1985.tb01461.x