This work focused on screening and characterizing antibiotic-producing actinomycetes to develop new antibiotics that can overcome the growing resistance of disease-causing microbes. One-hundred actinomycetes strains were isolated from soil samples from Chungcheongbuk-do, Korea using various kinds of actinomycetes isolation media, including a starch casein agar medium and potato dextrose agar (PDA). Among them, strain BCNU 1030 was determined to show strong antimicrobial activity against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Biochemical, physiological, and 16S rRNA sequence analyses indicated that strain BCNU 1030 belonged to the genus Streptomyces. Strain BCNU 1030 exhibited antibiotic activity against a wide range of bacteria, especially methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). The minimum inhibitory concentration (MIC) of BCNU 1030 dichloromethane extract was determined to be $0.78\;{\mu}g/ml$ for MRSA CCARM 3090. Therefore, Streptomyces sp. BCNU 1030 has potential for anti-MRSA drug development.
Kim, Min-Sun;Park, So-Hyun;Kim, Dong-Hwi;Heo, Moon-Soo
Journal of Life Science
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v.24
no.8
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pp.880-886
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2014
In this study, we isolate and identify bacteria from seawater collected from Jeju coast, to evaluate the antimicrobial activity against the fish pathogenic bacteria. 14 bacterial strains were isolated and identified using physiological, biochemical and molecular tools. Antibacterial activity of all the 14 isolates were screened against four major fish pathogens namely, two Gram-positive: Streptococcus iniae, Streptococcus parauberis and two Gram-negative: Vibrio anguillarum, Edwardsiella tarda. Results revealed that among the 14 isolates, MK-11 was found to have antibacterial activity against S. iniae, S. parauberis, V. anguillarum Particularly, S. iniae was susceptibility with the MIC value of $250{\mu}g/ml$. The biochemical and physio-chemical results reveal that MK-11 had the sugar-alcohol disassemble ability of the D-sorbitol and D-mannitol. Also the utilization of the yeast extract, sorbitol and di-potassium phosphate were noted to be high. The optimum culture condition such as pH and temperature was recorded as pH 6.0, $25^{\circ}C$ and along with 1% NaCl which differs from the previous reports particularly in nutrient resolutions. As results of the analysis of 16S rDNA sequences, MK-11 show the high similarity with Paenibacillus polymyxa, P. jamilae, P. brasilensis 99.78%, 99.43%, 99.39%, repectively. Hence, in the present study, the isolated Paemibacillus sp. MK-11 from Jeju seawater possesses the antibacterial activity against fish pathogens and it could be used as a new antibiotic agents against the gram positive fish pathogens.
Seo, Yong-Chang;Choi, Woon-Yong;Kim, Ji-Seon;Zou, Yun-Yun;Lee, Choon-Geun;Ahn, Ju-Hee;Shin, Il-Shik;Lee, Hyeon-Yong
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.18
no.6
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pp.389-397
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2010
This work was to improve antimicrobial activities of horseradish by encapsulated with edible biopolymers such as lecithin and gelatin since it has been difficult to directly use horseradish extracts into foods and food containers due to its strong and undesirable flavors. It was shown that most of the nanoparticles containing the extracts were well formed in round shape with below 400 nm diameter as well as fairly stable and less odd flavors in various pH ranges by measuring zeta potentials. The encapsulation efficiencies of nanoparticles were estimated as 66.6% and 53.4% for lecithin and gelatin, respectively. Minimal Inhibitory Concentration (MIC) of both nanoparticles against G(+), Listeria monocytogenes and G(-), Salmonella typhimurium were also measured as 79 ppm based on AIT concentrations in the extracts, whose activities were about 65% higher than the case of adding crude extract. It was also found that the nanoparticles efficiently penetrated into the cell membrane and started to destruct the cells after 6 hours cultivation under Transmision Electron Microscopy observation. These results prove that the nano-encapsulation of the horseradish extracts can be employed to directly treat into the foods and food containers for antimicrobial purposes with the aids of aerosolization system, by using small amounts of the extracts and having less flavors due to masking effects of nanoparticles.
Kim, Myoung-Sug;Jun, Lyu-Jin;Shin, Soon-Bum;Park, Myoung-Ae;Jung, Sung-Hee;Kim, Kwang-Il;Moon, Kyung-Ho;Jeong, Hyun-Do
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.20
no.12
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pp.1735-1743
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2010
The full-length genes gyrB (2,415 bp), parC (2,277 bp), and parE (1,896 bp) in Edwardsiella tarda were cloned by PCR with degenerate primers based on the sequence of the respective quinolone resistance-determining region (QRDR), followed by elongation of 5' and 3' ends using cassette ligation-mediated PCR (CLMP). Analysis of the cloned genes revealed open reading frames (ORFs) encoding proteins of 804 (GyrB), 758 (ParC), and 631 (ParE) amino acids with conserved gyrase/topoisomerase features and motifs important for enzymatic function. The ORFs were preceded by putative promoters, ribosome binding sites, and inverted repeats with the potential to form cruciform structures for binding of DNA-binding proteins. When comparing the deduced amino acid sequences of E. tarda GyrB, ParC, and ParE with those of the corresponding proteins in other bacteria, they were found to be most closely related to Escherichia coli GyrB (87.6% identity), Klebsiella pneumoniae ParC (78.8% identity), and Salmonella Typhimurium ParE (89.5% identity), respectively. The two topoisomerase genes, parC and parE, were found to be contiguous on the E. tarda chromosome. All 18 quinolone-resistant isolates obtained from Korea thus far did not contain subunit alternations apart from a substitution in GyrA (Ser83$\rightarrow$Arg). However, an alteration in the QRDR of ParC (Ser84$\rightarrow$Ile) following an amino acid substitution in GyrA (Asp87$\rightarrow$Gly) was detected in E. tarda mutants selected in vitro at $8{\mu}g/ml$ ciprofloxacin (CIP). A mutant with a GyrB (Ser464$\rightarrow$Leu) and GyrA (Asp87$\rightarrow$Gly) substitution did not show a significant increase in the minimum inhibitory concentration (MIC) of CIP. None of the in vitro mutants exhibited mutations in parE. Thus, gyrA and parC should be considered to be the primary and secondary targets, respectively, of quinolones in E. tarda.
Antimicrobial effects of Camellia japonica L. were determined against Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Staphylococcus aureus, and Listeria monocytogenes using paper disc method, and minimum inhibitory concentrations (MICs) were measured. Methanol extract (MEex), water fraction (WAfr), and butanol fraction(BUfr) showed antimicrobial effects against all tested microorganisms, with MEex showing strong antimicrobial effect against S. aureus and L. monocytogenes, and WAfr, Bufr, and ethylacetate fraction (EAfr)against S. aureus. No effects were observed in n-hexane fraction (HEfr) and chloroform fraction (CHfr) against all tested microorganisms. All species grown in the medium adding fractions of Camellia Japonica L. leaves extact were inhibited from WAfr and BUfr, repectively.(meaning not clear) MEex showed over 25% inhibitory effect against all tested microorganisms. BUfr showed over 50% inhibitory effect against all microorganisms except L. monocytogenes. EAfr and WAfr showed over 30% effect against S. aureus and L. monocytogenes. MICs of MEex against S. typhimurium and BUfr against S. aureus were 625 g/mL, indicating C. japonica L. extract can exert antimicrobial activity even at low concentration.
To investigate potential characteristics of clay minerals (illite, kaolin, zeolite, vermiculite, and bentonite) for food industry application, antioxidative properties of clay minerals, electron-donating ability (EDA), peroxide value (POV), and thiobabituric acid (TBA) were measured, and antimicrobial activity against several food spoilage microorganisms were evaluated by minimum inhibition concentration (MIC) method. Changes in components by cooking clay minerals added to stored rice were measured by GC-MS. DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) analysis results revealed bentonite has strongest EDA at 20.6%. Antioxidant activities measured based on POV were similar to DPPH results. Induction period of linoleic acid with vermiculite was longest among. TBA results revealed zeolite hasstrongest antioxidant ability. Growth inhibition against E. coli and S. aureuswas observed in illite, vermiculite, and zeolite. Aroma components indicated decrease in hex anal, pent anal, non anal, linoleate, stearic acid, and oleic acid when clay minerals were added to stored rice. These results indicate that several clay minerals have antioxidative and antimicrobial abilities and improve flavor profiles in stored rice.
To develop a selective medium for the isolation and the detection of leuconostocs from the various samples including fermented vegetables, ten strains of leuconostocs and seven strains of lactobacilli were tested for their sensitivity to various antibiotics. The basal-medium containing 5 ${\mu}g/ml$ of novobiocin inhibited the growth of lactobacilli completely, but not that of leuconostocs. On the basis of this result, a new selective medium was developed and to be named NLS medium. This medium contains 1% Tryptone (Difco), 0.1% Yeast Extract (Difco), 2% sucrose, 0.1% Beef Extract (BBL), 0.5% sodium acetate, 0.2% ammonium sulfate, 0.01% magnesium sulfate, 0.2% dipotassium phosphate, 0.05% sorbic acid, 75 ppm sodium azide (Sigma), 0.1% (vol/vol) Tween 80, 30 ${\mu}g/ml$ of Vancomycin (Sigma), 5${\mu}g/ml$ of Novobiocin (Sigma), 0.5${\mu}g/ml$ of cysteine HCI, and 1.5% Agar (Difco). All of the eighty six isolates obtained from some foodstuffs were identified as members of the genus Leuconostoc. Comparative counts with the MRS, PES, LUSM, and NLS medium indicated that the recovery percent was lower than other selective media. Therefore, this result suggested that NLS medium was suitable for the isolation of leuconostocs, but not for counting or enumerating.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.32
no.8
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pp.1214-1220
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2003
Antimicrobial activity of Rhus javanica (RJ) extract against animal husbandry disease-related bacteria was determined by a paper disc method. The RJ extracts showed a significant antimicrobial activity against Gram positive (+) bacteria and especially the activity was most potent against L. monocytogenes and S. epidermidis. Minimum inhibitory concentrations (MIC) of the MeOH and EtOH extracts of RJ were in the range of 0.8 ∼ 16 mg/mL and 0.8 ∼ 10 mg/mL, respectively. Furthermore, among five solvent fractions (n-hexane, CHC1$_3$, EtOAc, n-BuOH and $H_2O$ frs.) from MeOH extract of RJ, the EtOAc fr. exhibited the most significant antimicrobial activity The antimicrobial activities of RJ extracts against most microbial strains were unstable by either heat treatment or acid treatment. The inhibitory effect of RJ extracts on microbial cell growth was further examined by the addition of 0, 100, 300, and 500 ppm of RJ extracts into growth medium. The growth of gram positive (+) bacteria, S. aureus, S. epidermidis and L. monocytogenes was inhibited for 72 hours when at least 300 ppm of RJ extracts added, but the growth of gram negative (-) bacteria was only inhibited when at least 500 ppm of RJ extracts were added. Taken together, tile antimicrobial activities of RJ extracts were more effective against gram positive (+) bacteria compared to those against gram negative (-) bacteria.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.30
no.6
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pp.1164-1170
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2001
Antimutagenic and antimicrobial effects of cucumber extracts were investigated. Antimutagenic effects of cucumber extract against aflatoxin (AFB$_1$) as indirect mutagen and N-methyl-N'-nitro-N-nitrcsoguanidine (MNNG) as direct mutagen using the Ames assay system with Salmonella typhimurium TA100 were studied. 1.25~5.0% of methanol extract exhibited 11 ~ 17% of antimutagenity against AFB$_1$ and 46~85% of antimutagenity against MNNG. Among fractions of methanol extract, hexane fraction exhibited the highest antimutagenic effect against AFB$_1$ (89%) and butanol fraction exhibited the highest antimutagenic effect against MNNG (95%). Antimicrobial effects of cucumber extract were investigated on the eleven microorganisms. Methanol extract showed anitimicrobial effect on eight microorganisms. Among these tested microorganisms, Klebsiella pnemonia KCTC 2208, pseudomonas aeruginosa KCTC 2004 were the most sensitively inhibited with 13 mm clear zone on holo test. Hexane fraction showed anitimicrobial effect only on Vibrio parahaemolyticus KCTC 2471. Chloroform and ethyl acetate fractions showed a weak effect. V. parahaemolyticus showed the lowest minium inhibitory concentration (MIC) (500 ppm) among eleven tested microorganisms by methanol extract. Sterilization effect of 1% methanol extract on P. aeruginosa incubation is 10 times stronger than 0.5% methanol extract. It estimated to need 26 min for the sterilization of 90% P. aeruginosa cell counts by 1% methanol extract but 250 min by 0.5% methanol extract.
Pure Bombus ignitus venom samples were submitted to two-dimensional gel electrophoresis. A total of 64 excised spots were analyzed by mass spectrometry. Three main proteins resulted in the identification have not been described in other bee venoms before. Dose-dependence against human carcinoma (Hep3B, BT-20, A549 and AGS) were observed from 1ng/ml to 100ng/ml. Expecially, the treatment of 100ng/ml B. ignitus venoms showed the highest cytotoxicity with 55% against hepatocellular carcinoma (Hep3B). The B. ignitus venoms showed strong antimicrobial activities against Enterococcus faecium and Shigella sonnei, and practically antimicrobial activity against the other microorganisms tested. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of E. faecium and S. sonnei, were 0.256ug/ml, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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